快速制备微生物和生化实验缓冲液的预制试粉及其使用方法与流程

文档序号:15972046发布日期:2018-11-16 23:32阅读:440来源:国知局

本发明属于生物学分析领域,提供快速制备微生物和生化实验缓冲液的预制试粉及其使用方法,用于缓冲液快速制备的预制试粉。

背景技术

在微生物和生物化学的常规实验中,经常需要配制一定浓度和一定ph值的缓冲液,用于微生物、dna、rna、蛋白质等样品的稀释、检测和储存。常见的缓冲液,通常为一定离子强度、ph值接近中性的有机或无机盐缓冲液,如ph值在7-8之间的磷酸盐缓冲液(pbs)、三羟甲基氨基甲烷缓冲液(tris)、三羟甲基氨基甲烷-乙二胺四乙酸缓冲液(te)等。缓冲液的配制通常需要先称量不同质量的试剂药品,与一定体积的去离子水混合互溶后,调节预定ph值,再通过容量瓶定容,最后得所需缓冲液。所以,缓冲液制备过程耗时耗力,还会受到ph值调节不准等误差的影响,急需开发快速、准确、简便的缓冲液制备方法,降低缓冲液制备对实验时间的消耗和熟练技术人员的依赖,从而提高微生物和生化实验的效率、准确性和重复性。



技术实现要素:

针对现有技术存在的问题,本发明提供了几种快速制备微生物和生物化学实验缓冲液的预制试粉。一种快速制备微生物和生化实验缓冲液的预制试粉所配制的缓冲液包括磷酸盐pbs缓冲液、三羟甲基氨基甲烷tris缓冲液、te(tris-edta,三羟甲基氨基甲烷-乙二胺四乙酸)缓冲液、柠檬酸-柠檬酸钠csc缓冲液。

为了达到上述目的,本发明的技术方案如下:

一种快速制备微生物和生化实验缓冲液的预制试粉,其组成成分及重量如下:基于配制1l一倍(1×)浓度的ph为7.4的pbs缓冲液,每份预制试粉含有8.0g的nacl、0.20g的kcl、1.44g的na2hpo4、0.29g的kh2po4,试粉中各组分可以被对应的、含不同结晶水的盐所代替,但维持盐浓度不变。试粉中所有物料均完全混合,以散粉或压片形式储存。本预制试粉的使用方法如下:室温下,取一份试粉与1l去离子水充分混合互溶,无需调节ph值,得1l1×浓度的ph7.4的pbs缓冲液,且pbs缓冲液中各组分的终浓度为nacl0.1369mol/l,kcl0.0027mol/l,na2hpo40.01014mol/l和kh2po40.00213mol/l。

一种快速制备微生物和生化实验缓冲液的预制试粉,其组成成分及重量如下:基于配制1l1×浓度ph为7.0的tris缓冲液,每份预制试粉含有7.3678gtris-hcl(三羟甲基氨基甲烷盐酸盐)和0.3937gtris碱(三羟甲基氨基甲烷)。试粉中所有物料均完全混合,以散粉或压片形式储存。本预制试粉的使用方法是,取一份试粉与1l去离子水充分混合互溶,无需调节ph值,得1l1×浓度的ph7.0的tris缓冲液,且tris缓冲液中tris碱、tris-hcl和tris总的最终摩尔浓度分别为3.25mmol/l,46.75mmol/l和50mmol/l。

一种快速制备微生物和生化实验缓冲液的预制试粉,其组成成分及重量如下:基于配制1l1×浓度ph为7.4的tris缓冲液,每份预制试粉含有6.6980gtris-hcl和0.9086gtris碱。试粉中所有物料均完全混合,以散粉或压片形式储存。本预制试粉的使用方法是,取一份试粉与1l去离子水充分混合互溶,无需调节ph值,得1l1×浓度的ph7.4的tris缓冲液,且tris缓冲液中tris碱,tris-hcl和tris总的最终摩尔浓度分别为7.50mmol/l,42.50mmol/l和50mmol/l。

一种快速制备微生物和生化实验缓冲液的预制试粉,其组成成分及重量如下:基于配制1l1×浓度ph为8.0的tris缓冲液,每份预制试粉含有4.7280gtris-hcl和2.4228gtris碱。试粉中所有物料均完全混合,以散粉或压片形式储存。本预制试粉的使用方法是,取一份试粉与1l去离子水充分混合互溶,无需调节ph值,得1l1×浓度的ph8.0的tris缓冲液,且tris缓冲液中tris碱,tris-hcl和tris总的最终摩尔浓度分别为20.0mmol/l,30.0mmol/l和50mmol/l。

一种快速制备微生物和生化实验缓冲液的预制试粉,其组成成分及重量如下:基于配制1l1×浓度ph为7.0的te缓冲液,每份预制试粉含有,1.3396gtris-hcl、0.1815gtris碱、0.3362gna2edta(乙二胺四乙酸二钠盐)。试粉中所有物料均完全混合,以散粉或压片形式储存。本预制试粉的使用方法是,取一份试粉与1l去离子水充分混合互溶,无需调节ph值,得1l1×浓度的ph7.0的te缓冲液,且tris碱,tris-hcl,tris总和na2edta的最终摩尔浓度分别为1.5mmol/l,8.5mmol/l,10mmol/l和1mmol/l。

一种快速制备微生物和生化实验缓冲液的预制试粉,其组成成分及重量如下:基于配制1l1×浓度ph为7.4的te缓冲液,每份预制试粉含有1.1899gtris-hcl、0.2968gtris碱、0.3362gna2edta。试粉中所有物料均完全混合,以散粉或压片形式储存。本预制试粉的使用方法是,取一份试粉与1l去离子水充分混合互溶,无需调节ph值,得1l1×浓度的ph7.4的te缓冲液,且tris碱,tris-hcl,tris总和na2edta的最终摩尔浓度分别为2.45mmol/l,7.55mmol/l,10mmol/l和1mmol/l。

一种快速制备微生物和生化实验缓冲液的预制试粉,其组成成分及重量如下:基于配制1l1×浓度的ph为8.0的te缓冲液,每份预制试粉含有0.7486gtris-hcl、0.6360gtris碱、0.3362gna2edta。试粉中所有物料均完全混合,以散粉或压片形式储存。本预制试粉的使用方法是,取一份试粉与1l去离子水充分混合互溶,无需调节ph值,得1l1×浓度的ph8.0的te缓冲液,且tris碱,tris-hcl,tris总和na2edta的最终摩尔浓度分别为5.25mmol/l,4.75mmol/l,10mmol/l和1mmol/l。

一种快速制备微生物和生化实验缓冲液的预制试粉,其组成成分及重量如下:基于配制1l1×浓度ph4.8的csc缓冲液,每份预制试粉含有4.8332g柠檬酸(c6h8o7·h2o)和7.9412g柠檬酸钠(na3c6h5o7·2h2o)。试粉中所有物料均完全混合,以散粉或压片形式储存。试粉中各组分可以被对应的含不同结晶水的盐所代替,但维持盐浓度不变。本预制试粉的使用方法是,取一份试粉与1l去离子水充分混合互溶,无需调节ph值,得1l1×浓度的ph4.8的csc缓冲液,且柠檬酸,柠檬酸钠和柠檬酸根的最终摩尔浓度分别为23mmol/l,27mmol/l和50mmol/l。

所述的预制试粉,各组成成分重量可在±1%的范围内波动,不影响所配制缓冲液的ph值。

所述的预制试粉,可进行放大或缩小规模的制备,以1l1×浓度缓冲液试粉中各组分质量份数为基准,根据目标缓冲液体积和浓度的乘积,计算得到基准中各组分质量的放大或缩小倍数,称量各组分且均匀混合后,以散粉或压片形式储存。举例如下:如配备1l10×浓度缓冲液试粉,则将基准中各组分质量放大至10倍,如配备5l0.5×浓度缓冲液试粉,则将基准中各组分质量放大至2.5倍。

所述的预制试粉还可以整体制备,按照所述组分的质量比例,称量且均匀混合各组分并储存。在配制电泳缓冲液时,根据待配缓冲液的浓度和体积的乘积,先计算所需预制试粉质量,再称量预制试粉,最后与待配缓冲液体积的去离子水充分混合,制得缓冲液。

本发明的有益效果为:预制试粉通过与一定体积的去离子水混合互溶,无需称量、无需ph值调节步骤,可快速准确的制备设定浓度、设定ph值的实验缓冲液,且预制试粉以固体形式储存和运输,保存时间长,运输和保存成本低。本发明使用方法简便快速,使得缓冲液的制备过程可在5-10分钟内完成,显著提高微生物和生化实验中缓冲液制备的效率和重复性。

具体实施方式

以下结合具体实施例对本发明做进一步说明。

实施例1

基于配制1l1×浓度的ph7.4的pbs缓冲液,制备三份平行的预制试粉,每份预制试粉含有8.0g的nacl、0.20g的kcl、1.44g的na2hpo4、0.29g的kh2po4。将三份平行预制试粉分别与1l去离子水充分混合,得1×浓度的ph7.4的pbs缓冲液,实测ph值分别为:7.38、7.39和7.40。

实施例2

基于配制1l1×浓度的ph7.0的tris缓冲液,制备三份平行的预制试粉,每份预制试粉含有7.3678gtris-hcl和0.3937gtris碱。将三份平行预制试粉分别与1l去离子水充分混合,得到1×浓度ph7.0的tris缓冲液,实测ph值分别为:6.97、7.01和6.99。

实施例3

基于配制1l1×浓度的ph7.4的tris缓冲液,制备三份平行的预制试粉,每份预制试粉含有6.6980gtris-hcl和0.9086gtris碱。将三份平行预制试粉分别与1l去离子水充分混合,得到1×浓度的ph7.4的tris缓冲液,实测ph值分别为:7.40、7.41和7.42。

实施例4

基于配制1l1×浓度的ph8.0的tris缓冲液,制备三份平行的预制试粉,每份预制试粉含有4.7280gtris-hcl和2.4228gtris碱。将三份平行预制试粉分别与1l去离子水充分混合,得到1×浓度的ph8.0的tris缓冲液,实测ph值分别为:7.98、7.99和8.00。

实施例5

基于配制1l1×浓度的ph7.0的te缓冲液,制备三份平行的预制试粉,每份预制试粉含有1.3396gtris-hcl、0.1815gtris碱、0.3362gna2edta。将三份平行预制试粉分别与1l去离子水充分混合,得到1×浓度的ph7.0的te缓冲液,实测ph值分别为:6.97、7.00和6.99。

实施例6

基于配制1l1×浓度的ph7.4的te缓冲液,制备三份平行的预制试粉,每份预制试粉含有1.1899gtris-hcl、0.2968gtris碱、0.3362gna2edta。将三份平行预制试粉分别与1l去离子水充分混合,得到1×浓度的ph7.4的te缓冲液,实测ph值分别为:7.41、7.39和7.42。

实施例7

基于配制1l1×浓度的ph8.0的te缓冲液,制备三份平行的预制试粉,每份预制试粉含有0.7486gtris-hcl、0.6360gtris碱、0.3362gna2edta。将三份平行预制试粉分别与1l去离子水充分混合,得到1×浓度的ph8.0的te缓冲液,实测ph值分别为:7.97、8.01和7.99。

实施例8

基于配制1l1×浓度的ph4.8的csc缓冲液,制备三份平行的预制试粉,每份预制试粉含有4.8332g柠檬酸和7.9412g柠檬酸钠。将三份平行预制试粉分别与1l去离子水充分混合,得到1×浓度的ph4.8的柠檬酸缓冲液,实测ph值分别为:4.81、4.82和4.39。

以上所述实施例仅表达了本发明的实施方式,但并不能因此而理解为对本发明专利的范围的限制,应当指出,对于本领域的技术人员来说,在不脱离本发明构思的前提下,还可以做出若干变形和改进,这些均属于本发明的保护范围。

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