牛奶中低聚果糖的检测方法
【专利摘要】本发明涉及一种牛奶中低聚果糖的检测方法，属于食品添加剂及其检测方法领域。所述的牛奶中低聚果糖的检测方法，包括以下步骤：称取4.5g牛奶样品至100mL容量瓶中，加50℃蒸馏水30mL，混匀，冷却后徐徐加入色谱纯乙腈，边加边振摇，定容至刻度，用超声波振荡8min；取出将溶液离心，吸取上清液过0.45μm过滤器过滤，滤液作为样品溶液备用，按一定的色谱条件，将低聚果糖标准溶液和处理好的样品溶液依次进样分析，根据保留时间定性，采用色谱峰面积定量计算，即各得到牛奶中低聚果糖的含量。本发明所述的检测方法中，采用乙腈-超声波提取样品中的低聚果糖，提取液用高效液相色谱法进行检测定量，牛奶中低聚果糖检测的回收率在96.6-104.4％之间，符合分析要求，各检测结果准确可靠,重现性好。
【专利说明】牛奶中低聚果糖的检测方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种牛奶中低聚果糖的检测方法，属于食品添加剂及其检测方法领 域。
【背景技术】
[0002]牛奶中含有丰富的优质蛋白质、维生素、微量元素等营养元素，营养成分齐全。我 国人们对牛奶认识程度以及需求量日益增加，同时对牛奶制品的营养、安全及卫生方面也 提出了更高的要求。
[0003]低聚果糖又称寡果糖，主要成分为蔗果三糖（GF2)、蔗果四糖（GF3)、蔗果五糖 (GF4)。低聚果糖在肠道内不易消化吸收，是一种低能量的糖；在大肠内被双歧杆菌利用，能 增加肠道内双歧杆菌的数量，抑制有害菌生长；低聚果糖是水溶性膳食纤维，具有降低血清 胆固醇和甘油三酯含量的功能。
[0004] 低聚果糖已经广泛应用于乳制品行业，如低聚果糖酸奶、双歧因子牛奶、奶粉等， 牛奶或奶粉中的低聚果糖是乳制品生产企业必须检测的项目之一。因此研究一种准确度 高、重复性高、操作简便的牛奶中低聚果糖的检测方法很有必要。
【发明内容】
[0005] 本发明旨在提供一种准确度高、重复性高、操作简便的牛奶中低聚果糖的检测方 法。
[0006] 所述的牛奶中低聚果糖的检测方法，包括以下步骤： 称取4· 5g牛奶样品至lOOmL容量瓶中，加5(TC蒸馏水30mL，混勻，冷却后徐徐加入色 谱纯乙腈，边加边振摇，定容至刻度，用超声波振荡8min ;取出将溶液离心，吸取上清液过 0· 4δ μ m过滤器过滤，滤液作为样品溶液备用，按一定的色谱条件，将低聚果糖标准溶液和 处理好的样品溶液依次进样分析，根据保留时间定性，采用色谱峰面积定量计算，即各得到 牛奶中低聚果糖的含量。
[0007] 优选的，本发明所述的色谱条件为300mmX4. 6mm氨基柱，填料粒度5 μ m，柱箱恒 温30°C，流动相为乙腈：水=了7 :23体积比，流速为1. OmL/min，检测器灵敏度：+8,进样量： 20 μ L〇
[0008] 更优选的,本发明所述的低聚果糖标准溶液为称取蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖 标准品各25mg于25ml容量瓶中，用蒸馏水溶解并定容稀释至刻度，过〇· 45 μ m过滤器过 滤，备用。
[0009] 进一步优选的，本发明所述的色谱纯乙腈为浓度60-70%的乙腈水溶液。
[0010] 本发明所述的检测方法的计算公式为： A= ((N/M) XCXV)/mX100 式中：A为样品中蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖的含量mg/i〇〇g; N为样品中低聚果糖的色谱峰面积 Μ为标准品中低聚果糖的色谱峰面积 C为蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖标准品的浓度mg/mL V为样品液的体积mL。
[0011] m为样品的量g。
[0012]注：样品中低聚果糖的总含量为所测得的蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖的和。
[0013]本发明所述的检测方法中，采用乙腈-超声波提取样品中的低聚果糖，提取液用 高效液相色谱法进行检测定量，牛奶中低聚果糖检测的回收率在96. 6-104. 4%之间，符合 分析要求，各检测结果准确可靠，重现性好。
【具体实施方式】 [0014] 实施例一： 称取鹿果三糖、鹿果四糖、鹿果五糖标准品各25mg于25ml容量瓶中，用蒸馈水溶解并 定容稀释至刻度，过0. 45 μ m过滤器过滤，备用。
[0015] 称取4. 5g牛奶样品至lOOmL容量瓶中，加50°C蒸馏水30mL，混勻，冷却后徐徐加 入浓度65%的乙腈水溶液，边加边振摇，定容至刻度，用超声波振荡8min ;取出将溶液离心， 吸取上清液过〇· 45 μ m过滤器过滤，滤液作为样品溶液备用。
[0016] 按一定的色谱条件（300mmX 4. 6圓氨基柱，填料粒度5 μ m，柱箱恒温30°C，流动相 为乙腈：水=77 :23体积比，流速为1. OmL/min，检测器灵敏度：+8,进样量：20 μ L)，将低聚 果糖标准溶液和处理好的样品溶液依次进样分析，根据保留时间定性，采用色谱峰面积定 量计算，即各得到牛奶中低聚果糖的含量。
[0017] 计算公式为：A= ((N/M) XCXV)/mX100 式中：A为样品中蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖的含量mg/100g ; N为样品中低聚果糖的色谱峰面积 Μ为标准品中低聚果糖的色谱峰面积 C为蔗果三糖、蔗果四糖、鹿果五糖标准品的浓度mg/mL V为样品液的体积mL。
[0018] m为样品的量g。
[0019] 实施例二： 应用本发明所述的检测方法对同一双歧因子牛奶样品进行6次测定，其结果见表-1。 RSD% =2. 51% <5%，符合要求。
[0020] 表-1检测结果
【权利要求】
1. 牛奶中低聚果糖的检测方法，包括以下步骤： 称取4. 5g牛奶样品至lOOmL容量瓶中，加50°C蒸馏水30mL，混勻，冷却后徐徐加入色 谱纯乙腈，边加边振摇，定容至刻度，用超声波振荡8min ;取出将溶液离心，吸取上清液过 0. 45 μ m过滤器过滤，滤液作为样品溶液备用，按一定的色谱条件，将低聚果糖标准溶液和 处理好的样品溶液依次进样分析，根据保留时间定性，采用色谱峰面积定量计算，即各得到 牛奶中低聚果糖的含量。
2. 如权利要求1所述的牛奶中低聚果糖的检测方法，其特征在于所述的色谱条件为 300mmX 4. 6mm氨基柱，填料粒度5 μ m，柱箱恒温30°C，流动相为乙腈：水=77 :23体积比，流 速为1. OmL/min，检测器灵敏度：+8,进样量：20 μ L。
3. 如权利要求1所述的牛奶中低聚果糖的检测方法，其特征在于所述的低聚果糖标准 溶液为称取蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖标准品各25mg于25ml容量瓶中，用蒸馏水溶解 并定容稀释至刻度，过〇. 45 μ m过滤器过滤，备用。
4. 如权利要求1所述的牛奶中低聚果糖的检测方法，其特征在于所述的色谱纯乙腈为 浓度60-70%的乙腈水溶液。
【文档编号】G01N30/02GK104297376SQ201410573892
【公开日】2015年1月21日 申请日期:2014年10月24日 优先权日:2014年10月24日
【发明者】李勇, 刘文斌 申请人:西安米亿生物科技有限公司