紫檀香品质鉴定的方法
【专利摘要】本发明涉及紫檀香品质鉴定的方法，主要包括红外光谱的鉴定和总黄酮含量的鉴定，其中红外光谱的鉴定包括取供试品约1-1.5mg，置玛瑙研钵中，加入干燥的溴化钾细粉约200-300mg(与供试品的比约为200：1)作为分散剂，充分研磨混匀，置于直径为13mm的压片模具中，使铺展均匀，抽真空约2分钟，加压至(0.8±106)kPa(约8-10T／cm2)，保持压力2分钟，撤去压力并放气后取出制成的供试片，录制光谱图，得完整红外图谱。
【专利说明】紫擅香品质鉴定的方法
【技术领域】 [0001]本发明涉及蒙药领域，特别地，涉及紫檀香蒙药的鉴定领域【背景技术】
[0002]作为蒙药材的紫檀香是蒙医临床高频用药，紫檀香为蝶型科植物印度紫檀Pterocarpus indicus Willd.干燥心材的粉末\原产于印度至东南亚各地,我国云南、海南等地亦有栽培；别名:紫檀、蔷薇木、青龙木、赤血树等。系蒙古族习用药材，蒙文名称为乌兰-赞丹(Wulan zanden)，传统的蒙医理论认为其具有清血热，调理“赫依”血相讧，消肿。临床上主要用于血热，血淤刺痛，“赫依，，血相讧，“宝日”热，肝火，心热，肿块等病症。长期以来中药界一直将其视为伪品或易混淆的药材，对其有效组分、化学结构以及理化性质研究甚少，这在很大程度上制约了蒙药开发研究的进程。
【发明内容】
[0003]本发明的内容主要涉及两个方面，一是紫檀香药物的真伪鉴别，二是紫檀香品质的鉴定，主要涉及总黄酮的测定方法
[0004]本发明主要以蒙医理论为基础，现代科学为依据研究紫檀香主要活性组分的红外指纹图谱，为今后进一步开发新的蒙药成方剂型扫清障碍，并为以后研究蒙医药奠定一定的理论基础和实验性依据。尤其是在指纹图谱研究方面相对置后，这在很大程度上干扰和制约了蒙药开发研究的进程，用思维超前的指纹图谱研究为其制定出紫檀香完整的质量标准是非常必要的。
[0005]其光谱鉴定方法主要包括:
[0006]取供试品约1-1.5mg,置玛瑙研钵中，加入干燥的溴化钾细粉约200_300mg(与供试品的比约为200:1)作为分散剂，充分研磨混匀，置于直径为13mm的压片模具中，使铺展均匀，抽真空约2分钟，加压至(0.8±106)kPaG4 8-10T / cm2)，保持压力2分钟，撤去压力并放气后取出制成的供试片，目视检测，片子应呈透明状，其中样品分布应均匀，并无明显的颗粒状样品。同法制成对照药材片；将对照药材片与供试片分别置于仪器的样品光路中，并扣除用同发制成的空白溴化钾片的背景，录制光谱图，得完整红外图谱，之后与紫檀香对照药材的标准图谱进行对照，根据是否在在相同的3500-3200(3!^1区域出现I个较强而宽的特征峰；3000-2800 cnT1区域有明显的肩峰。
[0007]总黄酮含量的测定方法包括步骤:
[0008]对照品溶液的制备精密称取芦丁标准品5.01 mg，置50mL棕色容量瓶中，加甲醇少许使溶解并稀释至刻度，摇匀；精密吸取该芦丁标准品溶液20mL置50mL棕色容量瓶中，加甲醇至刻度，即得浓度为对照品溶液40.08 lug / mL。
[0009]供试品溶液的制备取本品粗粉约0.lg，精密称定，置50mL锥形瓶中，加丙酮15mL，超声处理30min，放冷，滤过，同法提取至无黄酮反应为止，合并滤液，通风橱中自然挥干，残渣加甲醇少许使溶解并转移至50mL棕色容量瓶中，用甲醇冲洗烧杯2-3次，液体并到50mL棕色容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液.[0010]标准曲线的制备精密量取对照品溶液1.0,2.0,3.0,4.0,5.0,6.0ml分别置25ml棕色容量瓶中，各加水至6.0m，加5%亚硝酸钠溶液1ml，混匀，放置6分钟，加10%硝酸铝溶液1ml，摇匀，放置6分钟，加氢氧化钠试液10ml，再加水至刻度，摇匀，放置15分钟，以显色剂系统A l(N03)3-Na0H_NaN02&水为空白参比，照紫外一可见分光光度法(附录V A)，在340nm波长处侧定吸光度，以吸光度(A)为纵坐标，浓度(C)为横坐标，绘制标准曲线，用最小二乘法进行线性回归，得回归方程A=0.0553C+0.1526，R2=0.9970。[0011]测定法分别精密量取对照品与供试品溶液各3ml，置25ml棕色量容瓶中，照标准曲线制备项下的方法，自“加水至6.0ml"起，依法测定吸光度，将测定的吸光度值代入得回归方程，算出供试品溶液中含芦丁的重量(ug)即得。[0012]本品按干燥品计算，含总黄酮以芦丁(C27H3tlO16)计，不得少于3.0%。[0013]附图概要说明[0014]图1为对照品芦丁红外光谱图。[0015]图2为紫檀香对照药材红外光谱图(批号:121310-200301)。[0016]图3为紫檀香市售药材红外光谱图(批号:20100203)。[0017]图4为紫檀香市售药材红外光谱图(批号:20100829)。[0018]图5为紫檀香市售药材红外光谱图(批号:20100830)。[0019]图6为紫檀香精密度试验拟合重叠图谱。[0020]图7为紫檀香精密度试验拟合间距图谱。[0021]图8为紫檀香稳定性试验图谱。[0022]图9为紫檀香重复性试验图谱。[0023]图10为蒙药紫檀香红外指纹图谱。【具体实施方式】[0024]I实验材料[0025]1.1实验仪器:KQ5200型超声波清洗器，十万分之一天平，型号:CP22?(sartorius)，万分之一天平(mettler Toledo)，型号:AL104，BRUKER IFS-55型傅立叶红外光谱仪(德国布鲁克公司);光谱范围4000-400(^'测试分辨率dcnT1 ;中药粉碎机型号:ΗΧ-100.[0026]1.2实验药品:紫檀香对照药材(批号:121310-200301)均由中国药品生物制品检定所定购。紫檀香市售药材(批号:201002032010082920100830)。[0027]1.3实验试液及试剂:，试剂均为分析纯。[0028]2实验方法[0029]2.1.供试品的确认[0030]2.1.1供试品的制备取紫檀香对照药材置乳钵中研磨成细粉，同法制备紫檀香市售药材细粉，分别取3.0mg送红外光谱检测。[0031]2.1.2对照品的制备取芦丁标准品3.0mg送红外光谱检测。得芦丁标准品红外光谱图。如图1所示。[0032]2.1.3供试品的红外测定取供试品紫檀香对照药材Img置玛瑙研钵中，研细，加入2g溴化钾粉末，混合均匀后压片，置于红外光谱仪中进行测试，测试前先排除空气中的CO2和H2O的干扰。得到紫檀香对照药材的红外光谱图。同时平行做紫檀香市售药材。如图2-5所示
[0033]2.2.精密度试验取紫檀香对照药材，按2.1.3操作制得溴化钾晶片，置于红外光谱仪中进行测试，连续测定6次，所得到红外谱线完全重合。如图6-7所示。
[0034]2.3.稳定性试验取供试品紫檀香对照药材，按2.1.3法制得供试品晶片，放入真空干燥器内保存，每隔Ih测定I次，连续测定5次，5h内所测得红外谱线基本重合。如图8所示。
[0035]2.4重复性试验取同一批号供试品紫檀香对照药材6份，按2.1.2法制得供试品晶片，置红外光谱仪中进行测试，所得到红外谱线完全重合。如图9所示。
[0036]2.5数据处理所有紫檀香样品红外图谱的源文件数据从BRUKER IFS-55型傅立叶红外光谱仪的工作站复制后，转存为word文件，再调入Excel中处理，用以下公式计算其相似度。
【权利要求】
1.一种根据紫檀香红外光谱鉴定紫檀香品质的方法，步骤包括:取供试品约1-1.5mg,置玛瑙研钵中，加入干燥的溴化钾细粉约200-300mg(与供试品的比约为200:1)作为分散剂，充分研磨混匀，置于直径为13mm的压片模具中，使铺展均匀，抽真空约2分钟，加压至(0.8±106)kPaG^8-10T / cm2)，保持压力2分钟，撤去压力并放气后取出制成的供试片，目视检测，片子应呈透明状，其中样品分布应均匀，并无明显的颗粒状样品，同法制成对照药材片；将对照药材片与供试片分别置于仪器的样品光路中，并扣除用同发制成的空白溴化钾片的背景，录制光谱图，得完整红外图谱，之后与紫檀香对照药材的标准图谱进行对照，是否在在相同的3500-3200(^-1区域出现I个较强而宽的特征峰；3000-2800(^-1区域有明显的肩峰，并进行相 似性分析。
【文档编号】G01N21/35GK103472025SQ201310424763
【公开日】2013年12月25日 申请日期:2013年9月18日 优先权日:2013年9月18日
【发明者】朱明 , 王静, 张红霞, 张小宁 申请人:内蒙古自治区中医药研究所