一种测量辣椒风湿贴中辣椒碱含量的方法与流程

本发明涉及一种辣椒碱含量的快速检测方法，特别涉及一种测量辣椒风湿贴中辣椒碱含量的方法。

背景技术：

辣椒性热味辛,具有驱邪逐寒、温中开胃、消食杀虫等功效。辣椒中的辣椒碱,吸收后转变成一种特殊的化合物,能抑制痛感神经纤维,在临床上被长期作为理想的镇痛药物使用。以辣椒碱为主要原料制成的中药橡胶膏剂辣椒风湿膏,在治疗关节疼痛、腰酸背痛、扭伤淤肿及慢性关节炎等方面的临床效果显著。但部颁标准(中药成方制剂)第9册的辣椒风湿膏标准中仅收载了性状、理化鉴别和一般检查项作为质量控制指标,难以全面评价其质量。辣椒为辣椒风湿膏的君药,控制其主要有效成分辣椒碱的含量有着重要意义。

目前关于辣椒风湿贴中痕量辣椒素的检测，没有国家标准方法，没有标准物质，检测结果的准确性无法保障。

技术实现要素：

为解决上述问题，本发明提供一种测量辣椒风湿贴中辣椒碱含量的方法，该方法可以很简单及准确的对辣椒风湿贴中的辣椒碱进行定性和定量检测。

为实现上述目的，本发明采用以下技术手段：

本发明提供一种测量辣椒风湿贴中辣椒碱含量的方法，包括以下步骤：

(1)取1ml丙酮，配置不同浓度的辣椒碱溶液分别为1mg/l、5mg/l、10mg/l、25mg/l、30mg/l、50mg/l；

(2)将(1)中配置好的辣椒碱溶液取2ul用移液枪滴加于银纳米棒阵列基底上；

(3)进行sers检测，待基底上的溶液变干后，用拉曼光谱仪进行检测，测得检测液的sers光谱；

(4)测完一个浓度之后，继续测另一个浓度；

(5)将测得的数据通过拟合软件对辣椒碱特征峰1264cm-1的变化定量分析，确定出辣椒碱的检出限以及分子光谱强度与浓度之间的关系。

(6)取辣椒风湿贴，除去盖衬，用剪刀剪成碎屑；

(7)将(6)中的辣椒风湿贴碎屑置于离心管中，加入2ml甲醇；

(8)将(7)中样品超声处理10min；

(9)将步骤(8)中超声处理的混合液在10000r/min的转速下离心10分钟，静置10min；

(10)取步骤(9)中得的上清液2ul，滴加到银纳米棒阵列基底上，使溶液浓缩干燥；

(11)将步骤(10)中得到的检测液进行表面增强拉曼散射检测，测得检测液的sers光谱；

(12)进行定性检测，根据步骤中得到的检测液的sers光谱，1264cm-1对应拉曼谱峰为辣椒碱的特征峰；

(13)进行定量检测，根据步骤(11)中得到的检测液的sers光谱，以1264cm-1应峰强度进行拟合定量表示辣椒碱含量

进一步的，进行sers光谱检测时，使用proraman-l-785a2型拉曼光谱仪。

进一步的，步骤(2)和(10)中所述的银纳米棒阵列基底为倾斜排列的银纳米棒阵列基底。

进一步的，所述银纳米棒阵列基底的银纳米棒相对于玻璃片法线方向的倾斜角74.2±1.1度，长度约1030.7±53.4nm，直径约66.8±5.2nm。

进一步的，步骤(6)和(11)中进行sers光谱检测时，设置激光功率为30mw，积分时间为10s。

本发明的有益效果：

该方法采用sers光谱检测技术，对辣椒风湿贴中的辣椒碱进行定性和定量分析，可以快速判断被检测辣椒风湿贴中辣椒碱的含量，而且采用倾斜排列的银纳米棒阵列基底，使得该检测方法的灵敏度更高、更稳定，大大减少了外界温度、样品本身对检测定性及定量的影响，使检测更便捷，并且单次测量成本较低，极大节省了成本。

附图说明

图1为纯辣椒碱的分子结构图；

图2为实施例1中的辣椒碱对照实验的拉曼光谱示意图；

图3为辣椒碱对照实验的拉曼位移1264cm^-1工作曲线；

图4为辣椒风湿贴萃取液的光谱图。

具体实施方式

下面结合附图及具体实施例对本发明做进一步说明。

实施例1：如图1所示为纯辣椒碱的分子结构图，本实施例提供本发明提供一种测量辣椒风湿贴中辣椒碱含量的方法，包括以下步骤：

(1)取1ml丙酮，配置不同浓度的辣椒碱溶液分别为1mg/l、5mg/l、10mg/l、25mg/l、30mg/l、50mg/l，制作不同浓度的混合液有利于更好的测试本方法对辣椒碱含量的检测的准确性，避免单一浓度测试结果的偶然性；

(2)将(1)中配置好的辣椒碱溶液取2ul用移液枪滴加于银纳米棒阵列基底上，使溶液浓缩干燥，为光谱检测做准备，提高光谱检测的灵敏度与稳定性；

(3)进行sers检测，所用拉曼光谱仪为proraman-l-785a2,enwaveoptronics,irvine,ca，待基底上的溶液变干后，设置激光功率为30mw，积分时间为10s，测得检测液的sers光谱，可以使检测的效果更好；

(4)测完一个浓度之后，继续测另一个浓度如图2所示，通过分析可知在1264cm^-1处出现一特征峰定性为辣椒碱特征峰；

(5)将测得的数据通过拟合软件对辣椒碱特征峰1264cm^-1的变化定量分析如图3所示，确定出辣椒碱的检出限以及分子光谱强度与浓度之间的关系，浓度越大，1264cm^-1对应的特征峰光谱强度越强。

(6)取辣椒风湿贴，除去盖衬，用剪刀剪成碎屑；

(7)将(6)中的辣椒风湿贴碎屑置于离心管中，加入2ml甲醇，用于溶解辣椒风湿贴；

(8)将(7)中样品超声处理10min，将辣椒风湿贴充分溶解；

(9)将步骤(8)中超声处理的混合液在10000r/min的转速下离心10分钟，静置10min，可以更快的将溶液分层，得到辣椒碱的上清液；

(10)取步骤(9)中得的上清液2ul，滴加到银纳米棒阵列基底上，使溶液浓缩干燥，为光谱检测做准备，提高光谱检测的灵敏度与稳定性；

(11)将步骤(10)中得到的检测液进行表面增强拉曼散射检测，设置激光功率为30mw，积分时间为10s，测得检测液的sers光谱，可以使检测的效果更好；

(12)进行定性检测，根据步骤中得到的检测液的sers光谱如图4所示，1264cm^-1对应拉曼谱峰为辣椒碱的特征峰；

(13)进行定量检测，根据步骤(11)中得到的检测液的sers光谱，以1264cm^-1应峰强度进行拟合定量表示辣椒碱含量。

进一步的，步骤(2)和(10)中所述的银纳米棒阵列基底为倾斜排列的银纳米棒阵列基底，可以使检测更灵敏、更稳定。

进一步的，所述银纳米棒阵列基底的银纳米棒相对于玻璃片法线方向的倾斜角74.2±1.1度，长度约1030.7±53.4nm，直径约66.8±5.2nm，可以使溶液浓缩效果更好，光谱检测效果更好。

技术特征：

技术总结
本发明公开了一种测量辣椒风湿贴中辣椒碱含量的方法，该方法采用SERS光谱检测技术，对辣椒风湿贴中的辣椒碱进行定性和定量分析，可以快速判断被检测辣椒风湿贴中辣椒碱的含量，而且采用倾斜排列的银纳米棒阵列基底，使得该检测方法的灵敏度更高、更稳定，大大减少了外界温度、样品本身对检测定性及定量的影响，使检测更便捷，并且单次测量成本较低，极大节省了成本。

技术研发人员：田康振;韩彩芹;聂新明
受保护的技术使用者：江苏师范大学
技术研发日：2017.05.31
技术公布日：2017.10.03