一种定量检测白酒中14种反式-2-烯醛类和二烯醛类化合物的方法
【专利摘要】一种定量检测白酒中14种反式-2-烯醛类和二烯醛类化合物的方法，属于白酒风味物质检测【技术领域】。本发明采用邻五氟苯甲基羟胺（PFBHA）衍生，顶空-固相微萃取（HS-SPME）同时萃取衍生，气相色谱-质谱（GC-MS）实现定量检测我国白酒中14种反式-2-烯醛类和二烯醛类化合物。本发明准确度、精密度高，检测限低，并且定量检测反式-2-烯醛类和二烯醛类的种类达到14种，能满足白酒中反式-2-烯醛类和二烯醛类化合物的检测要求，有助于分析比较不同白酒产品之间的重要风味物质差别，为白酒品质的改进提供必要的手段和相关理论依据。
【专利说明】一种定量检测白酒中14种反式-2-烯醛类和二烯醛类化合物的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种利用气相色谱-质谱定量检测我国白酒中14种反式-2-烯醛类和二烯醛类化合物的方法，特别是涉及一种利用邻五氟苯甲基羟胺(PFBHA)衍生，顶空-固相微萃取(HS-SPME)同时萃取衍生，气相色谱-质谱(GC-MS)定量检测我国白酒中14种反式-2-烯醛类和二烯醛类化合物的方法，属于白酒风味物质检测【技术领域】。
【背景技术】
[0002]醛类是饮料酒香气重要成分，由微生物发酵及脂肪和醇类氧化产生。反式-2-烯醛类和二烯醛类化合物属于不饱和醛类，在饮料酒中的含量低，但由于其较低的阈值，对饮料酒的香气有很大贡献。目前，中国白酒中反式-2-烯醛类和二烯醛类化合物定量检测领域的研究较少，醛类检测主要集中在总醛和饱和醛类上，还没建立针对中国多种香型白酒中反式-2-烯醛类和二烯醛类的定量方法。国内关于反式-2-烯醛类和二烯醛类研究主要是定性研究，在我国清香型和酱香型白酒中共定性出6种反式-2-烯醛类和6种二烯醛类化合物，但没有对其进行准确定量。
[0003]已经有许多方法用于定量检测饮料酒中的反式-2-烯醛类和二烯醛类，包括气相色谱-质谱及衍生剂联用气相色谱-质谱或联用高效液相色谱法(HPLC)等方法。目前为止，关于葡萄酒、啤酒以及葡萄渣蒸馏酒中GC-MS和二烯醛类的研究都比较多。中国白酒中反式-2-烯醛类和二烯醛类的定量研究目前还尚属空白。
[0004]本发明运用PFBHA作衍生化试剂，HS-SPME同时萃取衍生与GC-MS联用的方法共定量我国白酒中14种反式-2-烯醛类和二烯醛类化合物。该方法准确度、精密度高，检测限低，并且定量检测反式-2-烯醛类和二烯醛类的种类达到14种，能满足白酒中反式-2-烯醛类和二烯醛类化合物的检测要求，有助于分析比较不同白酒产品之间的重要风味物质差另IJ，为白酒品质的改进提供必要的手段和相关理论依据。
[0005]鉴于此，为了更好的分析白酒中香气成分，提高白酒品质，发明一种定量我国白酒中反式-2-烯醛类和二烯醛类的方法十分必要。
【发明内容】
[0006]本发明所解决的技术问题是提供一种利用PFBHA作衍生化试剂，HS-SPME同时萃取衍生与GC-MS联用的方法共定量我国白酒中14种反式-2-烯醛类和二烯醛类化合物的方法。该方法准确度、精密度高，检测限低，并且定量检测反式-2-烯醛类和二烯醛类的种类达到14种，能满足白酒中反式-2-烯醛类和二烯醛类化合物的检测要求，有助于分析比较不同白酒产品之间的重要风味物质差别，为白酒品质的改进提供必要的手段和相关理论依据。
[0007]本发明的技术方案，一种定量检测白酒中14种反式-2-烯醛类和二烯醛类化合物的方法，利用邻五氟苯甲基羟胺PFBHA衍生，顶空-固相微萃取HS - SPME，气相色谱-质谱GC - MS定量检测我国白酒中14种反式-2-烯醛类和二烯醛类化合物，步骤为:
(I)样品预处理:取酒样，用煮沸后冷却至室温的超纯水将酒样稀释至酒精度按体积计浓度为10%;准确吸取8mL稀释后的酒样，置于20mL顶空瓶中，加入8μL浓度为1.0724mg/L的内标对氟苯甲醛溶液和300μL浓度为20g/L的衍生化试剂PFBHA溶液，旋紧瓶盖，待分析；
(2 ) HS-SPME 和 GC - MS 分析:
顶空-固相微萃取:用自动进样装置进行样品HS-SPME顶空-固相微萃取，采用DVB/CAR/PDMS三相萃取头；HS-SPME的条件是在步骤(1)制备的待分析样品中加入3g NaCl，萃取温度65 °C，萃取时间为45min ；
取步骤(1)所得白酒酒样进行气相色谱-质谱GC-MS检测；
GC条件:载气He，纯度99.9995%，流速2mL/min，不分流进样；色谱柱:DB_Wax，尺寸为60mX0.25mmX0.25Mm ;进样口温度250°C，解吸附300s ;升温程序为:50°C保持2min，以6 V /min 升至 100°C，保持 0.1min,以 2°C /min 升至 160°C，保持 0.1min,以 5°C /min 升至230°C，保持 15min ；
MS条件:电子电离EI，电子能量70eV，离子源温度230°C，SCAN模式扫描范围为35.00^380.0Oamu ;质谱分析使用NIST05a.L数据库；
(3)定性和定量分析:通过对比步骤(2)分析后的酒样所得结果，与反式-2-烯醛类和二烯醛类标准品衍生后的保留时间，以及NIST05a.L数据库提供的质谱图对照，利用匹配度、特征离子以及保留时间进行定性分析；
用选择特征定量离子SIM的`方法对反式-2-烯醛类和二烯醛类衍生物进行积分；衍生产物有顺、反异构体的，以两个离子峰面积之和计算，以14种反式-2-烯醛类和二烯醛类衍生物特征离子峰与内标的特征离子峰319)的峰面积之比为横坐标Cr)，反式-2-烯醛类和二烯醛类与内标浓度之比为纵坐标Cf)绘制曲线；
通过绘制所得的曲线即可得到白酒中14种反式-2-烯醛类和二烯醛类化合物定量检测的结果。
[0008]所述14种反式-2-烯醛类和二烯醛类衍生物具体为:反式-2-戊烯醛衍生物；反式_2_己烯醒衍生物；反式-2-庚烯醒衍生物；反式-2-辛烯醒衍生物；反式-2-壬烯醒衍生物；反式-2-癸烯醛衍生物；反式-2-1^一烯醛衍生物；反式-2-十二烯醛衍生物；反，反_2，4-己二烯醛衍生物；反，反_2，4-庚二烯醛衍生物；反，顺_2，6-壬二烯醛衍生物；反，反-2，4-辛二烯醛衍生物；反，反_2，4-壬二烯醛衍生物；反，反_2，4-癸二烯醛衍生物。
[0009]本发明的有益效果:本发明运用PFBHA作衍生化试剂，HS-SPME同时萃取衍生与GC-MS联用的方法共定量我国白酒中14种反式-2-烯醛类和二烯醛类化合物。该方法准确度、精密度高，检测限低，并且定量检测反式-2-烯醛类和二烯醛类的种类达到14种，能满足白酒中反式-2-烯醛类和二烯醛类化合物的检测要求，有助于分析比较不同白酒产品之间的重要风味物质差别，为白酒品质的改进提供必要的手段和相关理论依据。
【专利附图】
【附图说明】
[0010]图l_a、l_b和l_c为14种反式_2_稀醒类和二稀醒类标准品与PFBHA反应的衍生产物离子图谱。
[0011]附图标记说明:1和I’:反式-2-戊烯醛衍生物；2和2’:反式-2-己烯醛衍生物；3和3’:反式-2-庚烯醒衍生物；4和4’:反式-2-羊烯醒衍生物；5:反式_2_壬烯醒衍生物；6和6’:反式-2-癸烯醛衍生物；7和7’:反式-2-十一烯醛衍生物；8和8’:反式-2-十二烯醛衍生物；9和9’:反，反_2，4-己二烯醛衍生物；10和10’:反，反_2，4_庚二烯醛衍生物；11:反，顺_2，6-壬二烯醛衍生物；12和12’:反，反-2，4-辛二烯醛衍生物；13和13’:反，反_2，4-壬二烯醛衍生物；14和14’:反，反_2，4-癸二烯醛衍生物；内标:对氟苯甲醛衍生物。
【具体实施方式】
[0012]实施例1某浓香型白酒A
Cl)样品预处理:用煮沸后冷却至室温的超纯水将A酒酒样稀释至酒精度10%vol，准确吸取8mL置于20mL顶空瓶中，加入8μL的1.0724mg/L内标对氟苯甲醛溶液和300μL的
1.0724mg/L衍生化试剂PFBHA溶液，旋紧瓶盖，待分析。A酒中14种反-2-烯醛和二烯醛类化合物含量见表1。
[0013](2) HS-SPME 和 GC-MS 分析:
用自动进样装置(MPS2)进行样品HS-SPME顶空-固相微萃取同时萃取衍生化，采用DVB/CAR/PDMS三相萃取头。HS-SPME同时萃取衍生化的条件是酒样稀释到酒精度10%vol，样品中加入3g NaCl，同时萃取衍生化温度65°C，萃取衍生化时间45min。
[0014]GC条件:载气He (纯度99.9995%),流速2mL/min,不分流进样；色谱柱:DB_Wax(60mX0.25mmX0.25Mm)0进 样口温度250°C，解吸附300s。升温程序为:50°C保持2min，以 6°C /min 升至 100°C，保持 0.1min,以 2°C /min 升至 160°C，保持 0.1min,以 5°C /min 升至 230°C，保持 15min。
[0015]MS条件:电子电离(EI)，电子能量70eV，离子源温度230°C，SCAN模式扫描范围为35.00^380.0Oamu。质谱分析使用NIST05a.L数据库。
[0016](3)定性和定量分析:通过对比步骤(2)分析后的酒样所得结果，与反式-2-烯醛类和二烯醛类标准品衍生后的保留时间，以及NIST05a.L数据库提供的质谱图对照，利用匹配度、特征离子以及保留时间进行定性分析；
用选择特征定量离子SIM的方法对反式-2-烯醛类和二烯醛类衍生物进行积分；衍生产物有顺、反异构体的，以两个离子峰面积之和计算，以14种反式-2-烯醛类和二烯醛类衍生物特征离子峰与内标的特征离子峰，?Λ 319，的峰面积之比为横坐标Cr)，反式-2-烯醛类和二烯醛类与内标浓度之比为纵坐标Cf)绘制标准曲线；反式-2-烯醛类和二烯醛类标准品与PFBHA反应的衍生产物离子图谱如图1所示。
[0017]通过绘制所得的曲线即可得到白酒中反式-2-烯醛类和二烯醛类化合物定量检测的结果。
[0018]A酒中14种反-2-烯醛和二烯醛类化合物含量见表1。
[0019]表1某浓香型A酒中反-2-烯 醛和二烯醛类含量(Pg/L)
【权利要求】
1.一种定量检测白酒中14种反式-2-烯醛类和二烯醛类化合物的方法，其特征在于利用邻五氟苯甲基羟胺PFBHA衍生，顶空-固相微萃取HS - SPME,气相色谱-质谱GC-MS定量检测我国白酒中14种反式-2-烯醛类和二烯醛类化合物，步骤为: (1)样品预处理:取酒样，用煮沸后冷却至室温的超纯水将酒样稀释至酒精度按体积计浓度为10% ;准确吸取8mL稀释后的酒样，置于20mL顶空瓶中，加入8μL质量浓度为1.0724mg/L的内标对氟苯甲醛溶液和300μL的质量浓度为20g/L的衍生化试剂PFBHA溶液，旋紧瓶盖，待分析；
(2)HS-SPME 和 GC-MS 分析: 顶空-固相微萃取:用自动进样装置进行样品HS-SPME，采用DVB/CAR/PDMS三相萃取头；HS-SPME的条件是在步骤(1)制备的待分析样品中加入3g NaCl，萃取温度65°C，萃取时间为45min ； 取步骤(1)所得白酒酒样进行GC-MS检测； GC条件:载气He，纯度99.9995%，流速2mL/min，不分流进样；色谱柱:DB_Wax，尺寸为60mX0.25mmX0.25Mm ;进样口温度250°C，解吸附300s ;升温程序为:50°C保持2min，以6°C /min 升至 10CTC,保持 0.1min,以 2°C /min 升至 160°C,保持 0.1min,以 5°C /min 升至230°C，保持 15min ； MS条件:电子电离EI，电子能量70eV，离子源温度230°C，SCAN模式扫描范围为35.00^380.0Oamu ;质谱分析使用NIST05a.L数据库； (3)定性和定量分析:通过对比步骤(2)分析后的酒样所得结果，与反式-2-烯醛类和二烯醛类标准品衍生后的保留时间，以及NIST05a.L数据库提供的质谱图对照，利用匹配度、特征离子以及保留时间进行定性分析； 用选择特征定量离子SIM的方法对反式-2-烯醛类和二烯醛类衍生物进行积分；衍生产物有顺、反异构体的，以两个离子峰面积之和计算，以14种反式-2-烯醛类和二烯醛类衍生物特征离子峰与内标的特征离子峰?Λ 319的峰面积之比为横坐标a反式-2-烯醛类和二烯醛类与内标浓度之比为纵坐标_7绘制曲线； 通过绘制所得的曲线即可得到白酒中14种反式-2-烯醛类和二烯醛类化合物定量检测的结果。
2.根据权利要求1所述定量检测白酒中14种反式-2-烯醛类和二烯醛类化合物的方法，其特征在于:所述14种反式-2-烯醛类和二烯醛类衍生物具体为:反式-2-戊烯醛衍生物；反式_2_己烯醒衍生物；反式-2-庚烯醒衍生物；反式-2-辛烯醒衍生物；反式-2-壬烯醛衍生物；反式-2-癸烯醛衍生物；反式-2-十一烯醛衍生物；反式-2-十二烯醛衍生物；反，反-2，4-己二烯醛衍生物；反，反_2，4-庚二烯醛衍生物；反，顺_2，6-壬二烯醛衍生物；反，反-2，4-辛二烯醛衍生物；反，反-2，4-壬二烯醛衍生物；反，反_2，4-癸二烯醛衍生物。
【文档编号】G01N30/02GK103869015SQ201410107254
【公开日】2014年6月18日 申请日期:2014年3月21日 优先权日:2014年3月21日
【发明者】范文来, 徐岩, 曹长江 申请人:江南大学