用于电泳分析的试剂涂覆装置制造方法
【专利摘要】提供一种用于电泳分析的试剂涂覆装置，其能够以低成本通过简单的配置涂覆试剂。用于在电泳分析中将试剂供应到凝胶表面的试剂供应装置包括作为板状体的试剂涂覆工具（100）。该试剂涂覆工具（100）包括：至少一个试剂保持部（104），其在厚度方向上穿过试剂涂覆工具（100）并且通过毛细作用保持试剂；以及试剂铺展部（106），其用于当试剂涂覆工具被置于凝胶上时，将从试剂保持部（104）的下侧开口供应的试剂铺展在凝胶表面上。
【专利说明】用于电泳分析的试剂涂覆装置
【技术领域】
[0001]本实用新型涉及用于电泳分析的试剂涂覆装置，尤其涉及如下用于电泳分析的试剂涂覆装置，其中在生化检测和研究中，分析样品铺展在作为载体的凝胶上并与试剂反应以测定生成物。
【背景技术】
[0002]传统试剂涂覆装置被置于凝胶表面上，随后，使用移液管将试剂通过试剂涂覆装置注射到每个样品上(例如，参见日本专利特许公开2000-329741号公报)。
[0003]为了在上述试剂注射过程中将试剂供应到向凝胶表面上，使用掩模。例如，以下掩模是已知的(参见日本专利特许公开H05-249079(1993)):用于沿着凝胶表面上一个或多个预设区域沉积和铺展一种或多种液体的掩模，该掩模用于接收用于覆盖各种培养表面的多个液体。
[0004]通过掩模将试剂注射到每个样品上的传统试剂涂覆装置不能在没有用于测量生成物的手动作业的情况下实现结果。该作业直接在凝胶上精确进行，需要熟练操作并耗时。
[0005]作为消除棘手工作的技术，有一种通过使用移液管用于自动注射试剂的操作的装置。然而，该技术具有装置复杂、庞大并昂贵的问题。
实用新型内容
[0006]本实用新型是鉴于该问题而作出的，并且本实用新型的目的是提供可在低成本下用简单配置涂覆试剂的试剂涂覆装置。
[0007]为了解决上述问题，本实用新型被配置为通过毛细管作用将试剂保持在试剂涂覆工具的试剂保持部中。
[0008]当该试剂涂覆工具被置于凝胶上时，在该试剂涂覆工具的下表面上形成的试剂铺展部和凝胶的表面间形成空隙。当该试剂涂覆工具保持的试剂接触凝胶的表面时，该试剂涂覆工具的试剂保持部保持的试剂利用毛细管作用产生的力在该空隙中移动以均匀铺展在凝胶上。因为由毛细管作用在所供应的试剂上产生的力大于试剂保持部中的表面张力，所以实现了该试剂铺展。
[0009]根据本实用新型，提供一种用于在电泳分析中将试剂供应到凝胶表面的试剂供应装置，该试剂供应装置包括作为板状体的试剂涂覆工具，该试剂涂覆工具包括:至少一个试剂保持部，其在厚度方向上穿过所述试剂涂覆工具并且通过毛细管作用保持试剂；以及试剂铺展部，其用于当所述试剂涂覆工具被置于所述凝胶上时，将从所述试剂保持部的下侧开口供应的试剂铺展在所述凝胶的表面上。
[0010]在这点上，所述试剂供应装置可被配置为使得所述试剂涂覆工具被置于所述凝胶上时，所述试剂铺展部和所述凝胶表面之间形成空隙，并且所述试剂保持部的所述下侧开口供应的试剂通过毛细管作用输送到所述试剂铺展部并涂覆在所述凝胶表面。
[0011]进一步地，所述试剂供应装置可被配置为使得所述试剂铺展部具有在厚度方向上穿过所述板状体的附加开口，并且所述试剂铺展部和所述凝胶表面之间形成的空隙中的空气被所述试剂保持部的下侧开口中供应的试剂压向所述附加开口。
[0012]进一步地，所述试剂供应装置可被配置为使得所述试剂涂覆工具的面向所述凝胶的表面具有连接到在所述试剂铺展部和所述凝胶表面之间形成的空隙的开口部，并且所述空隙中的空气被所述试剂保持部的下侧开口中供应的试剂压向所述开口部。
[0013]进一步地，所述试剂保持部可以是圆柱形或椭圆柱形状。
[0014]进一步地，所述试剂供应装置可进一步包括用于从所述试剂涂覆工具上方吹气以将所述试剂保持部保持的试剂供应到所述试剂保持部的下侧的装置。
[0015]根据本实用新型，可以提供一种具有简单配置的低成本用于电泳分析的试剂供应
装直。
[0016]进一步地，首先在所述试剂涂覆工具上提供多种试剂，并且这些试剂可同时铺展在所述凝胶表面上。因此，能够以低成本容易地将电泳分析所需的手动工作自动化。
[0017]进一步地，可以首先在所述试剂涂覆工具上与分析装置等的位置不同的位置处提供试剂。
[0018]本实用新型的其他特征将从以下(参照附图)对示例性实施例的描述而变得清楚。【专利附图】
【附图说明】
[0019]图1是根据 本实用新型一实施方式的试剂供应装置中包括的试剂涂覆工具的外部立体图；
[0020]图2是行试剂铺展部的纵向上看的根据本实用新型的实施方式的试剂涂覆工具的侧视图；
[0021]图3Α至3C示出根据本实用新型该实施方式的试剂涂覆工具的截面图的示例。图3Α是包括侧面接触型的试剂保持部的截面图，图3Β和3C是包括侧面开口型的试剂保持部的部分的截面图；
[0022]图4Α是从下面看到的包括试剂铺展部的侧面接触型的试剂涂覆工具的一部分的视图，图4Β是与凝胶的表面接触的试剂铺展部的侧面截面图；
[0023]图5是根据本实用新型该实施方式的试剂涂覆工具支持单元的外部立体图；
[0024]图6是根据本实用新型该实施方式的保持试剂涂覆工具的试剂涂覆工具支持单元的外部立体图；
[0025]图7是用于说明根据本实用新型该实施例的用于将试剂涂覆工具支持单元保持在托盘中的机构的视图；
[0026]图8Α是用于本实用新型该实施方式的凝胶膜的外部立体图。图SB是保持凝胶膜的膜保持器的外部立体图；
[0027]图9Α是根据本实用新型该实施方式的滤纸支持工具的外部立体图，图9Β是图9Α中箭头B方向看到的该滤纸支持工具的侧视图，并且图9C是图9Α中从箭头C方向看到的该滤纸支持工具的侧视图；
[0028]图1OA是支撑滤纸的滤纸支持工具的外部立体图，图1OB是图1OA中从箭头B方向看到的该滤纸支持工具的侧视图，并且图1OC是图1OA中从箭头C方向看到的该滤纸支持工具的侧视图；和[0029]图11是根据本实用新型该实施方式的试剂涂覆工具支持单元和滤纸支持工具装配到的托盘的外部立体图。
【具体实施方式】
[0030]下面将参照附图详细描述本实用新型的实施方式。
[0031]图1是根据该实施方式的试剂供应装置中包括的试剂涂覆工具的外部立体图；图2是试剂涂覆工具的侧视图；
[0032]用于在电泳分析中将试剂供应到凝胶表面的试剂供应装置包括板状的试剂涂覆工具100和稍后描述的试剂涂覆工具支持单元。试剂涂覆工具100具有在厚度方向上穿过该板状体的试剂保持部104。试剂保持部104通过毛细管作用保持等于或者小于预设量的试剂量。在图1中所示的实施例中，试剂涂覆工具100具有十二个试剂保持部104。
[0033]试剂保持部104的开口可以是圆柱形或椭圆柱形状。
[0034]进一步地，试剂涂覆工具100在下侧表面(换句话说，试剂涂覆工具100被置于凝胶上的情况下面对凝胶的表面)具有试剂铺展部106 (巷道)。试剂铺展部106形成为长矩形状。在图1所示的实施方式中，试剂涂覆工具100共具有十二个(6列X2行)试剂铺展部106。然而，本实用新型不仅限于此。
[0035]进一步地试剂涂覆工具100具有凹槽108，凹槽108用于当稍后描述的试剂涂覆工具支持单元保持该试剂涂覆工具时，与设置到该试剂涂覆工具支持单元的销接合。
[0036]图3A至3C示出沿着图1中的箭头IIIA和IIIA、IIIB和IIIB、IIIC和IIIC示出的线取得的试剂涂覆工具100的截面图的实施例。图3A是侧面接触型的试剂涂覆工具100的试剂保持部的截面图，图3B和3C是侧面开口型的试剂涂覆工具100的试剂保持部的截面图。在图3A和3B中，试剂保持部104由漏斗形存储部304和圆柱形毛细管部302组成。试剂通过毛细管作用保持在毛细管部302中。存储部304保持无毛细管作用的附加试剂，并且还具有便于利用移液管注射试剂的功能。
[0037]另外，如图3C中所示实施例中，可在试剂涂覆工具100的上部进一步形成附加的圆柱形存储部314。进一步地，毛细管部302只需具有使得毛细管部302可以通过毛细管作用保持试剂的形状。例如，毛细管部302可以是倾斜的。
[0038]试剂铺展部106设置在面对凝胶表面的表面上。当试剂涂覆工具100被置于凝胶上时，在试剂铺展部和凝胶表面之间形成有宽度由箭头306、310示出的空隙。在试剂涂覆工具是侧面接触型的情况下，如图3A中所示，试剂铺展部106的侧部紧密接触凝胶的表面。另一方面，在该试剂涂覆工具是侧面开口型时，如图3B和3C中所示，支持柱316紧密接触凝胶的表面。宽度由箭头310示出的空隙与由支持柱316形成的开口部312连通。另外，在图3B和3C中实施例中，支持柱316沿着试剂铺展部106的纵向设置，但是支持柱可以形成在任何地方，只要可以形成开口部312即可。
[0039]试剂保持部104可以保持等于或低于预定量的试剂量。可以使用试剂来测量试剂保持部104的保持能力，但是在使用粘性试剂的情况下，存在难以测量的情况。因此，最好使用纯水来测量标准保持能力并且使用该标准保持能力。试剂保持部104的最大保持能力优选被设置为使得试剂保持部104填充纯水并且下出口的液面是平的或者其中部有点升高的凹面的量。进一步地，优选地，将最大保持能力设置为使得试剂保持部104的上注射开口的液面中心处于最低水平的量。进一步地，试剂保持能力可以设置为还包括存储部304的保持能力。
[0040]另外，试剂保持部104可以将纯水填充到下出口的液面为凸面的状态，或者填充到上注射开口的液面为平面或凸面的状态。然而，由于上液面的表面张力的作用，这是不适当的，并且试剂会由于轻微的振动而滴下。
[0041]进一步地，在试剂保持部104是侧面接触型的情况的图中，试剂保持部104的开口可以是主轴在横向上的椭圆柱形状。然而，在试剂保持部104是侧面开口型的情况下，试剂保持部104优选是圆柱形，使得在注射试剂时，铺展到侧面的试剂量可以减少。进一步地，在试剂包含表面活性剂并且使用侧面开口型的试剂保持部104的情况下，试剂可能从空隙流出，并且必须在使用期间使振动最小化。
[0042]包括用于保持试剂的每个试剂保持部104的试剂涂覆工具100被置于凝胶上。当试剂涂覆工具100振动时，由试剂保持部104保持的试剂从下侧开口流出。流出的试剂通过毛细管作用铺展在该空隙中，从而该试剂被涂覆到凝胶表面。铺展的试剂被涂覆到具有由箭头306、310示出的宽度并且在纵向方向上(即，与图3A至3C的平面垂直的方向上)延伸的区域。
[0043]图4A是从下面看到的包括试剂铺展部106的侧面接触型的试剂涂覆工具100的一部分的视图，图4B是与凝胶表面接触的试剂铺展部106的侧面截面图。
[0044]在图4A中所示的侧面接触型的试剂涂覆工具100中，在形成为长矩形状的试剂铺展部106的一端，试剂保持部104被形成为在厚度方向上穿过试剂涂覆工具100。进一步地，在试剂铺展部106的另一端，形成在厚度方向上穿过试剂涂覆工具100的通气口 102。当从试剂保持部104的下侧的开口流出的试剂通过毛细管作用铺展在试剂铺展部106和凝胶表面之间的空隙中时，该空隙中的空气被该试剂压向该通气口 102。
[0045]另一方面，如图3B和3C中所示，在试剂涂覆工具100是侧面开口型的情况下，代替通气口，试剂涂覆工具100具有在试剂涂覆工具100的下表面上沿着试剂铺展部106的纵向的开口部312。当从试剂保持部104的下侧开口流出的试剂通过毛细管作用铺展在试剂铺展部106和凝胶表面之间的空隙中时，该空隙中的空气被从该开口下侧供应的试剂压向开口部312。另外，存在试剂流到具有由箭头310示出的宽度的区域以外的情况，但是支持柱316防止试剂铺展到试剂铺展部106外部。
[0046]优选地，试剂铺展部106中的空隙直接连接到试剂保持部104的下侧开口。
[0047]图5是根据本实施方式的试剂涂覆工具支持单元的外部立体图。试剂涂覆工具支持单元500具有作为其中心的开口 510，试剂涂覆工具100被插入该开口 510中。进一步地，试剂涂覆工具支持单元500具有设置在构成该开口的一对侧面的四个销506，用于将试剂涂覆工具100支持在侧表面512上。
[0048]进一步地，凹槽502和508分别形成在试剂涂覆工具支持单元500的上端和下端(“上”和“下”是指附图中的位置)。凹槽508大于凹槽502。如图7中所示，这些凹槽被设置为与设置到托盘702的销704和706接合。在图7中所示的实施例中，销704和706具有分别对应于凹槽502和508的尺寸。进一步地，每个销704和706设置有止动片708。因此，当销502和508与销704和706接合时，试剂涂覆工具支持单元500固定在该止动片的水平，并且浮动，使得由试剂涂覆工具100的试剂保持部104保持的试剂不附着到托盘702。[0049]进一步地，在试剂涂覆工具支持单元500中的四个位置处设置有片状构件504。运输电梯可以通过支持片状构件504来移动试剂涂覆工具100。
[0050]图6是用于保持试剂涂覆工具100的试剂涂覆工具支持单元500的外部立体图。试剂涂覆工具支持单元500中的四个位置处的销506安装在试剂涂覆工具100中的凹槽108中，从而支持试剂涂覆工具100。通过相对于水平放置的试剂涂覆工具支持单元500垂直移动试剂涂覆工具100，可以将试剂涂覆工具100装配到销506或者将试剂涂覆工具100与销506分开。这样，如图7中所示，用于支持试剂涂覆工具100的试剂涂覆工具支持单元500被装配到托盘702，并且该托盘作为整体被运送。
[0051]图8A是在本实施方式中使用的凝胶膜的外部立体图。设置在板812上的凝胶膜804包括诸如琼脂糖、琼脂和聚丙烯酰胺凝胶的载体。对于分析样品的涂覆，为了提高凝胶对样品和试剂的吸收，凝胶膜的一定的缓冲量被滤纸吸收，然后从样品台提取分析样品，将分析样品放在涂覆器上，并且涂覆到凝胶膜804。该分析样品包括血清蛋白、同工酶、脂蛋白等。分析样品的涂覆位置随被检测的项目而变化。在图8A中所示的实施例中，分析样品被涂覆到凝胶膜804上由附图标记806表示的中心位置。
[0052]试剂被涂覆到由附图标记808表示的位置。公知的试剂被用作该试剂。例如，可以以相同的方式使用公知的试剂，例如，乳酸脱氢酶(LDH)同工酶试剂、肌酸激酶(CK)同工酶试剂、碱性磷酸酶同工酶试剂、淀粉酶同工酶试剂、胆固醇碎片试剂、亮氨酸氨肽酶(LAP)同工酶试剂、伽马谷氨酰胺转肽酶(Y GTP)同工酶试剂、胆碱酯酶同工酶试剂以及烯醇酶同工酶试剂。
[0053]如图SB中所示，凝胶膜804被膜保持器802保持。
[0054]在使用期间，支持试剂涂覆工具100的试剂涂覆工具支持单元500被置于支持凝胶膜804的膜保持器802上。当试剂涂覆工具支持单元500被置于膜保持器802上时，试剂涂覆工具100置于凝胶膜804上。在此情况下，试剂涂覆工具100与试剂涂覆工具支持单元500分开。位于凝胶膜804上的试剂涂覆工具100在略高于位于膜保持器802上的试剂涂覆工具支持单元500处浮动。
[0055]图9A至9C示出用于支持滤纸的滤纸支持工具，该滤纸用于吸收涂覆到凝胶的过多试剂。图9A是滤纸支持工具的外部立体图，图9B是从图9A中的箭头B看到的滤纸支持工具的侧视图，图9C是从图9A中的箭头C看到的滤纸支持工具的侧视图。在图9A中，在滤纸支持工具900的中心设置有开口。一对侧壁914固定到在该开口的纵向上延伸的侧面(“纵向”是指该图中的方向)。如图9B中所示，具有滤纸安装表面912的订书钉形构件916固定到侧壁914。如图9A中所示，用于保持滤纸的夹具904设置在该开口的上部和下部(“上”和“下”是指该图中的位置)。
[0056]图1OA至IOC示出支持滤纸的滤纸支持工具。图1OA是滤纸支持工具的外部立体图，图1OB是从图1OA中的箭头B看到的滤纸支持工具的侧视图，图1OC是从图1OA中的箭头C看到的滤纸支持工具的侧视图。滤纸1002装配到滤纸安装表面912。如图1OB中所示，装配到滤纸安装表面912的滤纸的端部被折起，以包裹滤纸安装表面912，并且被夹具904保持。在图1OC中，在滤纸安装表面912下方的滤纸紧密接触凝胶表面，并且可以吸收涂覆到凝胶的过多试剂。
[0057]进一步地，如图1OA中所示，凹槽906和908分别设置在滤纸支持工具900的上端和下端(“上”和“下”是指图中的位置)。凹槽908大于凹槽906。如图7中所示，这些凹槽与设置到托盘702的销704和706接合。在图7中所示的实施例中，销704和706分别具有与凹槽906和908相对应的尺寸。因此，滤纸支持工具900装配到托盘702，并且如同试剂涂覆工具100，滤纸支持工具900可以被承载在该托盘中。
[0058]进一步地，在滤纸支持工具900中的四个位置处设置有片状构件910。运输电梯可以通过支持片状构件910来移动滤纸支持工具900。
[0059]接下来，说明用于将试剂供应到凝胶表面的上述试剂供应装置的专用操作。在下文中，作为实施例说明免疫固定。
[0060]首先，如图6中所示，将试剂涂覆工具100设置到试剂涂覆工具支持单元500。
[0061]接下来，将试剂注射到试剂保持部104中。如图3A中所示，在将移液管的尖端平稳地涂覆到存储部304的内壁之后，一点一点地注射试剂。
[0062]进一步地，凝胶膜804受到电泳。具有受到电泳的凝胶膜804的膜保持器802与平坦表面紧密接触。在凝胶膜804的上表面通过电渗形成缓冲区的情况下，该缓冲区影响凝胶膜804对试剂的吸收，并且可以通过利用吹风机干燥该缓冲区来进行调节。
[0063]接下来，当使支持试剂涂覆工具100的试剂涂覆工具支持单元500从某一高度位置(例如，凝胶表面上方二或三毫米)自由落在凝胶膜804上，使得凝胶不被损坏时，试剂涂覆工具100在其自己的重量作用下下落。在此情况下，试剂涂覆工具100被置于凝胶膜804上，并且试剂涂覆工具100从位于膜保持器802上的试剂涂覆工具支持单元500移位并且轻微浮动。因为由试剂涂覆工具100的下落引起的振动，试剂从试剂保持部104流出，并且如上所述，该试剂被精确涂覆到凝胶膜。
[0064]当凝胶松软时，需要轻轻地放置试剂涂覆工具100。在此情况下，存在试剂不与凝胶表面接触并且不涂覆试剂的巷道。在此情况下，通过利用吹风机从试剂涂覆工具100上方吹风，可以迫使试剂流到试剂铺展部106而不损坏凝胶。
[0065]当反应结束时，试剂涂覆工具100被去除，并且滤纸支持工具900被置于凝胶膜804上，以吸收过多的试剂。
[0066]从其吸收了过多试剂的凝胶膜804与膜保持器802 —起浸没在生理盐水中，并且没有通过抗原-抗体反应固定到该凝胶的蛋白质和试剂被洗去，由此进行脱蛋白。
[0067]接下来，再次利用滤纸从经过脱蛋白的凝胶膜804的表面吸收生理盐水之后，利用染色溶液将凝胶膜804染色。染色试剂铺展在凝胶膜804上。进一步地，在凝胶的染色中没有使用的染色溶液被洗去。在该洗涤过程中，一般使用例如包含大约3%乙酸或者0.3%柠檬酸的溶液。
[0068]之后，将脱色后的凝胶干燥，并且由扫描器读取干燥的凝胶膜804，以对该凝胶膜进行图像处理。
[0069]至此已经说明了本实用新型的优选实施方式。然而，不言自明，本实用新型不局限于上述实施方式，并且还可以实现其他各种实施方式。
[0070]例如，在上述实施方式中，试剂涂覆工具和试剂涂覆工具支持单元是分开的。然而，它们可以形成为一体。在此情况下，希望减小它们的重量，从而在铺展试剂时不损坏琼脂糖。
[0071]进一步地，如图11中所示，可以使用一个托盘同时运送试剂涂覆工具支持单元和滤纸支持工具。在图11中所示的实施例中，利用设置到托盘1100的销1102、1104装配一个试剂涂覆工具支持单元500，并且利用销1106、1108装配两个滤纸支持工具900。进一步地，销1102、1104、1106和1108设置有止动片1110。
[0072]进一步地，构成试剂涂覆工具的试剂铺展部的数目不局限于上述实施方式中的数目。例如，试剂铺展部的总数可以是九个(3列X3行)。
[0073]进一步地，当试剂涂覆单元的尺寸大时,存在试剂涂覆单元以一定的角度接触凝胶并且与凝胶接触的环境改变的情况。因此，当试剂铺展部的多个部分可以独立工作时，试剂铺展部可以稳定地置于该凝胶上。例如，在上述实施方式中，6列X2行的试剂铺展部构成试剂涂覆工具。然而，试剂铺展部可以配置为使得每行或每个试剂铺展部可以独立地装配到试剂涂覆工具支持单元或者与试剂涂覆工具支持单元分开。
[0074]只要该实施方式不超过本实用新型的范围，那么该实施方式也在权利要求的范围内。
[0075]本实用新型可被用于利用凝胶铺展一种或多种用于电泳分析的试剂，并且尤其可被用于涂覆用于免疫固定的抗血清。
[0076]虽然已经参照示例性实施方式对本实用新型进行了描述，但是应当理解，本实用新型并不限于所公开的示例性实施方式。应当对所附权利要求的范围给予最宽的说明，以使其涵盖所有这些变型例以及等同的结构和功能。
【权利要求】
1.一种试剂供应装置，用于在电泳分析中将试剂供应到凝胶表面，该试剂供应装置包括: 作为板状体的试剂涂覆工具，该试剂涂覆工具包括: 至少一个试剂保持部，其在厚度方向上穿过所述试剂涂覆工具并且通过毛细管作用保持试剂；以及 试剂铺展部，其用于当所述试剂涂覆工具被置于所述凝胶上时，将从所述试剂保持部的下侧开口供应的试剂铺展在所述凝胶的表面上。
2.根据权利要求1所述的试剂供应装置，其中当所述试剂涂覆工具被置于所述凝胶上时，在所述试剂铺展部和所述凝胶表面之间形成有空隙，并且所述试剂保持部的下侧开口供应的试剂通过毛细管作用输送到所述试剂铺展部并且被涂覆到所述凝胶表面。
3.根据权利要求1所述的试剂供应装置，其中所述试剂铺展部具有在厚度方向上穿过所述板状体的附加开口，并且在所述试剂铺展部和所述凝胶表面之间形成的空隙中的空气被从所述试剂保持部的下侧开口供应的试剂压向所述附加开口。
4.根据权利要求1所述的试剂供应装置，其中所述试剂涂覆工具的面向所述凝胶的表面具有连接到在所述试剂铺展部和所述凝胶表面之间形成的空隙的开口部，并且所述空隙中的空气被从所述试剂保持部的下侧开口供应的试剂压向所述开口部。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的试剂供应装置，其中所述试剂保持部是圆柱形或者椭圆柱形状。
6.根据权利要求1至4中任一项所述的试剂供应装置，进一步包括用于从所述试剂涂覆工具上方吹气以将所述试剂保持部保持的试剂供应到所述试剂保持部的下侧的装置。
【文档编号】G01N27/447GK203519556SQ201320621218
【公开日】2014年4月2日 申请日期:2013年10月9日 优先权日:2012年10月9日
【发明者】中里时亚 申请人:海伦娜研究所株式会社