技术领域本发明涉及临床体外检测试剂技术领域,特别涉及一种无机磷比色法检测试剂盒。
背景技术：
人体内含磷17mol(530g)，其中87％存在骨骼中，其余在软组织中和细胞内。体内许多重要的物质如某些蛋白质、脂类化合物、核酸、辅酶等都含有磷；在酸碱平衡中，磷酸盐亦具有重要的作用。增高:见于甲状旁腺功能减退、慢性肾病、维生素D过多症、多发性骨髓瘤、淋巴瘤、白血病、骨折愈合期等。使用雄激素、合成类激素及某些利尿药物时，血磷也会增高。减低:见于甲状旁腺功能亢进、维生素D缺乏、软骨病、严重糖尿病、磷吸收不良等。正常妊娠时亦可轻度减低。服用含铝抗酸药物、合成雌激素、避孕药及苯巴比妥等药物时，血磷也会减低。磷钼酸法是测定无机磷(InorganicPhosphorus,IP)的主要方法，但该法存在稳定性差和灵敏度低的缺陷。该试剂盒通过更换还原剂对甲基氨基苯酚和添加蛋白助溶剂TritonX-100弥补了该方法的上述缺陷，使其更适用于自动生化分析仪。
技术实现要素：
针对于现有技术存在的问题,本发明提供了一种无机磷比色法检测试剂盒,该试剂盒与常规的试剂盒相比,稳定性和线性范围比常规的检测试剂盒要好,分析灵敏度高,有利于试剂在临床上的推广应用。本发明是通过以下措施实现的：一种无机磷比色法检测试剂盒,其特征在于,它包含试剂R,其中试剂R组成为：0.28mmol/L钼酸铵、1.7mmol/L对甲基氨基苯酚硫酸盐、30ml/LTritonX-100、7.7mmol/L叠氮钠。所述试剂R在使用时和血清的比例300：3。本发明的试剂盒在自动生化分析仪日立7180上进行,其具体使用方法如图4。加入生理盐水、样本或校准品3μl,之后再加入R试剂300μl孵育5min后,以空白管校正吸光度为零,记录吸光度值A。本发明的有益效果：本发明提供的无机磷比色法检测试剂盒,通过更换试剂R中的还原剂1.7mmol/L对甲基氨基苯酚硫酸盐，增加了试剂的稳定性；通过添加30ml/LTritonX-100，降低了血清中的蛋白对实验准确度的影响。附图说明图1实施例2准确度验证实验检测结果与对照组检测结果相关性；图2实施例3准确度验证实验检测结果与对照组检测结果相关性；图3实施例4准确度验证实验检测结果与对照组检测结果相关性；图4本发明的试剂盒在自动生化分析仪日立7180上进行的具体使用方法。具体实施方式为了更好的理解本发明,下面结合具体实施例来进一步详细说明。实施例1一种无机磷比色法检测试剂盒,它包括试剂R。其中试剂R组成为：钼酸铵0.28mmol/L硫酸130mmol/L叠氮钠7.7mmol/L本实施例描述的试剂盒,在使用时,其测定方法是采用日立7180自动分析仪,操作如下：加入生理盐水、样本或校准品3μl,之后再加入R试剂300μl孵育5min后,以空白管校正吸光度为零,记录吸光度值A。实施例2一种无机磷比色法检测试剂盒,它包括试剂R。其中试剂R组成为：本实施例描述的试剂盒,在使用时,其测定方法是采用日立7180自动分析仪,操作如下：加入生理盐水、样本或校准品3μl,之后再加入R试剂300μl孵育5min后,以空白管校正吸光度为零,记录吸光度值A。具体测定方法同实施例1。实施例3一种无机磷比色法检测试剂盒,它包括试剂R。其中试剂R组成为：本实施例描述的试剂盒,在使用时,其测定方法是采用日立7180自动分析仪,操作如下：加入生理盐水、样本或校准品3μl,之后再加入R试剂300μl孵育5min后,以空白管校正吸光度为零,记录吸光度值A。具体测定方法同实施例1。实施例4一种无机磷比色法检测试剂盒,它包括试剂R。其中试剂R组成为：本实施例描述的试剂盒,在使用时,其测定方法是采用日立7180自动分析仪,操作如下：加入生理盐水、样本或校准品3μl,之后再加入R试剂300μl孵育5min后,以空白管校正吸光度为零,记录吸光度值A。具体测定方法同实施例1。对上述实施例1-4中制得的试剂盒分析性能进行实验验证。准确度验证实验：将实施例2、3、4的试剂盒作为实验组,市场上获得认可的一种准确度优异的无机磷比色法检测试剂盒(深圳某公司生产)作为对照组进行对比实验,对40个样本进行检测,检测的结果如图1-图3。通过图1-图3的检测数据可知,实施例2、3、4检测试剂盒与对照检测试剂盒的检测结果相关性分别为0.99、0.9967、0.9998,相关性比较好,表明本发明的试剂盒与市场上获得认可的具有优异准确度的无机磷比色法检测试剂盒有高度一致性,证明本发明试剂盒添加的其他各种成分对其准确性不会造成影响,试剂盒依然保持较好的准确度。线性相关性验证实验：找到无机磷高值样本为4.0mmol/L,用生理盐水进行系列稀释,配制6个不同浓度的样本,依次为4.0mmol/L、3.2mmol/L、2.4mmol/L、1.6mmol/L、0.8mmol/L、0mmol/L浓度的样本,每个浓度水平各样本分别测定三次,分别取其平均值。分别利用实施例1、2、3、4的试剂进行检测。检测结果如表1所示。表1实施例1-4线性相关验证实验检测结果上述检测结果显示,实施例1-4检测结果相关性均大于0.990,但实施例2、3、4的检测结果大于0.998,与实施例1相比具有更好的线性相关性,这说明本发明试剂具有更好的线性相关性。稳定性验证实验：在2℃-8℃、无腐蚀性气体的避光环境中贮存试剂,检测四种实施例试剂的稳定性。四种试剂每月选取同一样本测定其吸光度三次,取平均值,与新鲜的实施例1试剂检测结果进行对比,从而确定试剂的稳定时间。检测数据如表2。表2稳定性验证实验检测结果实验结果显示,实施例1试剂在2℃-8℃、无腐蚀性气体的避光环境中贮存15个月稳定,而实施例2、3、4试剂在2℃-8℃、无腐蚀性气体的避光环境中贮存24个月稳定,说明在试剂中Triton×100和还原剂对甲基氨基苯酚硫酸盐二者共同作用有效的提高了无机磷比色法检测试剂盒的稳定性。分析灵敏度验证实验：用本发明无机磷比色法检测试剂盒测试已知浓度在3.5mmol/L的样本,记录吸光度差值。分别利用实施例1、2、3、4的试剂进行检测。检测结果如表3所示。表3分析灵敏度实验结果通过检测数据可知,实施例2、3、4检测试剂盒的吸光度差值均比实施例1的高,说明在试剂中更换还原剂1.7mmol/L对甲基氨基苯酚硫酸盐和30ml/LTritonX-100能增强试剂的分析灵敏度。综合以上分析,本发明提供的无机磷比色法检测试剂盒,在试剂R中通过加入一定量的对甲基氨基苯酚硫酸盐和TritonX-100能够有效的提高试剂盒的稳定性和分析灵敏度,线性范围较好,试剂的准确度也较好。因此,本发明提供的无机磷比色法检测试剂盒有利于在市场中进一步的推广使用。