专利名称：一种治疗肾炎引起血尿的中药的制备方法及质量检测方法
技术领域：
本发明涉及一种中药制剂的制备方法及质量检测方法，具体是一种治疗肾炎引起血尿的中药的制备方法及质量检测方法。
背景技术：
黄柏为芸香科植物黄檗、黄皮树的干燥树皮，昧苦性寒，归肾、膀胱、大肠经，具有清热燥湿、泻火解毒、退虚热之功能，临床上广泛应用于湿热痢疾、泄泻、黄疸、梦遗、淋浊、带下、骨蒸劳热、皮肤湿疹等病证的治疗。现代药理研究表明，黄柏具有多方面药理作用，主要包括抗菌、抗真菌、镇咳、降压、抗滴虫、抗肝炎、抗溃疡以及免疫抑制作用等。黄柏作为一味具有很好清热泻火作用的药材，黄柏是用于治疗由肾脏疾病引起血尿的中成药血尿安的主要成分。黄柏含有多种生物碱，主要有效成分为盐酸小檗碱，提取总生物碱的得率直接影响到黄柏的药效，本发明就黄柏总生物碱的水及醇提取工艺进行了研究比较，以期找出一种更合理、更可行的生产工艺。黄柏是中成药血尿 安的主要成份，由于品种、产地和采收季节的不同，药品中的有效成分含量也就不同，导致直接采用原料药生产的血尿安药物产品中的有效成分不稳定，有效成分不可控。由于黄柏性味苦寒，有的体弱患者服用现有技术生产的血尿安后出现腹泻，严重的甚至出现脱水。
发明内容
本发明的目的在于改善现有的中成药血尿安药性寒的特点，也为改善药物中黄柏的有效成分提取不完全，有效成分不稳定，有效成分不可控的问题，提供一种治疗肾炎引起血尿的中药的制备方法及质量检测方法的技术方案。本发明的技术方案为一种治疗肾炎引起血尿的中药的制备方法，具体步骤如下
(1)按重量份备中药原料药
肾茶 360-440，小蓟 540-660，白茅根 720-880，黄柏 108-132;
(2)制备黄柏粉
黄柏粉碎至80—100目，用浓度20%的乙醇浸没，加温至55-65°C，保温40-48小时，用浓度70-85%的乙醇8-10倍量(w/v)提取3次，每次I小时，提取温度80—85°C，过滤合并提取液，浓缩为黄柏浸膏，干燥，粉碎至120—140目为黄柏粉；
(3)制备稠膏
将肾茶，小蓟，白茅根3味中药粉碎至80—100目，加水煎煮二次，第一次按药材量水=1 :5(w/v)，煮2小时；第二次按药材量水=1 3(w/v)，煮2小时，合并滤液，过滤，滤液60°C浓缩至相对密度为1. 31 1. 35的稠膏；
(4)制剂
将步骤(3)制备的稠膏与步骤(2)制备的黄柏粉混合均匀，为制剂原料，将制剂原料按常规方法加入辅料制为颗粒剂、胶囊剂、片剂或丸剂。如步骤(4)所述的制备颗粒剂的赋形剂为糊精，糊精为制剂原料重量的8-10%，校味剂为甜菊素15-25g。—种治疗肾炎引起血尿的中药的质量检测方法，具体步骤如下
(1)取本发明的制剂原料6g，加氨试剂3ml，二氯甲烷15 ml，超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇I ml溶解，作为供试品溶液；另取合格的黄柏为对照药材O.1g,加浓氨试液1ml，二氯甲烷5 ml,同法制成对照药材溶液；按处方量即每次服用的生药量为肾茶1. 6g,小蓟2. 4g,白茅根3. 2g,黄柏O. 48g制备不含黄柏药材的阴性对照样品，同供试品溶液制备方法进行配制，作为阴性对照溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯乙酸乙酯甲醇异丙醇浓氨试液=6:3:1.5:1.5:0. 5为展开剂，置氨蒸汽饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
(2)取本发明的制剂原料3g,置具塞锥形瓶中，加乙酸乙酯20ml,超声处理IOmin,滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯Iml使溶解，作为供试品溶液；另取白茅根对照药材O. 5g，力口乙酸乙酯10ml，超声处理lOmin，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯O. 5ml使溶解，作为对照品溶液；按处方量即每次服用的生药量为肾茶1. 6g,小蓟2. 4g，白茅根3. 2g，黄柏O. 48g制备不含白茅根药材的阴性对照样品，同供试品溶液制备方法进行配制，作为阴性对照溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各8-10μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷甲醇=9:1为展开剂，置氨蒸汽饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，喷以10%的硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点； (3)检查
粒度彡15% ;水分彡6% ;溶化性取本发明的制剂原料为供试品4克，加热水200ml，搅拌5min，立即观察，应全部溶化或呈混悬状；装量差异±7% ；
(4)含量测定
用高效液相色谱法测定，色谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相0. O. 5 mo I/LKH2PO4 (O. 2%三乙胺，O. 1%庚烷磺酸钠，用用磷酸调节pH值至3.0)/乙晴=(60:40);柱温38°C ;检测波长为348 nm。理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于3000 ;分离度大于1. 5 ；
(5)对照品溶液的制备
取盐酸小檗碱对照品适量，精密称定，加热水溶解，放冷至室温，加水制成每Iml含IOOug的溶液；
(6)供试品溶液的制备
取本发明的制剂原料，混匀，取O. 5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入盐酸甲醇=0. 1:100溶液25 ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷用盐酸溶液甲醇=0. 1:100溶液补足减失的重量，摇匀，O. 45um滤过,取续滤液,作为供试品溶液；
(7)测定法
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ1，注入液相色谱仪，测定；
本发明的制剂原料每袋4克中含黄柏以盐酸小檗碱C2tlH17NO4 · HCl计，不得少于9mg ；(8)稳定性
将本发明的制剂原料药在温度为40°C ±2°C，湿度为75%±5%的超常条件下放置6个月，外观及内质量亦无变化在温度25±2°C，相对湿度60±10%实际的贮存条件下放置12个月，外观及内在质量亦无变化。所述的步骤(2)中照薄层色谱法试验，是按照2010版药典附录VI B试验；步骤(8)所述稳定性是按照中国药典2010年版二部附录XIX C“药物稳定性试验指导原则”、国家现行标准的“药品注册管理办法”进行测定。由于黄柏是血尿安的主要成分，对于血尿安的药效有着重大的影响，本发明重点改进了黄柏的制备方法，主要是对黄柏的制备加强了改性步骤，具体是将黄柏醇提，在醇提黄柏前增加了用低浓度乙醇浸泡，中温保温40-48小时，该步骤可改善黄柏性寒的性质，还可使黄柏中的盐酸小檗碱类有效成分溶出量增大，使得提取率提高，产品有效成分保存完全。黄柏的主要有效成分中有醇溶性物质，也还含有水溶性成分，采用单一的水提法，将使多醇溶性成分流失，而这些醇溶性物质对提高免疫能力有非常好的效果。本发明在醇提前采用低浓度乙醇浸泡，使黄柏中的水溶性物质溶出，使黄柏中的有效物质提取更完全，可更加完全保留黄柏的有效成分。本发明对原料药用低浓度乙醇浸泡，中温保温，使原料中的有效成分活化，这也是提高提取率的重要措施。本发明在血尿安颗粒剂中选择了不参与胰岛素代谢的甜菊素作为血尿安颗粒的甜味剂，使糖尿病患者也可放心使用。为保证血尿安药物产品中的有效成分稳定可控，本发明提出了科学的质量检测方法。本发明的制备工艺设计合理，工艺先进，可有效改善现有血尿安药物性寒的特点，提高黄柏参有效果成分溶出量，使得提取率提高，产品有效成分保存·完全。也有效改善了药物中黄柏的有效成分不稳定，有效成分不可控的问题。本发明的质量检测方法可保证血尿安药物质量稳定可控。表I两种方法提取黄柏的提取物及得率 得率
权利要求
1.一种治疗肾炎引起血尿的中药的制备方法，其特征在于，具体步骤如下 (1)按重量份备中药原料药 肾茶 360-440，小蓟 540-660，白茅根 720-880，黄柏 108-132; (2)制备黄柏粉 黄柏粉碎至80—100目，用浓度20%的乙醇浸没，加温至55-65°C，保温40-48小时，用浓度70-85%的乙醇8-10倍量(w/v)提取3次，每次I小时，提取温度80—85°C，过滤合并提取液，浓缩为黄柏浸膏，干燥，粉碎至120—140目为黄柏粉； (3)制备稠膏 将肾茶，小蓟，白茅根3味中药粉碎至80—100目，加水煎煮二次，第一次按药材量水=1 :5(w/v)，煮2小时；第二次按药材量水=1 3(w/v)，煮2小时，合并滤液，过滤，滤液60°C浓缩至相对密度为1. 31 1. 35的稠膏； (4)制剂 将步骤(3)制备的稠膏与步骤(2)制备的黄柏粉混合均匀，为制剂原料，将制剂原料按常规方法加入辅料制为颗粒剂、胶囊剂、片剂或丸剂。
2.如权利要求1所述的一种治疗肾炎引起血尿的中药的制备方法，其特征在于，如步骤(4)所述的制备颗粒剂的赋形剂为糊精，糊精为制剂原料重量的8-10%，校味剂为甜菊素15-25g。
3.如权利要求1所述的一种治疗肾炎引起血尿的中药的质量检测方法，其特征在于，具体步骤如下 (1)取本发明的制剂原料6g，加氨试剂3ml，二氯甲烷15 ml，超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇I ml溶解，作为供试品溶液；另取合格的黄柏为对照药材O.1g,加浓氨试液1ml，二氯甲烷5 ml,同法制成对照药材溶液；按处方量即每次服用的生药量为肾茶1. 6g,小蓟2. 4g,白茅根3. 2g,黄柏O. 48g制备不含黄柏药材的阴性对照样品，同供试品溶液制备方法进行配制，作为阴性对照溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯乙酸乙酯甲醇异丙醇浓氨试液=6:3:1.5:1.5:0.5为展开剂，置氨蒸汽饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点； (2)取本发明的制剂原料3g,置具塞锥形瓶中，加乙酸乙酯20ml,超声处理IOmin,滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯Iml使溶解，作为供试品溶液；另取白茅根对照药材O. 5g，力口乙酸乙酯10ml，超声处理lOmin，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯O. 5ml使溶解，作为对照品溶液；按处方量即每次服用的生药量为肾茶1. 6g,小蓟2. 4g，白茅根3. 2g，黄柏O. 48g制备不含白茅根药材的阴性对照样品，同供试品溶液制备方法进行配制，作为阴性对照溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各8-10μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷甲醇=9:1为展开剂，置氨蒸汽饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，喷以10%的硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点； (3)检查 粒度≤15% ;水分≤6% ;溶化性取本发明的制剂原料为供试品4克，加热水200ml，搅拌5min，立即观察，应全部溶化或呈混悬状；装量差异±7% ；(4)含量测定 用高效液相色谱法测定，色谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相0. O. 5 mo I/LKH2PO4 (O. 2%三乙胺，O. 1%庚烷磺酸钠，用用磷酸调节pH值至.3.O) /乙晴=(60:40);柱温38°C ;检测波长为348 nm ;理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于3000 ;分离度大于1. 5 ； (5)对照品溶液的制备 取盐酸小檗碱对照品适量，精密称定，加热水溶解，放冷至室温，加水制成每Iml含1OOug的溶液； (6)供试品溶液的制备取本发明的制剂原料，混匀，取O. 5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入盐酸甲醇=0. 1:100溶液25 ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷用盐酸溶液甲醇=0. 1:100溶液补足减失的重量，摇匀，O. 45um滤过,取续滤液,作为供试品溶液； (7)测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ1，注入液相色谱仪，测定； 本发明的制剂原料每袋4克中含黄柏以盐酸小檗碱C2tlH17NO4 · HCl计，不得少于9mg ； (8)稳定性 将本发明的制剂原料药在温度为40°C ±2°C，湿度为75%±5%的超常条件下放置6个月，外观及内质量亦无变化在温度25±2°C，相对湿度60±10%实际的贮存条件下放置12个月，外观及内在质量亦无变化。
4.如权利要求3所述的一种治疗肾功能衰竭的中药的质量检测方法，其特征在于，所述的步骤(2)中照薄层色谱法试验，是按照2010版药典附录VI B试验；步骤(8)所述稳定性是按照中国药典2010年版二部附录XIX C“药物稳定性试验指导原则”、国家现行标准的“药品注册管理办法”进行测定。
全文摘要
一种治疗肾炎引起血尿的中药的制备方法中药原料药肾茶、小蓟、白茅根、黄柏；制备黄柏粉，将稠膏与黄柏粉混合均匀，为制剂原料，将制剂原料按常规方法加入辅料制为颗粒剂、胶囊剂、片剂或丸剂。一种治疗肾炎引起血尿的中药的质量检测方法照薄层色谱法试验，理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于3000；分离度大于1.5；测定每袋4克中含黄柏以盐酸小檗碱C20H17NO4·HCl计，不得少于9mg。本发明的制备工艺设计合理，工艺先进，可有效改善现有血尿安药物性寒的特点，提高黄柏有效果成分溶出量，使得提取率提高，产品有效成分保存完全。也有效改善了药物中黄柏的有效成分不稳定和不可控的问题。本发明的质量检测方法可保证血尿安药物质量稳定可控。
文档编号G01N30/88GK103055191SQ20131005644
公开日2013年4月24日 申请日期2013年2月22日 优先权日2013年2月22日
发明者罗实, 李家伟 申请人:云南理想药业有限公司