一种采用色谱法鉴定广西容县沙田柚的方法与流程

文档序号:12268172阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种采用色谱法鉴定广西容县沙田柚的方法,其特征在于,首先采用乙腈对沙田柚外表皮、内表皮、内果皮、果肉及种子等各部位中的有机物进行提取,然后同时采用气相色谱仪、氢火焰离子检测器和液相色谱-紫外检测器进行检测,对广西容县沙田柚各部位中有机物进行色谱定性分析,准确地检测出广西容县沙田柚中的蛇床子素、柠檬烯、α-亚油酸、棕榈酸、谷甾醇、油酸酰胺和诺卡酮特异性物质,成功建立沙田柚特异性物质色谱指纹图谱:

1)采用气相色谱仪、氢火焰离子检测器鉴定广西容县沙田柚的方法,具体操作步骤如下:

1.1)气相色谱仪的色谱柱初始温度为室温,升温速率10℃/min升至温度50~280℃,为满足试样中所有成分的峰完全分离,结合各物质沸点,确定气相色谱最优分析条件如下:

气相色谱分析仪分析条件

色谱柱:30m×0.25mm DB-17色谱柱;载气:N2;载气流速:1mL/min;色谱柱温度:120℃;进样量:1μL;气化室温度:260℃;检测器温度:280℃;检测器为FID检测器;

1.2)外标物溶液的配制:根据外标物的质量分数,分别称取不同质量的蛇床子素、α-亚油酸、棕榈酸和诺卡酮,分别用乙腈加入到10mL的容量瓶中,用乙腈定容至刻度,配成浓度为1000mg/L外标物溶液,并配成浓度为100mg/L的蛇床子素、α-亚油酸、棕榈酸和诺卡酮的混合标准外标溶液;

1.3)检测样品的制备:准确称取5g样品(鲜重)于100mL离心管中,加入25mL乙腈,涡旋2min,超声30min,4500r/min离心3min,抽取上清液1.5mL,经0.22μm微膜过滤,待测样品的蛇床子素、α-亚油酸、棕榈酸和诺卡酮;

2)采用液相色谱-紫外检测器鉴定广西容县沙田柚的方法,具体操作步骤如下:

2.1)液相色谱仪以254nm为紫外吸收波长,梯度洗脱,为满足试样中所有成分的峰完全分离,结合各物质极性,确定液相色谱最优分析条件如下:

液相色谱分析仪分析条件

色谱柱:Zorbax Eclipse XDB C18 250mm×4.6mm×5μm色谱柱;流动相:A为水相,B为乙腈;洗脱流速:1mL/min;色谱柱温度:30℃;进样量:10μL;梯度洗脱程序:水A%:乙腈B%为70:30,洗脱0~15min、水A%:乙腈B%为40:60,洗脱15~20min、水A%:乙腈B%为40:60,洗脱20~40min、水A%:乙腈B%为20:80,洗脱40~45min、水A%:乙腈B%为20:80,洗脱45~65min、水A%:乙腈B%为70:30,洗脱65~70min;检测器为紫外检测器;

2.2)外标物溶液的配制:根据外标物的质量分数,分别称取不同质量的柠檬烯、谷甾醇和油酸酰胺,分别用乙腈溶解加入到10mL的容量瓶中,用乙腈定容至刻度,配成浓度为1000mg/L外标物溶液,并配成浓度为100mg/L的蛇床子素、α-亚油酸、棕榈酸和诺卡酮的混合标准外标溶液;

2.3)检测样品的制备:准确称取5g样品(鲜重)于100mL离心管中,加入25mL乙腈,涡旋2min,超声30min,4500r/min离心3min,抽取上清液1.5mL,经0.22μm微膜过滤,待测样品的蛇床子素、α-亚油酸、棕榈酸和诺卡酮。

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