专利名称：复方氨林巴比妥注射液的检测方法
技术领域：
本发明涉及复方氨林巴比妥注射液的检测方法。
背景技术：
复方氨林巴比妥注射液，系由氨基比林lOOmg、安替比林40mg、巴比妥18mg组成的复方制剂，是临床常用的急性高热时紧急退热的解热镇痛药。氨基比林和安替比林同属于吡唑酮类解热镇痛药，能抑制下视丘前列腺素的合成和释放，恢复体温调节中枢感受神经元的正常反应性而起退热作用；同时还通过抑制前列腺素等的合成而起镇痛作用。氨基比林能抑制炎症局部组织中前列腺素的合成和释放，稳定溶酶体膜，影响吞噬细胞的吞噬作用而起到抗炎作用。合用巴比妥，可加强镇痛作用。
2003年，复方氨林巴比妥注射液在国内上市，目前执行标准多为国家药品监督管理局WS-10001-(HD-1327)-2003的国家药品标准。国家药品标准的含量测定方法为中和法测定氨基比林含量、比色法测定安替比林含量，硝酸银滴定法测定巴比妥含量。目前也有文献报道了同时对三组分含量进行测定的方法，但需要使用离子对试剂且PH值偏高，容易导致色谱柱耗损快。因此，建立一种能同时测定复方注射液中三种组分含量、成本更低廉的检测方法，显得尤为重要。发明内容
本发明的目的在于提供一种操作简便、成本低廉的复方氨林巴比妥注射液的检测方法。
本发明提供了复方氨林巴比妥注射液的检测方法，它是以高效液相色谱法进行测定的，其操作步骤如下:
(I)取复方氨林巴比妥注射液，稀释后，即得供试品溶液；
(2)取氨基比林、安替比林或/和巴比妥，制备对照品溶液；
(3)将供试品溶液、对照品溶液分别注入高效液相色谱仪中，采用如下色谱条件检测即可:
检测波长:220±2nm;
固定相:以十八烷基键合硅胶为填料的色谱柱；
流动相:缓冲液:乙腈=(90:10广(80:20) v/v或缓冲液:甲醇=(70:30Γ(80:20)v/v ;所述缓冲液的pH值 为5.5-6.0。
发明人研究发现，仅有在磷酸盐缓冲液的pH5.5飞.0时，杂质与主峰的分离完全，峰形良好。
进一步地,步骤(I)中，以乙腈水溶液或缓冲液:乙腈=(90:10广(80:20)v/v作为溶剂进行稀释；步骤(2)中，以乙腈水溶液或缓冲液:乙腈=(90:10广(80:20) v/v作为溶剂制备对照品溶液。
更进一步地,步骤(I)中，所述乙腈水溶液的浓度为5_15%v/v。
进一步地，检测波长为220nm。
进一步地，所述缓冲液为磷酸盐缓冲液或醋酸盐缓冲液。
更进一步地，所述磷酸盐缓冲液为磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾或磷酸二氢铵缓冲液；所述醋酸盐缓冲液为醋酸铵、醋酸钠或醋酸钾缓冲液。
更进一步地，所述缓冲液的浓度为0.01mol/L-0.05mol/L。
进一步地，步骤(3)中，色谱柱温度为30±5°C。
本发明的检测方法，能同时将复方氨林巴比妥注射液各有效成分与杂质峰完全分离，能够准确测定注射液中各组分的含量，其操作更为简便，无需特殊流动相和色谱柱，设备损耗小，成本低廉，为该注射液的药品安全提供了保障。
图1对照品HPLC图谱
图2实施例1的HPLC图谱，缓冲液pH=5.5 ;其中，A为溶剂空白对照，B为供试品图谱
图3使用醋酸盐缓冲液时的HPLC图谱
图4使用磷酸二氢铵缓冲液时的HPLC图谱
图5使用磷酸二氢钠缓冲液时的HPLC图谱
图6不同流动相下的HPLC图谱
图7不同流动相下的HPLC图谱
图8缓冲盐浓度为0.01mol/L的HPLC图谱
图9缓冲盐浓度为0.05mol/L的HPLC图谱
图1OK2PO4:乙腈=80:20等度洗脱的HPLC图谱
图1lK2PO4:乙腈=83:17等度洗脱的HPLC图谱
图12K2P04:乙腈=85:15等度洗脱的HPLC图谱
图13K2P04:乙腈=90:10等度洗脱的HPLC图谱
图HK2PO4:甲醇=70:30等度洗脱的HPLC图谱
图15K2P04:甲醇=72:28等度洗脱的HPLC图谱
图16K2P04:甲醇=75:25等度洗脱的HPLC图谱
图17K2P04:甲醇=80:20等度洗脱的HPLC图谱
图18复方氨林巴比妥注射液峰36个月样品HPLC图谱
图19氨基比林溶液光照2个月的HPLC图谱
图20安替比林溶液光照2个月的HPLC图谱
图21巴比妥溶液光照2个月的HPLC图谱
图22氨林巴比妥注射液酸降解HPLC图谱
图23氨基比林酸降解HPLC图谱
图24安替比林酸降解HPLC图谱
图25巴比妥酸降解HPLC图谱
图26氨林巴比妥注射液高温降解HPLC图谱
图27氨基比林高温降解HPLC图谱
图28安替比林高温降解HPLC图谱
图29巴比妥高温降解HPLC图谱
图30氨林巴比妥注射液氧化降解HPLC图谱(室温2小时)
图31氨林巴比妥注射液氧化降解HPLC图谱(水浴2.5小时)
图32氨基比林氧化降解HPLC图谱
图33安替比林氧化降解HPLC图谱
图34巴比妥氧化降解HPLC图谱
图35氨林巴比妥注射液碱降解(60摄氏度I小时)HPLC图谱
图36氨林巴比妥注射液碱降解(水浴2.5小时)HPLC图谱
图37氨基比林碱降解HPLC图谱
图38安替比林碱降解HPLC图谱
图39巴比妥碱降解HPLC图谱
具体实施方式
实施例1本发明检测方法
仪器与条件:Agilentl200液相色谱仪，DAD检测器，色谱柱:AgilentTC-C18(250mm*4.6mm, 5um);检测波长:220nm ;柱温:30°C ;以 0.02mol/L 磷酸二氢钾缓冲液(pH调至5.5)-乙腈=85:15为流动相。
混合对照品溶液的测定:
分别取氨基比林、安替比林和巴比妥的对照品适量，加流动相配制成浓度0.05mg/ml,0.02mg/ml、0.009mg/ml的溶液。另取复方氨林巴比妥注射液Iml置于IOOml量瓶中，力口流动相定容，依法测定，HPLC图谱见图1。
由图1可见:巴比妥、安替比林、氨基比林峰保留时间依次为7.801分钟、11.143分钟、22.53分钟。各主峰之间分离良好。
线性关系:
另取氨基比林、安替比林、巴比妥对照品，配制不同浓度的对照品溶液，测定其峰面积，结果见下表:
表I
权利要求
1.复方氨林巴比妥注射液的检测方法，其特征在于:它是以高效液相色谱法进行测定的，其操作步骤如下: (I)取复方氨林巴比妥注射液，稀释后，即得供试品溶液； (2 )取氨基比林、安替比林或/和巴比妥，制备对照品溶液； (3)将供试品溶液、对照品溶液分别注入高效液相色谱仪中，采用如下色谱条件检测即可: 检测波长:220±2nm; 固定相:以十八烷基键合硅胶为填料的色谱柱； 流动相:缓冲液:乙腈=(90:10) (80:20) v/v 或缓冲液:甲醇=(70:30)^(80:20) v/v ； 所述缓冲液的PH值为5.5-6.0。
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于:步骤(I)中，以乙腈水溶液或缓冲液:乙腈=(90:10广(80:20) v/v作为溶剂进行稀释；步骤(2)中，以乙腈水溶液或缓冲液:乙腈=(90:10) (80:20) v/v作为溶剂制备对照品溶液。
3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于:步骤(I)中，所述乙腈水溶液的浓度为 5-15%v/v。
4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于:检测波长为220nm。
5.根据权利要求1-4任意一项所述的检测方法，其特征在于:所述缓冲液为磷酸盐缓冲液或醋酸盐缓冲液。
6.根据权利要求5所述的检测方法，其特征在于:所述磷酸盐缓冲液为磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾或磷酸二氢铵缓冲液；所述醋酸盐缓冲液为醋酸铵、醋酸钠或醋酸钾缓冲液。
7.根据权利要求1、5或6所述的检测方法，其特征在于:所述缓冲液的浓度为·0.01mol/L-0.05mol/Lo
8.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于:步骤(3)中，色谱柱温度为30±5°C。
全文摘要
本发明公开了复方氨林巴比妥注射液的检测方法，它是以高效液相色谱法进行测定的。本发明的检测方法，能同时将复方氨林巴比妥注射液各有效成分与杂质峰完全分离，能够准确测定注射液中各组分的含量，其操作更为简便，无需特殊流动相和色谱柱，设备损耗小，成本低廉，为该注射液的药品安全提供了保障。
文档编号G01N30/02GK103149298SQ20131006673
公开日2013年6月12日 申请日期2013年3月1日 优先权日2013年3月1日
发明者高国玉, 赵瀚晶, 王静, 周莉娅, 梁隆, 王利春, 沈鑫, 程志鹏 申请人:四川科伦药物研究有限公司