对阳性噬菌体克隆的鉴定方法
【专利摘要】本发明公开了对阳性噬菌体克隆的鉴定方法，其特征在于，步骤如下：首先在纤维膜上涂抹上硝酸盐类溶液，用PBS提前24小时浸泡，然后用滤纸将其吸干；对于目标单克隆抗体进行稀释；随后室温下进行干燥；用不高于百分之十的脱脂奶粉液进行浸泡，再用PBS洗涤3-4次；上述步骤反复两次；滤纸再次吸干；加入质量百分比为百分之十的ＤＢＡ，静置１５分钟；即可；原始噬菌体使用前最好振荡轻摇十五分钟；静置后可以室温下过夜后再进行鉴定。本发明的有益效果是：操作简单，成本较低，可以准确进行筛选，重复操作性强，筛选精确。
【专利说明】对阳性噬菌体克隆的鉴定方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及生化实验领域，具体涉及对阳性噬菌体克隆的鉴定方法。
【背景技术】
[0002]当近缘的A，B 二种噬菌体感染同一寄主细胞时，子代噬菌体中常出现B噬菌体外壳中包着A噬菌体的染色体(即核酸)，或A噬菌体外壳中包着B噬菌体的染色体(即核酸)的情况。这种形成核酸(基因型)与由外壳决定寄主范围等性质(表现型)不同的噬菌体粒子的现象称为混合噬菌体。含有重组DNA分子的克隆子被称为重组子，如果重组子中含有外源目的基因则又称为阳性克隆子或期望重组子。
【发明内容】
[0003]本发明要解决的技术问题在于，针对现有技术缺陷，提供一种技术方案:
对阳性噬菌体克隆的鉴定方法，步骤如下:首先在纤维膜上涂抹上硝酸盐类溶液，用PBS提前24小时浸泡，然后用滤纸将其吸干；对于目标单克隆抗体进行稀释；随后室温下进行干燥；用不高于百分之十的脱脂奶粉液进行浸泡，再用PBS洗涤3-4次；上述步骤反复两次；滤纸再次吸干；加入质量百分比为百分之十的D B A，静置I 5分钟；即可。
[0004]本发明中，其特征在于，原始噬菌体使用前最好振荡轻摇十五分钟。
[0005]本发明中，静置后可以室温下过夜后再进行鉴定。
[0006]本发明的有益效果是:操作简单，成本较低，可以准确进行筛选，重复操作性强，筛选精确。
【具体实施方式】
[0007]对阳性噬菌体克隆的鉴定方法，步骤如下:首先在纤维膜上涂抹上硝酸盐类溶液，用PBS提前24小时浸泡，然后用滤纸将其吸干；对于目标单克隆抗体进行稀释；随后室温下进行干燥；用不高于百分之十的脱脂奶粉液进行浸泡，再用PBS洗涤3-4次；上述步骤反复两次；滤纸再次吸干；加入质量百分比为百分之十的D B A，静置I 5分钟；即可。
[0008]本发明中，原始噬菌体使用前最好振荡轻摇十五分钟。
[0009]本发明中，静置后可以室温下过夜后再进行鉴定。
[0010]以上所述，仅为本发明较佳的【具体实施方式】，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本【技术领域】的技术人员在本发明披露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
【权利要求】
1.对阳性噬菌体克隆的鉴定方法，其特征在于，步骤如下:首先在纤维膜上涂抹上硝酸盐类溶液，用PBS提前24小时浸泡，然后用滤纸将其吸干；对于目标单克隆抗体进行稀释；随后室温下进行干燥；用不高于百分之十的脱脂奶粉液进行浸泡，再用PBS洗涤3-4次；上述步骤反复两次；滤纸再次吸干；加入质量百分比为百分之十的D B A，静置I 5分钟；即可。
2.如权利要求1所述的对阳性噬菌体克隆的鉴定方法，其特征在于，原始噬菌体使用前最好振荡轻摇十五分钟。
3.如权利要求1所述的对阳性噬菌体克隆的鉴定方法，其特征在于，静置后可以室温下过夜后再进行鉴定。
【文档编号】G01N33/577GK103616512SQ201310539481
【公开日】2014年3月5日 申请日期:2013年11月5日 优先权日:2013年11月5日
【发明者】辛竹 申请人:辛竹