本发明涉及一种适用于流式细胞分析植物干燥组织的处理方法，属于生物学分析
技术领域：
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背景技术：
：流式细胞术(flowcytometry)是一种利用流式细胞仪对处在液流中的单个细胞或其它生物颗粒等进行快速定量分析和分选的技术。在植物学研究中，则可用于植物倍性鉴定、细胞核DNA数量测定、生殖途径鉴定等。目前，常规的流式细胞术分析植物染色体倍性均采用新鲜植物的根尖、叶片或细嫩的组织，是因为其可以避免老组织内含有较高浓度的淀粉、多糖和其他代谢物，而这些物质分布在细胞质中，使得细胞质紧密地和细胞核粘在一起，影响了细胞核的纯度，同时，也加速了细胞核的老化，增加样品的粘度，使得其不能准确地检测出待测样品的倍性。但是，另一方面，如果采用新鲜或幼嫩的组织，就要求植物材料在短时间内要完成测定，否则细胞核DNA会发生降解，同样会影响检测的准确性。这样就限制了从野外采集的植物样品不能进行流式细胞术分析，极大的限制了流式细胞术在植物生态学、种群生物学、植物系统学中的应用。如中国专利申请(公开号：CN102243150A)公开了一种适用于流式细胞分析的果树成熟叶片的细胞核提取方法，通过对细胞核提取液的组分进行改进，所述细胞核提取液组分为：15-20mmol/LTris，40-60mmol/L的KCl，10-20mmol/L的NaCl，2-5mmol/L的Na2EDTA，10-20mmol/LMgSO4，40-50mmol/L蔗糖和0.5-1.0％TritonX-100，体积加ddH2O至200ml，调pH为7.5-8后，加入200μl的15mmol/L巯基乙醇。通过加入蔗糖使有利于维持细胞核的完整性并防止它们聚集，并通过提高Triton-X-100的处理浓度到1.0％，促使细胞质分散并选择性的溶解叶绿体膜，使有利于在核膜上打孔，以便于荧光染料顺利进入。虽然，现有技术中有提及到成熟叶片的处理方法，但是现有技术中仍然没有涉及到处理检测干燥植物组织的方法，且由于干燥植物组织是经过脱水处理，植物细胞组织基本上与细胞核粘着在一起，很难分离，且脱水后的植物细胞膜很难破壁，很难提取细胞核和保证染色效果，从而影响流式细胞分析的准确性；另一方面，由于干燥植物组织贮存时间久，细胞核内的DNA存在易断裂和降解的问题。技术实现要素：本发明针对以上现有技术中存在的问题，提供一种适用于流式细胞分析植物干燥组织的处理方法，本发明所要解决的问题是如何实现分析植物干燥组织，提高流式细胞分析的适用范围。本发明的目的是通过以下技术方案得以实现的，一种适用于流式细胞分析植物干燥组织的处理方法，该处理方法包括细胞核提取、染色和分析，所述细胞核提取所用细胞核提取液的组分为：Tris：12mM～18mM；Na2EDTA：1mM～3mM；盐酸精胺：0.2mM～0.3mM；KCl：70mM～90mM,NaCl：10mM～25mM；β-巯基乙醇：10mM～20mM；TritonX-100：0.2％(vol/vol)～0.5％(vol/vol)；pH值为6.5～7.0。本发明适用于流式细胞分析植物干燥组织的处理方法，由于植物组织如叶片、根或茎等干燥后，是基本上处于完全脱水之后，植物组织会粘着在细胞核表面，很难达到分离效果，且植物细胞膜很难破壁，也影响了细胞核的提取和不易染色的问题；同时，干燥的植物组织由于贮存时间较久，很容易导致DNA断裂和降解。为了解决上述问题，本发明通过在细胞核提取液中加入盐酸精胺主要作用是为了稳定细胞核DNA的作用，能够有效防止其断裂和降解，提高DNA的提取效率和纯度要求，保证细胞核的完整性和具体较好的分散效果，有利于进行流式细胞分析，并通过加入TritonX-100和提高其浓度，解决因脱水导致的细胞壁难以破壁的问题，从而达到较好的处理效果，另一方面，由于经过干燥的植物组织，植物组织比较硬，需要较长的时间切碎，而切的时间过长，容易导致多酚类物质被氧化，因此，本发明通过加入β-巯基乙醇来达到防止多酚类物质被氧化的效果。通过调节体系的pH值在6.5～7.0，能够减少植物材料的褐化，有利于干燥植物细胞的破膜，从而易于细胞核的释放。上述所述单位mM表示mmol/L，体积比vol/vol表示TritonX-100的体积用量与整体细胞核提取液的体积百分比，两者的体积单位相同的条件下的百分比值，优选，所述细胞核提取液中TritonX-100为0.25％～0.35％(vol/vol)。在上述适用于流式细胞分析植物干燥组织的处理方法中，作为优选，该处理方法具体包括以下步骤：A、细胞核提取：向干燥的植物组织中加入预冷的细胞核提取液，再进行切碎处理，过滤除去残渣，收集含有细胞核的滤液；B、染色和分析：向上述滤液中加入RNA酶A和碘化丙锭进行染色处理，所述碘化丙锭的浓度为0.15mg/mL～0.25mg/mL，染色处理后，进行流式细胞术分析。由于干燥植物组织的细胞核表面会有少量细胞膜、植物组织等杂质，会导致在染色的过程很难染色，从而影响分析的准确性的精度，本发明发现通过提高加入的碘化丙锭的浓度很好的解决了不易染色的问题，使DNA更易被染料吸附，达到较好的染色效果。另外，通过采用预冷的细胞核提取液进行提取，更有利于防止细胞核的降解和保证细胞核的完整性。所述的干燥植物组织最好预先储存在冰袋里或是在冷冻条件下进行保存。在上述适用于流式细胞分析植物干燥组织的处理方法中，作为优选，步骤A中所述切碎处理的具体过程为：将预冷的干燥的植物组织放入预冷的容器中，加入预冷的细胞核提取液，再然后用刀片将植物组织进行第一次切碎处理，过滤，收集含有细胞核的滤液，再采用刀片将剩下的植物组织进行第二次切碎处理，直到将全部的植物组织切碎成糊状。优选，每次切碎处理的时间最好超过10分钟以上。经过第一次切碎后，已经基本被切成小颗粒，但由于干燥的植物组织较硬，小颗粒漂浮在提取液内，很难达到进一步切细效果，因此，本发明通过二次切碎处理，先将经过第一次切碎处理后的提取液过滤出来，再进行二次切碎，从而很好的达到了切碎的效果，也更有利于实现了细胞核的提取和分离。作为进一步的优选，所述刀片的厚度为0.1mm～0.3mm。主要目的有利于破碎细胞，有助于使细胞核游离的作用；另外，刀片的厚度越小，刀片就会越锋利，但是刀片的硬度会减弱；刀片厚度越高，刀片锋利程度较差，植物组织就很难切碎，尤其是干燥的植物组织就更难切碎并释放出细胞核。选择上述厚度范围内的刀片，可以在刀片硬度与锋利度上选择一个平衡点，适应于干燥组织的切碎。在上述适用于流式细胞分析植物干燥组织的处理方法中，作为优选，步骤A中所述干燥的植物组织的重量与细胞核提取液体积的用量比为：50：1～45：1，所述干燥的植物组织的重量单位为毫克，所述细胞核提取液的体积单位为毫升。植物组织的重量要在一定范围内，植物组织过少或是提取液用量的比例过高，会导致植物组织会漂浮在液面上，单位体积液体里细胞核数量过少，难以被检测到；而植物组织用量过多或提取液用量比例过少，又导致分离出来的细胞很难分散，组织很难切碎，同样会使单位体积里的细胞核数量过少。在上述适用于流式细胞分析植物干燥组织的处理方法中，作为优选，步骤B中所述碘化丙锭的浓度为0.18mg/mL～0.22mg/mL。目的是为了提高染料的染色效果。在上述适用于流式细胞分析植物干燥组织的处理方法中，作为优选，步骤A中所述干燥的植物组织选自硅胶干燥、自然风干或压干标本的植物干燥组织。通过采用本发明的处理方法，从而能够适用于干燥的植物组织，大大的提高了适用范围。在上述适用于流式细胞分析植物干燥组织的处理方法中，作为优选，步骤B中所述流式细胞术分析采用的流式分析仪为Attune声波聚焦流式细胞分析仪。作为进一步的优选，步骤B中所述Attune声波聚焦流式细胞分析仪的参数设置为：相应参数电压范围(mV)FSC2300～2400BL11500～1800SSC2500～2600BL21800～1900LB31300～1400VL11200～1300VL21900～2000VL32100～2400上述参数是流式细胞仪中的八个滤光片通道，其数值指的是滤光片通道的电压值，通过将FSC和SSC的电压调节至适宜范围可以找到相应的细胞或细胞核类群。本发明测定干样时所用的电压高于鲜样测定的电压，目的是为了提高细胞核与细胞碎片之间的荧光峰的区分度，有利于染色体倍性的确定。综上所述，本发明与现有技术相比具有以下优点：1.本发明适用于流式细胞分析植物干燥组织的处理方法，通过加入盐酸精胺和提高TritonX-100来实现防止细胞核DNA的降解和提高其稳定性，并通过加入β-巯基乙醇来解决因干燥植物组织切碎过程较好而导致的被氧化的问题，本发明通过上述对细胞核提取液进行改进，从而使本发明的方法能够适用于干燥的植物组织，且还能够适用于各种不同的植物干燥组织，大大提高了适用范围。2.本发明适用于流式细胞分析植物干燥组织的处理方法，通过提高碘化丙锭的浓度，解决了因干燥植物组织的细胞核表面易粘着少量的杂质如细胞膜和植物组织碎片，实现使DNA更易于被染料吸附，达到着色效果。附图说明图1是本发明的方法得到的加拿大一枝黄花干燥叶片样品的流式细胞术分析结果图。图2是本发明的方法得到的黄莺干燥叶片样品的流式细胞术分析结果图。图3是本发明的方法得到的野生草莓干燥叶片样品的流式细胞术分析结果图。图4是本发明的方法得到的栽培草莓干燥叶片样品的流式细胞术分析结果图。图5是本发明的方法得到的栽培草莓干燥叶片样品的流式细胞术分析结果图。图6是本发明的方法得到的栽培草莓干燥叶柄样品的流式细胞术分析结果图。图7是本发明的方法得到的栽培草莓干燥匍匐茎样品的流式细胞术分析结果图。图8是本发明的方法得到的栽培草莓干燥根尖样品的流式细胞术分析结果图。图9是本发明的方法得到的三叶草干燥叶片样品的流式细胞术分析结果图。图10是本发明的方法得到的水杨梅干燥叶片样品的流式细胞术分析结果图。图11是本发明的方法得到的喜旱莲子草干燥叶片样品的流式细胞术分析结果图。图12是本发明的方法得到的小飞蓬干燥叶片样品的流式细胞术分析结果图。图13是本发明的方法得到的龙葵干燥叶片样品的流式细胞术分析结果图。图14是本发明的方法得到的桔子干燥叶片样品的流式细胞术分析结果图。图15是本发明的方法得到的大豆干燥叶片样品的流式细胞术分析结果图。图16是本发明的方法得到的红花檵木干燥叶片样品的流式细胞术分析结果图。图17是本发明的方法得到的构树干燥叶片样品的流式细胞术分析结果图。图18是本发明的方法得到的三叶鬼针草干燥叶片样品的流式细胞术分析结果图。具体实施方式下面通过具体实施例和附图，对本发明的技术方案作进一步具体的说明，但是本发明并不限于这些实施例。实施例1本实施例为加拿大一枝黄花的倍性测定，本实施例中所用的细胞核提取液的组分为：Tris：12mMmM；Na2EDTA：1mM；盐酸精胺：0.2mM；KCl：70mM,NaCl：10mM；β-巯基乙醇：10mM；TritonX-100：0.3％(vol/vol)；pH值为7.0，pH值可以采用1mM的NaOH溶液调节，所述的细胞核提取液预先保存于-20℃的冰箱中备用；将加拿大一枝黄花成熟叶片(经过硅胶干燥的叶片)50mg放入预冷过的塑料培养皿中，再加入预冷的细胞核提取液1mL中，然后采用双面刀片切碎叶片，切碎过程持续10分钟以上，先用30微米尼龙膜过滤，收集含有细胞核的滤液，再对剩余的叶片进行二次切碎处理，即采用双面刀片继续切碎叶片，切碎过程持续10分钟以上，直到将全部的叶片切成糊状，再用细胞核提取液冲洗，过滤，收集含有细胞核的提取液，将两次收集的提取液合并后，加入10微升RNA酶A(浓度为1mg/mL)，混合均匀后在4℃的条件下放置10分钟以上，再向提取液中加入浓度为1mg/mL的碘化丙锭溶液至体系中碘化丙锭的最终浓度为0.2mg/mL，在避光条件下对细胞核DNA进行染色30分钟，染色完成后，进行流式细胞术分析，优选所述流式细胞术分析采用Attune声波聚焦流式细胞分析仪，且所述Attune声波聚焦流式细胞分析仪的参数设置为：相应参数电压值mV(毫伏)FSC2350BL11600SSC2560BL21850LB31340VL11250VL21950VL32200具体分析结果如图1所示，加拿大一枝黄花干燥叶片样品的荧光值为3259937，所测的细胞核DNA含量峰纤细而集中，其CV值4.54％，经计算，加拿大一枝黄花为6倍体，与文献报道相同。实施例2本实施例为黄莺的倍性测定，本实施例中所用的细胞核提取液的组分为：Tris：14mM；Na2EDTA：1mM；盐酸精胺：0.2mM；KCl：70mM,NaCl：15mM；β-巯基乙醇：20mM；TritonX-100：0.5％(vol/vol)；pH值为7.0，pH值可以采用1mM的NaOH溶液调节，所述的细胞核提取液预先保存于-20℃的冰箱中备用；将黄莺成熟叶片(经过硅胶干燥的叶片)50mg放入预冷过的塑料培养皿中，再加入预冷的细胞核提取液1mL中，然后采用双面刀片切碎叶片，切碎过程持续10分钟以上，先用30微米尼龙膜过滤，收集含有细胞核的滤液，再对剩余的叶片进行二次切碎处理，即采用双面刀片继续切碎叶片，切碎过程持续10分钟以上，直到将全部的叶片切成糊状，再用细胞核提取液冲洗，过滤，收集含有细胞核的提取液，将两次收集的提取液合并后，加入10微升RNA酶A(浓度为1mg/mL)，混合均匀后在4℃的条件下放置10分钟以上，再向提取液中加入浓度为1mg/mL的碘化丙锭溶液至体系中碘化丙锭的最终浓度为0.21mg/mL，在避光条件下对细胞核DNA进行染色30分钟，染色完成后，进行流式细胞术分析，优选所述流式细胞术分析采用Attune声波聚焦流式细胞分析仪，且所述Attune声波聚焦流式细胞分析仪的参数设置为：相应参数电压值mV(毫伏)FSC2300BL11700SSC2600BL21800LB31400VL11300VL21900VL32300具体的分析结果如下图2所示，黄莺的干燥叶片样品的荧光值为986872，所测的细胞核DNA含量峰纤细而集中，其CV值3.24％，经计算，黄莺为2倍体，与文献报道相同。实施例3本实施例为加拿大一枝黄花的倍性测定，本实施例中所用的细胞核提取液的组分为：Tris：18mM；Na2EDTA：3mM；盐酸精胺：0.2mM；KCl：70mM,NaCl：25mM；β-巯基乙醇：20mM；TritonX-100：0.2％(vol/vol)；pH值为7.0，pH值可以采用1mM的NaOH溶液调节，所述的细胞核提取液预先保存于-20℃的冰箱中备用；将加拿大一枝黄花成熟叶片(经过硅胶干燥的叶片)45mg放入预冷过的塑料培养皿中，再加入预冷的细胞核提取液1mL中，然后采用厚度为0.1mm的双面刀片切碎叶片，切碎过程持续10分钟以上，先用30微米尼龙膜过滤，收集含有细胞核的滤液，再对剩余的叶片进行二次切碎处理，即采用厚度为0.1mm的双面刀片继续切碎叶片，切碎过程持续10分钟以上，直到将全部的叶片切成糊状，再用细胞核提取液冲洗，过滤，收集含有细胞核的提取液，将两次收集的提取液合并后，加入10微升RNA酶A(浓度为1mg/mL)，混合均匀后在4℃的条件下放置10分钟以上，再向提取液中加入浓度为1mg/mL的碘化丙锭溶液至体系中碘化丙锭的最终浓度为0.22mg/mL，在避光条件下对细胞核DNA进行染色30分钟，染色完成后，进行流式细胞术分析。优选上述所述流式细胞术分析采用Attune声波聚焦流式细胞分析仪，且所述Attune声波聚焦流式细胞分析仪的参数设置为：相应参数电压值mV(毫伏)FSC2300BL11500SSC2600BL21900LB31400VL11200VL22000VL32400上述流式细胞术分析的具体的分析结果与实施例1中的相应结果一致。实施例4本实施例为加拿大一枝黄花的倍性测定，本实施例中所用的细胞核提取液的组分为：Tris：15mM；Na2EDTA：2mM；盐酸精胺：0.25mM；KCl：80mM,NaCl：20mM；β-巯基乙醇：15mM；TritonX-100：0.5％(vol/vol)；pH值为7.0，pH值可以采用1mM的NaOH溶液调节，所述的细胞核提取液预先保存于-20℃的冰箱中备用；将加拿大一枝黄花成熟叶片(经过压干的标本叶片)48mg放入预冷过的塑料培养皿中，再加入预冷的细胞核提取液1mL中，然后采用厚度为0.3mm的双面刀片切碎叶片，切碎过程持续10分钟以上，先用30微米尼龙膜过滤，收集含有细胞核的滤液，再对剩余的叶片进行二次切碎处理，即采用厚度为0.3mm的双面刀片继续切碎叶片，切碎过程持续10分钟以上，直到将全部的叶片切成糊状，再用细胞核提取液冲洗，过滤，收集含有细胞核的提取液，将两次收集的提取液合并后，加入10微升RNA酶A(浓度为1mg/mL)，混合均匀后在4℃的条件下放置10分钟以上，再向提取液中加入浓度为1mg/mL的碘化丙锭溶液至体系中碘化丙锭的最终浓度为0.18mg/mL，在避光条件下对细胞核DNA进行染色30分钟，染色完成后，进行流式细胞术分析，，优选所述流式细胞术分析采用Attune声波聚焦流式细胞分析仪，且所述Attune声波聚焦流式细胞分析仪的参数设置为：相应参数电压值mV(毫伏)FSC2400BL11800SSC2500BL21800LB31300VL11300VL21900VL32100上述流式细胞术分析的具体的分析结果与实施例1中的相应结果一致。实施例5本实施例为黄莺的倍性测定，本实施例中所用的细胞核提取液的组分为：Tris：15mM；Na2EDTA：2mM；盐酸精胺：0.2mM；KCl：70mM,NaCl：20mM；β-巯基乙醇：10mM；TritonX-100：0.4％(vol/vol)；pH值为7.0，pH值可以采用1mM的NaOH溶液调节，所述的细胞核提取液预先保存于-20℃的冰箱中备用；将黄莺成熟叶片(经过自然风干的叶片)48mg放入预冷过的塑料培养皿中，再加入预冷的细胞核提取液1mL中，然后采用厚度为0.2mm的双面刀片切碎叶片，切碎过程持续10分钟以上，先用30微米尼龙膜过滤，收集含有细胞核的滤液，再对剩余的叶片进行二次切碎处理，即采用厚度为0.2mm的双面刀片继续切碎叶片，切碎过程持续10分钟以上，直到将全部的叶片切成糊状，再用细胞核提取液冲洗，过滤，收集含有细胞核的提取液，将两次收集的提取液合并后，加入10微升RNA酶A(浓度为1mg/mL)，混合均匀后在4℃的条件下放置10分钟以上，再向提取液中加入浓度为1mg/mL的碘化丙锭溶液至体系中碘化丙锭的最终浓度为0.20mg/mL，在避光条件下对细胞核DNA进行染色30分钟，染色完成后，进行流式细胞术分析，优选所述流式细胞术分析采用Attune声波聚焦流式细胞分析仪，且所述Attune声波聚焦流式细胞分析仪的参数设置为：相应参数电压值mV(毫伏)FSC2350BL11700SSC2560BL21840LB31360VL11250VL21950VL32300流式细胞术分析的具体的分析结果与实施例2中的相应分析结果相一致。实施例6本实施例为野生草莓倍性的测定，所述野生草莓采自西藏藏族自治区林芝县，本实施例中所用的细胞核提取液的组分为：Tris：15mM；Na2EDTA：2mM；盐酸精胺：0.2mM；KCl：70mM,NaCl：20mM；β-巯基乙醇：10mM；TritonX-100：0.4％(vol/vol)；pH值为7.0，pH值可以采用1mM的NaOH溶液调节，所述的细胞核提取液预先保存于-20℃的冰箱中备用；将野生草莓成熟叶片(经过自然风干的叶片)50mg放入预冷过的塑料培养皿中，再加入预冷的细胞核提取液1mL中，然后采用厚度为0.3mm的双面刀片切碎叶片，切碎过程持续10分钟以上，先用30微米尼龙膜过滤，收集含有细胞核的滤液，再对剩余的叶片进行二次切碎处理，即采用厚度为0.2mm的双面刀片继续切碎叶片，切碎过程持续10分钟以上，直到将全部的叶片切成糊状，再用细胞核提取液冲洗，过滤，收集含有细胞核的提取液，将两次收集的提取液合并后，加入10微升RNA酶A(浓度为1mg/mL)，混合均匀后在4℃的条件下放置10分钟以上，再向提取液中加入浓度为1mg/mL的碘化丙锭溶液至体系中碘化丙锭的最终浓度为0.22mg/mL，在避光条件下对细胞核DNA进行染色30分钟，染色完成后，进行流式细胞术分析，优选所述流式细胞术分析采用Attune声波聚焦流式细胞分析仪，且所述Attune声波聚焦流式细胞分析仪的参数设置为：相应参数电压值mV(毫伏)FSC2350BL11700SSC2540BL21850LB31340VL11250VL21950VL32250具体的分析结果如下图3所示，野生草莓的干燥叶片样品主要显示出两个峰，最高峰的荧光值为282600，其CV值4.67％，经计算，野生草莓为2倍体，与文献报道相同。实施例6本实施例为栽培草莓(红颜草莓)倍性的测定，具体的方法风实施例1一致，这里不再赘述。具体的分析结果如下图4所示，栽培草莓的干燥叶片样品的荧光值为918891，其CV值2.71％，经计算，栽培草莓为8倍体，与文献报道相同。实施例7本实施例是为了验证本发明的方法普遍适用于植物的各类干燥组织测定，本实施例以栽培草莓(红颜草莓)的不同组织进行测定，具体的处理方法同实施例1一致，区别在于选用栽培草莓的各类干燥组织作为测试样品，具体的测试结果如下所示。如图5所示，是选用栽培草莓干燥叶片样品，其流式细胞分析结果显示其荧光值为954729，CV值为2.17％。如图6所示，是选用栽培草莓干燥叶柄样品，其流式细胞分析结果显示其荧光值为892773，CV值为2.60％。如图7所示，是选用栽培草莓干燥匍匐茎样品，其流式细胞分析结果显示其荧光值为872748，CV值为3.03％。如图8所示，是选用栽培草莓干燥根尖样品，其流式细胞分析结果显示其荧光值为882152，CV值为1.84％。实施例8本实施例是为了验证本发明的方法普遍适用于各类植物干燥组织测定，具体的处理方法同实施例1一致，区别在于选用栽培草莓的各类干燥组织作为测试样品，具体的测试结果如下所示。如图9所示，是选用三叶草的干燥叶片(经过硅胶干燥的叶片)样品，其流式细胞分析结果显示其荧光值为1009494，CV值为3.30％。如图10所示，是选用水杨梅的干燥叶片(经过硅胶干燥的叶片)样品，其流式细胞分析结果显示其荧光值为410217，CV值为3.94％。如图11所示，是选用喜旱莲子草的干燥叶片(经过硅胶干燥的叶片)样品，其流式细胞分析结果显示其荧光值为1622145，CV值为4.74％。如图12所示，是选用小飞蓬的干燥叶片(经过硅胶干燥的叶片)样品，其流式细胞分析结果显示其荧光值为307825，CV值为3.61％。如图13所示，是选用龙葵的干燥叶片(经过硅胶干燥的叶片)样品，其流式细胞分析结果显示其荧光值为959260，CV值为4.79％。如图14所示，是选用桔子的干燥叶片(经过硅胶干燥的叶片)样品，其流式细胞分析结果显示其荧光值为375486，CV值为4.46％。如图15所示，是选用大豆的干燥叶片(经过硅胶干燥的叶片)样品，其流式细胞分析结果显示其荧光值为1186217，CV值为3.97％。如图16所示，是选用红花檵木的干燥叶片(经过硅胶干燥的叶片)样品，其流式细胞分析结果显示其荧光值为1385057，CV值为4.67％。如图17所示，是选用构树的干燥叶片(经过硅胶干燥的叶片)样品，其流式细胞分析结果显示其荧光值为360781，CV值为4.29％。如图18所示，是选用三叶鬼针草的干燥叶片(经过硅胶干燥的叶片)样品，其流式细胞分析结果显示其荧光值为1074118，CV值为3.02％。本发明中所描述的具体实施例仅是对本发明精神作举例说明。本发明所属
技术领域：
的技术人员可以对所描述的具体实施例做各种各样的修改或补充或采用类似的方式替代，但并不会偏离本发明的精神或者超越所附权利要求书所定义的范围。尽管对本发明已作出了详细的说明并引证了一些具体实施例，但是对本领域熟练技术人员来说，只要不离开本发明的精神和范围可作各种变化或修正是显然的。当前第1页1 2 3