专利名称：测定芦笋植株体内的芦丁含量差异的方法
技术领域：
本发明涉及植物体内生物活性物质测定领域，尤其涉及一种测定芦笋植株体内的芦丁含量差异的方法。
背景技术：
芦笋，学名石刁柏，风味独特、营养丰富，更有防癌抗癌的神奇功效，素有“蔬菜王” 之美称。这主要是因为其含有多种调节人体生理功能、预防慢性病发生等保健作用的生物活性物质。其中芦丁因其独特的功能和效用，广受大家的关注，芦丁又称芸香苷，为维生素P 的重要组成部分，具有维持血管正常渗透压，减低血管脆性的作用，在临床上主要用于动脉硬化、高血压的辅助治疗。现在国内提取芦丁的主要原料为槐米，也有从苦荞麦中提取的， 近年才开始尝试从石刁柏(芦笋)中提取，但不同品种芦笋中芦丁分布不均，雌雄株中的分布更是千差万别，使得芦笋中芦丁提炼率低，对于芦丁的提取和精制都带来很大的不便，不能充分满足市场需求的状况。现阶段，对于芦丁的研究，在槐米、荞麦中研究较多，对于芦笋方面，多在提取方法的改进，以及对芦笋不同段中芦丁的含量等方面进行研究。
发明内容
本发明实施方式的目的是提供一种测定芦笋植株体内的芦丁含量差异的方法，可以准确测出不同品种的雌雄株芦笋植株体内的芦丁含量的差别，其测定准确、效率高。解决上述技术问题的技术方案如下本发明实施方式提供一种测定芦笋植株体内的芦丁含量差异的方法，该方法包括将待测定的不同品种芦笋植株进行雌雄鉴定后，取下鉴定后的芦笋植株的根、嫩茎及叶片分别制成样品溶液；将各样品溶液与对照品溶液分别进行高效液相色谱分析得出各品种芦笋植株体内的芦丁含量的谱峰，通过计算谱峰面积比较芦丁含量的差异。根据上述提供的技术方案可知，本发明实施方式的测定方法，通过对不同品种芦笋植株进行雌雄鉴定后，再以鉴定后的芦笋植株的根、嫩茎及叶片分别制成样品溶液，将各样品溶液分别与对照品溶液分别进行高效液相色谱分析得出各品种芦笋植株体内的芦丁含量的谱峰，再通过计算谱峰面积比较芦丁含量的差异。该方法不但可测定不同品种芦笋雌雄株的芦丁含量差异，还可以同时测定不同品种芦笋不同部位的芦丁含量差异。该方法操作简单，测量准确率高，测定效率高。
具体实施例方式下面结合具体实施例对本发明中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明的保护范围。本发明实施例提供的测定芦笋植株体内的芦丁含量差异的方法，可用于对不同品件的雌雄芦笋植株以及它们不同部件的芦丁含量差异进行测定，该方法包括将待测定的不同品种芦笋植株进行雌雄鉴定后，取下鉴定后的芦笋植株的根、嫩茎及叶片分别制成样品溶液；将各样品溶液分别与对照品溶液分别进行高效液相色谱分析得出各品种芦笋植株体内的芦丁含量的谱峰，通过计算谱峰面积比较芦丁含量的差异。上述方法中，采用新鲜的芦笋植株作为待测定的不同品种芦笋植株。上述方法中，所述取下鉴定后的芦笋植株的根、嫩茎及叶片分别按照下述方法制成样品溶液将芦笋植株的根、嫩茎及叶片烘干后分别粉碎成粗粉；制备对应的样品溶液时，称取对应的所述粗粉lg，甲醇回流2次，每次50ml，回流时间共1小时，滤过，合并甲醇滤液，浓缩，残渣用甲醇转移至IOml容量瓶中，甲醇稀释至容量瓶的刻度(即标示IOml的刻度处)处，摇勻，用0. 45 μ m的微孔滤膜滤过，即得到样品溶液。上述方法中，所述对照品溶液为质量浓度为lg/ml芦丁溶液。本实施例的测定方法，不但可以测出同一品种芦笋的不同部位的芦丁含量的差异，也可以测出同一品种雌雄株间的芦丁含量的差异。该方法具有操作简单，测量准确，效率高的优点，测量时采用的高效液相色谱法具有高压、分离效能高、灵敏度高、分析速度快、 载液流动速度快，应用范围广等特点。下面结合具体测定过程对上述方法作进一步说明。该方法具体是采用高效液相色谱法，测定芦笋雌雄株间芦丁含量的差异操作流程为待测品种选择一雌雄株的鉴定一抽取供试样品一对照品及供试溶液的制备一进行高效液相色谱一数据分析(1)待测品种选择可选用了十种常见优质的芦笋品种，如可采用申请人于2000年在北京市昌平区金六环农业园的蔬菜基地石刁柏园栽种的石刁柏；(2)雌雄株的鉴定选定各品种的芦笋植株后，可逐个鉴别芦笋植株雌雄性别，并做出标记；(3)抽取供试样品在调查出芦笋的雌雄后，进行随机抽取芦笋植株作为供试材料，让后分别采集它们的嫩茎、叶片、根作为供试样品；(4)对照品及供试溶液的制备对照品溶液的制备精密称取芦丁对照品10mg，置于IOml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇勻，即得(每Iml中含芦丁 Ig)。供试品溶液的制备将芦笋植株的根、嫩茎及叶片烘干后分别粉碎成粗粉；制备对应的样品溶液时，精密称取对应的所述粗粉Ig(如制备芦笋植株的根的样品溶液，则称取根的粗粉lg，制作嫩茎及叶片的样品溶液，则对应称取由它们制成的粗粉 Ig)，甲醇回流2次，每次50ml，回流时间共1小时，滤过，合并甲醇滤液，浓缩，残渣用甲醇转移至IOml容量瓶中，甲醇稀释至IOml容量瓶(即标示IOml的刻度处)刻度处，摇勻，可用 0. 45 μ m的微孔滤膜在测定前滤过，即得到样品溶液。(5)测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，进行测定，通过计算样品色谱的峰面积来计算供试品中芦丁的含量。其结果如下表表1-雌雄株之间根中芦丁的含量
权利要求
1.一种测定芦笋植株体内芦丁含量差异的方法，其特征在于，该方法包括将待测定的不同品种芦笋植株进行雌雄鉴定后，取下鉴定后的芦笋植株的根、嫩茎及叶片分别制成样品溶液；将各样品溶液与对照品溶液分别进行高效液相色谱分析得出各品种芦笋植株体内的芦丁含量的谱峰，通过计算谱峰面积比较芦丁含量的差异。
2.根据权利要求1所述的测定芦笋植株体内芦丁含量差异的方法，其特征在于，所述方法中，采用新鲜的芦笋植株作为待测定的不同品种芦笋植株。
3.根据权利要求1所述的测定芦笋植株体内的芦丁含量差异的方法，其特征在于，所述取下鉴定后的芦笋植株的根、嫩茎及叶片分别按照下述方法制成样品溶液将芦笋植株的根、嫩茎及叶片烘干后分别粉碎成粗粉；制备对应的样品溶液时，称取对应的所述粗粉lg，甲醇回流2次，每次50ml，回流时间共1小时，滤过，合并甲醇滤液，浓缩，残渣用甲醇转移至IOml容量瓶中，甲醇稀释至容量瓶的刻度处，摇勻，用0. 45 μ m的微孔滤膜滤过，即得到样品溶液。
4.根据权利要求1所述的测定芦笋植株体内的芦丁含量差异的方法，其特征在于，所述对照品溶液为质量浓度为lg/ml的芦丁溶液。
全文摘要
本发明公开了一种测定芦笋植株体内芦丁含量差异的方法，属于植物体内生物活性物质测定领域。该方法包括将待测定的不同品种芦笋植株进行雌雄鉴定后，取下鉴定后的芦笋植株的根、嫩茎及叶片分别制成样品溶液；将各样品溶液与对照品溶液分别进行高效液相色谱分析得出各品种芦笋植株体内的芦丁含量的谱峰，通过计算谱峰面积比较芦丁含量的差异。该方法可对不同品种芦笋雌雄株的不同部位进行芦丁含量的测定，为芦笋中芦丁提取率的提高提供了理论依据。
文档编号G01N30/02GK102495153SQ20111039186
公开日2012年6月13日 申请日期2011年11月30日 优先权日2011年11月30日
发明者付婕, 张 杰, 李君平, 程继鸿, 范双喜, 韩莹琰 申请人:北京农学院