专利名称：一种检测塑化剂的方法
技术领域：
本发明涉及一种塑化剂的色谱检测方法，特别涉及一种乳制品中塑化剂的气相色谱-质谱检测方法。
背景技术：
塑化剂，是工业上广泛使用的高分子材料助剂，在塑料加工中添加这种物质，可以使其柔韧性增强。不法分子将其添加到食物当中，代替乳化剂，增稠剂使用，严重危害到人民百姓的身体健康。塑化剂是可用于食品包装材料的增塑剂，不是食品原料，也不是食品添加剂，严禁在食品、食品添加剂中人为添加。食品容器、食品包装材料中使用邻苯二甲酸酯类物质，应当严格执行《食品容器、包装材料用添加剂使用卫生标准》(GB9685-2008 )规定的品种、范围和特定迁移量或残留量。根据(卫办监督函〔2011〕551号)规定，油脂类食品和婴幼儿食品，食品、食品添加剂中的邻苯二甲酸二( α-乙基已酯)(DE-HP)、邻苯二甲酸二异壬酯(DINP)和邻苯二甲酸二正丁酯(DBP)最大残留量分别为1.5mg/kg、9.0mg/kg和0.3mg/kg。现行国标检测食品中塑化剂的方法是国标方法GB/T21911-2008《食品中邻苯二甲酸酯的测定》(以下简称GB/T21911-2008)。乳品行业的产品大都为含油脂奶制品，检测过程需要对试样进行除去油脂的前处理，具体方法是取混合均匀的乳品试样，用乙酸乙酯:环己烷(体积比1:1)混合液提取，过滤，经凝胶渗透色谱装置净化、浓缩，进入气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)分析检测。用凝胶渗透色谱柱处理待测试样，是利用分子的不同直径将其分离开的一种方法。凝胶渗透色谱柱中可供分子通行的路径有粒子间的间隙(较大)和粒子内的通孔(较小)。当乳制品样品溶液流经凝胶渗透色谱柱时，较大的脂肪分子、蛋白质分子被排除在粒子的小孔之外，只能从粒子间的间隙通过，速率较快；而较小的塑化剂分子可以进入粒子中的小孔，通过的速率要慢得多。经过一定长度的色谱柱，分子根据相对分子质量被分开，相对分子质量大的脂肪分子、蛋白质分子在前面(即淋洗时间短)，相对分子质量小的塑化剂分子在后面(即淋洗时间长)。确定仪器和实验条件后，溶质的淋出时间与其分子量有关，收集特定时间段，GB/T21911-2008中收集5.5min 16.5min的流出物，得所要检测的塑化剂分子富集检测液，然后进行气相色谱-质谱检测。凝胶渗透色谱，可用于小分子物质的分离和鉴定，也可用来分析化学性质相同分子体积不同的高分子同系物。凝胶渗透色谱净化装置价格较高(市场价格在30万左右)，一般乳制品企业使用较少，而未配备该装置。按照GB/T21911-2008进行测试时，硬件条件限制，无法完成企业内部塑化剂抽样检查。且凝胶渗透净化装置使用操作较复杂，需专人专员进行测试，不利于快速得出检测结果。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术中，因为需要用到两套不同的色谱系统(凝胶渗透色谱和气相色谱)，导致的某些企业因为客观条件，暂时无法进行塑化剂检测的不足，提供一种快速检测乳中塑化剂的方法。为了实现上述发明目的，本发明提供了以下技术方案:一种检测乳制品中塑化剂的方法，包括以下步骤:(1)制备标准溶液，利用气相色谱-质谱联用仪对其检测，得保留时间，并生成浓度与响应值之间对应的标准曲线。(2)取样品进行预处理，得到上机检测试样，利用所述气相色谱-质谱联用仪在与步骤(I)相同的条件下对其进行检测，得保留时间和响应值。(3)将步骤(2)中获得的样品保留时间和响应值与步骤(I)中得到的保留时间及所述的标准曲线进行比对，计算确定样品中的塑化剂含量。所述步骤(b)中的预处理包括，量取乳制品和环己烷，置于离心管中涡旋混合2 5min ;然后加入氯化钠和氧化招,润旋振荡3 5min,以4000r/min离心5 IOmin,取上清液进行上机处理。进一步的优选的，所述步骤(b)中的预处理包括，取2mL纯牛奶和5mL环己烧，置于离心管中涡旋混合2 5min ;然后向离心管内加入0.3g氯化钠和0.1g氧化铝，将离心管润旋振荡3min,以4000r/min转速离心5min,取上清液进行上机处理。进一步的，在GC-MS检测过程中，检测条件:色谱条件:色谱柱，HP-5MS石英毛细管，30mX0.25mm (1.d.), 0.25 μ m ;进样口温度，280°C ;升温程序，初始柱温60°C，保持lmin，以20°C /min升温至220°C，保持lmin，再以5°C /min升温至280°C,保持4min ;载气,氮气(纯度彡99.999%);流速lmL/min ;进样方式，不分流进样；进样量， μ ;质谱条件:色谱与质谱接口温度:280°C;电离方式，电子轰击源(EI);监测方式，选择离子扫描模式(SM);电离能量，70eV ;溶剂延迟，5min。本发明中在待检样品中添加环己烷试剂，是因为塑化剂易溶于环己烷，利用环己烷试剂能够充分浸提牛奶中的塑化剂成分。同时牛奶中的脂肪、蛋白含量较高，利用氯化钠改变液体中的离子浓度，降低蛋白质等物质的溶解度，使蛋白质析出；氧化铝对大分子物质具有良好的吸附、沉降作用，能够吸附除去牛奶中的脂肪、蛋白质等物质，从而使塑化剂成份溶于环己烷中，通过离心分离，然后取其上清液，得到含其杂质较少的提取液。最后通过气相色谱-质谱联用仪完成乳中塑化剂的检测。通过以上实验步骤能够达到凝胶渗透色谱装置对原料乳或乳制品中塑化剂的提取和富集的同等效果。本发明检测方法回收率在92% 120%之间，具有快速、准确等优势，特别适用于乳及乳制品中塑化剂的检测。本发明方法适用于原料乳和液体乳制品中的塑化剂的检测。与现有技术相比，本发明的有益效果:与现有技术GB/T21911-2008方法相比，前处理过程中无需使用凝胶渗透色谱装置，有效的降低了检测成本，加快了检测速度。且达到了国标方法使用凝胶渗透色谱装置分离浓缩塑化剂的同等效果。为未配备凝胶渗透色谱装置的食品企业提供了一种简便可行的检测塑化剂的方法。在操作过程中无需使用凝胶渗透色谱装置，节约了检测经费，处理过程更加简便，检测速度更快，且检测结果精确度高。
:图1塑化剂标准品图谱图2选择性扫描邻苯二甲酸二丁酯和邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯的谱3邻苯二甲酸二丁酯的标准曲线(20pplT2ppm R=I)图4邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯的标准曲线(20ppb 2ppm R=0.999)图5样品I检测DBP和DEHP的图谱图6样品2检测DBP和DEHP的图谱图7样品3检测DBP和DEHP的图谱图8样品4检测DBP和DEHP的图谱
具体实施例方式下面结合试验例及具体实施方式
对本发明作进一步的详细描述。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实施例，凡基于本发明内容所实现的技术均属于本发明的范围。I)试剂和仪器邻苯二甲酸酯标准储备液(1000mg/kg);正己烷(色谱纯)，其余试剂均为分析纯气相色谱-质谱仪 ，电子天平(精确到0.1毫克)，涡旋振荡器，高速离心机，实验室常用玻璃器皿(所用玻璃器皿洗净后，用重蒸馏水淋洗三次，丙酮浸泡I小时，在200°C下烘烤2小时，冷却至室温备用。)2)检测条件201)色谱条件色谱柱:HP-5MS石英毛细管30mX0.25mm (内径)Χ0.25um进样口温度:280°C;升温程序:初始柱温60°C，保持Imin，以20°C /min升温至220°C，保持lmin，再以5°C /min 升温至 280°C,保持 4min。载气:氮气(纯度彡99.999%)，流速lml/min ；进样方式:不分流进样；进样量:Iμ I。202)质谱条件色谱与质谱接口温度:280°C ;电离方式:电子轰击源(EI);监测方式:选择离子扫描模式(SM)；电离能量:70eV ；溶剂延迟:5min。3)检测过程301)标准溶液配置将所需测试的邻苯二甲酸酯的标准储备液用正己烷稀释至浓度为20yg/kg，50 μ g/kg, 100 μ g/kg, 200 μ g/kg, 500 μ g/kg, lmg/kg, 2mg/kg 系列的标准溶液。
302)标准曲线绘制将制备的标准溶液在上述要求的色谱条件下进行色谱测定，记录保留时间和响应值。对比表1、表2确定各标准品的保留时间和响应值的对应项。以响应值为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线，得到标准曲线方程。表1、质谱检测邻苯二甲酸酯的定性和定量选择离子
权利要求
1.一种检测乳制品中塑化剂的方法，其特征在于，包括以下步骤: 制备标准溶液，利用气相色谱-质谱联用仪对其检测，得保留时间，并生成浓度与响应值之间对应的标准曲线； 取样品进行预处理，得到上机检测试样，利用所述气相色谱-质谱联用仪在与步骤(I)相同的条件下对其进行检测，得保留时间和响应值； 将步骤(2)中获得的样品保留时间和响应值与步骤(I)中得到的保留时间及所述标准曲线进行比对，计算确定样品中的塑化剂含量； 所述步骤(2)中的预处理包括，量取原料乳或乳制品和环己烷加入到玻璃离心管中，涡旋混合2 5min ;然后向离心管内加入氯化钠和氧化铝，将离心管涡旋振荡2 5min，以4000r/min转速离心5 lOmin，取上清液进行检测。
2.根据权利要求1所述的检测乳制品中塑化剂的方法，其特征在于，所述步骤(2)中的预处理包括，称取试样2mL纯 牛奶和5mL环己烷，置于离心管中涡旋混合2min ;然后向离心管内加入0.3g氯化钠和0.1g氧化招,将离心管润旋振荡3min,以4000r/min离心5min,取上清液进行上机检测。
3.根据权利要求1所述的检测乳制品中塑化剂的方法，其特征在于，气相色谱-质谱联用仪检测条件是: 色谱条件:色谱柱，HP-5MS石英毛细管，30mX0.25mm (1.d.) X0.25 μ m ;进样口温度，280°C ;升温程序，初始柱温60°C，保持lmin，以20°C /min升温至220°C，保持lmin，再以5°C /min升温至280°C,保持4min ;载气,氮气(纯度彡99.999%);流速lml/min ;进样方式，不分流进样；进样量，I μ I ; 质谱条件:色谱与质谱接口温度:280°C ;电离方式，电子轰击源(EI);监测方式，选择离子扫描模式(SM);电离能量，70eV ;溶剂延迟，5min。
4.根据权利要求1 3任一权利要求所述的检测乳制品中塑化剂的方法在检测原料乳中塑化剂的应用。
全文摘要
本发明公开了一种检测乳及乳制品中塑化剂的方法，包括以下步骤(1)制备标准溶液，利用气相色谱-质谱联检测，得保留时间和标准曲线；(2)量取原料乳或乳制品和环己烷，涡旋混合2～5min。然后加入氯化钠和氧化铝，将涡旋振荡2～5min，4000r/min转速离心5～10min，取上清液进行检测；(3)将步骤(2)中获得的检测结果与步骤(1)中得到的标准曲线比对，计算确定塑化剂含量。采用本发明的方法，前处理过程简单，检测速度快，检测结果精确度高。
文档编号G01N30/06GK103091418SQ201310014340
公开日2013年5月8日 申请日期2013年1月15日 优先权日2013年1月15日
发明者马岩峰, 刘海燕, 李启明, 夏忠悦, 张龙安, 彭恋邱 申请人:新希望乳业控股有限公司