本发明属于医药辅助仪器技术领域，主要涉及一种拭子及其制备方法和应用。
背景技术：
在当今社会女性的生活节奏越来越快，各种工作和生活的压力造成患妇科病的女性越来越多。细菌性阴道病，是妇女阴道中菌群失调所致，也是妇产科常见疾病之一，患有细菌性阴道病的妇女，白带增多常伴有异臭，这种患者容易发生宫体炎、附件炎、盆腔炎、宫外孕、不孕不育等疾病，会降低生活质量，极大的干扰女性身心健康。具临床证明：女性在弱酸性环境，阴道内ph值约为3.8-4.5，有利于杀灭进入阴道的各种致病菌和条件致病菌。ph＜4.5但当阴道局部微环境发生变化时，微生物菌群生长繁殖而发生阴道炎，常见的有滴虫性阴道炎、念珠菌性阴道炎和细菌性阴道炎。滴虫在正常的阴道环境中是不利于生长的，在ph5.6～6.0环境中生长繁殖最为活跃。因此，当阴道ph＞4.5值上升时，滴虫才能迅速繁殖生长引起阴道炎。念珠菌是人体正常菌群之一，广泛存在于人体皮肤、口腔、生殖器黏膜上。约10％的健康妇女和30％的孕妇为健康带菌者，无任何临床症状，可见在正常的生殖道环境中，念珠菌不会致病。只有当ph＞5.5左右时，生长繁殖最为活跃，并可致病。细菌性阴道炎是由于阴道内乳酸杆菌减少，加特纳菌和厌氧菌繁殖而造成的混合感染。细菌性阴道炎时，ph值可达5.0-6.8或更高。如果ph值6.8-8.1，就考虑是否有宫颈病变的可能，尽到去医疗诊断治疗。
在阴道疾病诊断方面，临床上常采用以下方法：1、涂片镜检，取分泌物作涂片，显微观察是否有致病菌；2、胺试验，在阴道分泌物样本中滴加胺试剂，若有鱼腥味释放，则说明分泌物胺含量高；3、生化法，取阴道分泌物作生化测定，正常妇女乳酸盐含量高，琥珀盐含量低，而阴道疾病患者测定值相反；4、酶学方法，利用微生物的特异性酶催化机理，结合发色底物形成酶快速检测。但以上方法均需一定检测工具或手段，检测费用高，耗时长，操作繁琐，需要专门技术人员进行操作。
cn206818620u公开了一种细菌性阴道病检测拭子棒，所述细菌性阴道病检测拭子棒包括棒体和指示端，所述指示端包括两层尼龙布层，所述两层尼龙布层上覆盖有高分子聚合物层，所述高分子聚合物层中携带有ph指示剂硝嗪黄。该实用新型的拭子棒对于细菌性阴道病检测准确度高，但包覆硝嗪黄的指示端直接进入阴道取样会引起阴道刺激，加重阴道炎症，且仅由ph酸碱度检测不能确定是否一定患有阴道炎，指示剂变质或不稳定都能产生假阳性。cn201064454y公开了一种阴道酸碱度快速取样检测拭子，该检测拭子包括取样头和取样杆配套的胺试剂，所述的取样头为椭圆状，该取样头设在取样杆的一端。与现有技术相比，该实用新型具有有利于医疗实践，有利于商品化运输，且安全可靠等特点，但该使用新型所述的取样头较小，椭圆形表面取样量少，不利于后期检测，容易产生误差，且配套的胺试剂为附加试剂，占用包装空间，且不利于运输和使用。
因此，提供一种结构简单便携，操作简单高效，结果客观稳定且准确度高，方便患者自检且成本低廉的检测拭子具有重要意义和广阔市场前景。
技术实现要素：
针对现有技术的不足及实际的需求，本发明提供一种拭子，采用双头拭子的方式将两种检测方法整合在一根拭子上，结构简单便携，解决了现有检测方法操作复杂，费用高，结果主观性强，检测液外置带来的运输不便等缺陷，应用前景广阔。
为达此目的，本发明采用以下技术方案：
第一方面，本发明提供一种拭子，所述拭子包括拭子取样头、中空拭子管3和隔离带4，所述中空拭子管两端设置有第一取样头1和第二取样头2，所述隔离带4设置在中空拭子管中部。
本发明中，采用双头拭子的方式将两种检测方法整合在一根拭子上，结构简单便携，并将传统拭子中的拭子棒用中空拭子管替代，使用热压技术将中空拭子管封闭隔离成互不相通的两部分，并在隔离带两侧的拭子管中分别灌入检测试剂，通过简单挤压的方式使检测液渗透入取样后的取样头，通过颜色变化和味道变化，客观的反应结果，精确度高，避免试剂外置带来的运输和保存不便，医生和患者均可进行操作检测，操作简单，同时，双取样头和中空拭子管的设计节约成本，市场前景好。
优选地，所述拭子取样头的材质包括医用海绵、植绒或超细纤维布中的任一种或至少两种的组合，优选为医用海绵。
优选地，所述第一取样头1的长度为10-25mm，例如可以是10mm、11mm、12mm、13mm、14mm、15mm、16mm、17mm、18mm、19mm、20mm、21mm、22mm、23mm、24mm或25mm。
优选地，所述第二取样头2的长度为10-25mm，例如可以是10mm、11mm、12mm、13mm、14mm、15mm、16mm、17mm、18mm、19mm、20mm、21mm、22mm、23mm、24mm或25mm。
本发明中，所述第一取样头1和第二取样头2的长度的选择是独立的，两个取样头的长度可以一样也可以不一样，本领域技术人员可以根据需要进行调整。
优选地，所述第一取样头1和第二取样头2为类葫芦形状，包括球形端和椭圆形端。
本发明发现，类葫芦形状使得取样头中间有内陷，相较常见的椭圆形取样头，可增加取样量，减少因与空气接触导致的样品损失，同时可在挤压检测液透入取样头的过程中起到缓冲作用，防止用力过大造成的液体喷出。
优选地，所述第一取样头1的球形端的直径为8-13mm，例如可以是8mm、9mm、10mm、11mm、12mm或13mm。
优选地，所述第二取样头2的球形端的直径为8-13mm，例如可以是8mm、9mm、10mm、11mm、12mm或13mm。
优选地，所述取样头中的椭圆形端包覆中空拭子管端点。
本发明中取样头的椭圆形端包覆中空拭子管端，此时的中空拭子管中已包含有检测液，通过调整模具形状，取样头材料热压包覆在中空拭子管外端。
优选地，所述中空拭子管3的材质为聚丙烯材料。
本发明采用聚丙烯材料进行中空拭子管的制作，该材料可塑性强，安全无毒，是制备阴道取样器的良好材质。
优选地，所述中空拭子管3的内径为3-7mm，例如可以是3mm、4mm、5mm、6mm或7mm，优选为5mm。
优选地，所述中空拭子管3的管臂厚度为0.4-1mm，例如可以是0.4mm、0.5mm、0.6mm、0.7mm、0.8mm、0.9mm或1.0mm，优选为0.5mm。
优选地，所述中空拭子管3的长度为10-18cm，例如可以是10cm、11cm、12cm、13cm、14cm、15cm、16cm、17cm或18cm，优选为14cm。
优选地，所述隔离带4的宽度为1-5mm，例如可以是1mm、2mm、3mm、4mm或5mm。
优选地，隔离带4设置于中空拭子管的中部，将中空拭子管分为相等距离的两个部分。
本发明中，中空拭子管通过热压方式压出隔离带，将中空拭子管分为完全封闭隔的两部分，且优选将两部分等距离分隔，将两种检测液分别灌入分隔带两侧的中空拭子管，节省空间和检测液用量，降低成本，同时使用方便，可随身携带。
优选地，所述中空拭子管(3)中隔离带4分隔的一侧含有ph检测液。
优选地，所述ph检测液包括甲基红、中性红、酚磺酞、溴酚蓝、百里酚蓝、溴百里香酚蓝或溴甲酚绿中的任一种或至少两种的组合，例如可以是甲基红、百里酚蓝和溴甲酚绿的组合，甲基红、酚酞黄和溴百里酚蓝的组合，甲基红和溴甲酚绿的组合，或甲基红、酚磺酞和百里酚蓝的组合，优选为甲基红、酚磺酞和百里酚蓝的组合。
本发明中所述百里酚蓝又称百里香酚蓝。
优选地，所述甲基红、酚磺酞和百里酚蓝的体积比为(2-5):(1-3):(1-3)，例如可以是2:1:1、3:2:1、4:2:3、5:1:2或5:3:3。
本发明发现，单独使用甲基红试剂，所指示的ph检测结果不稳定，通过配合酚酞黄和百里酚蓝，在本发明所述用量范围内，可得到ph指示结果稳定，溶液性质稳定的ph检测液，检测精度高。
优选地，所述中空拭子管3中隔离带4分隔的另一侧含有胺试剂。
本发明发现，组合使用ph检测和胺试剂实验方法可显著提高检测精度。同时，将胺试剂内置在中空拭子管中，可减少使用量，且检测操作简便，无需其他辅助装置或工具。
第二方面，本发明提供一种制备如第一方面所述的拭子的制备方法，包括如下步骤：
(1)将中空拭子管中部热压封闭，压出隔离带；
(2)将配置好的ph检测液灌入隔离带一侧的中空拭子管，将开口热压封闭；
(3)将配置好的胺试剂灌入隔离带另一侧的中空拭子管，将开口热压封闭；
(4)将医用海绵热压在中空拭子管的外端点。
优选地，步骤(1)所述热压的上模温度为100-120℃，例如可以是100℃、101℃、102℃、103℃、104℃、105℃、107℃、108℃、110℃、112℃、115℃、116℃、118℃或120℃。
优选地，所述热压的下模温度为100-120℃，例如可以是100℃、101℃、102℃、103℃、104℃、105℃、107℃、108℃、110℃、112℃、115℃、116℃、118℃或120℃。
优选地，步骤(1)所述热压的时间为3-5s，例如可以是3s、3.2s、3.5s、3.7s、3.8s、4.0s、4.2s、4.5s、4.8s或5.0s，优选为3.5s。
本发明发现，对中空拭子管进行的热压，即隔离带的热压与罐入液体后拭子管开口的热压，在所述热压温度和时间范围内效果最佳，既不会产生漏液也不会使管材融化。
优选地，步骤(2)所述的ph检测液制备方法包括如下步骤：将甲基红溶液1.8-2.0nmol/l，酚磺酞溶液1.3-1.5nmol/l和百里酚蓝0.9-1.1nmol/l，按照甲基红、酚磺酞和百里酚蓝按体积比为(2-5):(1-3):(1-3)混合摇匀，贮存于棕色瓶中备用。
本发明中，甲基红、酚酞黄和百里酚蓝溶液配制方法均按照中国药典的记载，具体包括如下步骤：
(1’)将0.1g甲基红溶于7.4ml0.05mol/l的氢氧化钠中，用水稀释至200ml备用；
(2’)将0.1g酚磺酞溶于5.7ml0.05mol/l的氢氧化钠中，用水稀释至200ml备用；
(3’)将0.1g百里酚蓝溶于4.3ml0.05mol/l的氢氧化钠中，用水稀释至200ml备用。
优选地，步骤(2)所述ph检测液的用量为1.5-2.5ml，例如可以是1.5ml、1.6ml、1.7ml、1.8ml、1.9ml、2.0ml、2.1ml、2.2ml、2.3ml、2.4ml或2.5ml。
优选地，步骤(2)和步骤(3)中所述开口热压的上模温度为100-120℃，例如可以是100℃、101℃、102℃、103℃、104℃、105℃、107℃、108℃、110℃、112℃、115℃、116℃、118℃或120℃。
优选地，步骤(2)和步骤(3)中所述开口热压的下模温度为100-120℃，例如可以是100℃、101℃、102℃、103℃、104℃、105℃、107℃、108℃、110℃、112℃、115℃、116℃、118℃或120℃。
优选地，步骤(2)和步骤(3)中所述开口热压的时间为3-5s，例如可以是3s、3.2s、3.5s、3.7s、3.8s、4.0s、4.2s、4.5s、4.8s或5.0s，优选为3.5s。
优选地，步骤(3)所述胺试剂的制备方法包括如下步骤：将碘化钾100g-150g、碘110g-160g、汞100g-150g和1000ml蒸馏水加热搅拌，完全溶解后再加蒸馏水至2000ml，取上述原液500-800ml，10％氢氧化钠溶液3000ml-3500ml和蒸馏水750ml-1000ml配成混合液，最后取等量混合液和20％氢氧化钾溶液混合成胺试剂。
优选地，步骤(3)所述胺试剂用量为1.5-2.5ml，例如可以是1.5ml、1.6ml、1.7ml、1.8ml、1.9ml、2.0ml、2.1ml、2.2ml、2.3ml、2.4ml或2.5ml。
优选地，步骤(4)所述海绵热压的上模热压温度为155-165℃，例如可以是155℃、156℃、157℃、158℃、159℃、160℃、161℃、162℃、163℃、164℃或165℃，优选为160℃。
优选地，步骤(4)所述海绵热压的下模热压温度为155-165℃，例如可以是155℃、156℃、157℃、158℃、159℃、160℃、161℃、162℃、163℃、164℃或165℃，优选为160℃。
优选地，步骤(4)所述的海绵热压预热温度为20-50℃，例如可以是20℃、23℃、25℃、28℃、30℃、35℃、40℃、45℃或50℃。
优选地，步骤(4)所述的海绵热压时间为1-3s，例如可以是1s、1.1s、1.2s、1.3s、1.4s、1.5s、1.6s、1.7s、1.8s、1.9s、2.0s、2.1s、2.2s、2.3s、2.4s、2.5s、2.6s、2.7s、2.8s、2.9s或3.0s，优选为2s。
本发明发现，对海绵的热压在所述温度和时间范围内效果最佳，即可以使海绵塑性，又不会使海绵融化变形。
优选地，步骤(4)所述热压方式为包覆热压，海绵包覆中空拭子管的长度为5-10mm。
本发明发现，海绵包覆中空拭子管端点的长度影响检测液的渗入，在所述长度范围内可使检测液集中在取样头的圆形端，检测高效快速。
第三方面，一种如第一方面所述的拭子用于制备检测阴道疾病的药物或试剂中的用途。
拭子使用方法及说明：用ph检测液一端的取样头自取阴道内的白带，取出后，用手挤压含有ph检测液的中空拭子管，使ph检测液渗入取样后的海绵头上，根据检测色卡的说明观察取样头颜色变化，红色表示ph<4.5，为阴性；桔红色、桔黄色或黄色表示ph>4.5，为阳性；蓝紫色表示ph>7.0，为阳性；
其中，ph检测结果阳性的个体，使用胺试剂一端的取样头自取阴道内白带，取出后，用手挤压含有胺试剂的中空拭子管，使胺试剂透入取样后的海绵头中，产生鱼腥臭味，则确定阳性。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
(1)本发明提供的拭子采用双头拭子的方式将两种检测方法整合在一根拭子上，结构简单便携，并将传统拭子中的拭子棒用中空拭子管替代，使用热压技术将中空拭子管封闭隔离成互不相通的两部分，可用于灌注液体，挤压中空管即可使液体渗入取样头，用于检测阴道疾病的检测结果准确率极高，不仅可以用于细菌性阴道炎、滴虫性阴道炎和念珠菌性阴道炎的诊断，也可以指示宫颈炎病变，检测范围较普通拭子更宽；
(2)操作简单，可用于患者自查，也可以用于医生辅助检测，整个过程快速高效，且避免一份样本用于两种检测时，样本长时间暴露于空气中可能引起的样本损失和变质；
(3)解决了现有检测方法操作复杂，费用高，结果主观性强，检测液外置带来的运输不便等缺陷，应用前景广阔。
附图说明
图1为本发明的拭子的结构示意图，其中1为第一取样头，2为第二取样头，3为中空拭子管，4为隔离带。
具体实施方式
为更进一步阐述本发明所采取的技术手段及其效果，以下通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案，但本发明并非局限在实施例范围内。
实施例1
如图1所示，一种拭子包括拭子取样头、中空拭子管3和隔离带4，所述中空拭子管两端设置有第一取样头1和第二取样头2，所述隔离带4设置在中空拭子管中部。
(1)选择聚丙烯材质的中空拭子管，管长为14cm，内径5mm，管壁厚度0.5mm，在中间部位热压出3mm的隔离带，热压上模温度102℃，下模温度为102℃，热压3.5s，确保封闭不漏液；
(2)将甲基红1.9nmol/l、酚磺酞1.4nmol/l和1.0nmol/l百里酚蓝按照2:1:1的体积比混合摇匀，贮存于棕色瓶备用，将配置好的2mlph检测液灌入隔离带一侧的中空拭子管，将拭子管开口热压封闭，热压上模温度102℃，下模温度为102℃，热压3.5s，确保封闭不漏液；
(3)将2ml配置好的胺试剂灌入隔离带另一侧的中空拭子管中，将拭子管开口热压封闭，热压上模温度102℃，下模温度为102℃，热压3.5s，确保封闭不漏液；
(4)选择医用海绵作为拭子取样头的材料，设计第一取样头1长度为15mm，第二取样头2的长度为15mm，取样头球形端直径10mm，椭圆形端包覆热压于中空拭子管外端点，海绵包覆中空拭子管的长度为8mm，海绵热压上模温度为160℃，下模热压温度为160℃，热压2s。
实施例2
如图1所示，一种拭子包括拭子取样头、中空拭子管3和隔离带4，所述中空拭子管两端设置有第一取样头1和第二取样头2，所述隔离带4设置在中空拭子管中部。
(1)选择聚丙烯材质的中空拭子管，管长为10cm，内径3mm，管壁厚度0.4mm，在中间部位热压出1mm的隔离带，热压上模温度100℃，下模温度为100℃，热压5s，确保封闭不漏液；
(2)将甲基红1.8nmol/l、酚磺酞1.5nmol/l和0.9nmol/l百里酚蓝按照3:1:2的体积比混合摇匀，贮存于棕色瓶备用，将配置好的1.5mlph检测液灌入隔离带一侧的中空拭子管，将拭子管开口热压封闭，热压上模温度100℃，下模温度为100℃，热压5s，确保封闭不漏液；
(3)将1.5ml配置好的胺试剂灌入隔离带另一侧的中空拭子管中，将拭子管开口热压封闭，热压上模温度100℃，下模温度为100℃，热压5s，确保封闭不漏液；
(4)选择医用海绵作为拭子取样头的材料，设计第一取样头1长度为10mm，第二取样头2的长度为10mm，取样头球形端直径8mm，椭圆形端包覆热压于中空拭子管外端点，海绵包覆中空拭子管的长度为5mm，海绵热压上模温度为165℃，下模热压温度为165℃，热压1s。
实施例3
如图1所示，一种拭子包括拭子取样头、中空拭子管3和隔离带4，所述中空拭子管两端设置有第一取样头1和第二取样头2，所述隔离带4设置在中空拭子管中部。
(1)选择聚丙烯材质的中空拭子管，管长为18cm，内径7mm，管壁厚度0.1mm，在中间部位热压出3mm的隔离带，热压上模温度120℃，下模温度为120℃，热压3s，确保封闭不漏液；
(2)将甲基红2.0nmol/l、酚磺酞1.3nmol/l和1.1nmol/l百里酚蓝按照4:2:1的体积比混合摇匀，贮存于棕色瓶备用，将配置好的2.5mlph检测液灌入隔离带一侧的中空拭子管，将拭子管开口热压封闭，热压上模温度120℃，下模温度为120℃，热压3s，确保封闭不漏液；
(3)将2.5ml配置好的胺试剂灌入隔离带另一侧的中空拭子管中，将拭子管开口热压封闭，热压上模温度120℃，下模温度为120℃，热压3s，确保封闭不漏液；
(4)选择医用海绵作为拭子取样头的材料，设计第一取样头1长度为25mm，第二取样头2的长度为25mm，取样头球形端直径13mm，椭圆形端包覆热压于中空拭子管外端点，海绵包覆中空拭子管的长度为10mm，海绵热压上模温度为155℃，下模热压温度为155℃，热压3s。
实施例4
与实施例1相比，除了隔离带热压温度为90℃外，其他条件同实施例1。结果显示，实施例4制备得到的拭子隔离带不能起到封闭隔离的作用，中空拭子管两端的检测液发生混合，影响拭子使用。
实施例5
与实施例1相比，除了隔离带热压温度为130℃外，其他条件同实施例1。结果显示，实施例5制备得到的拭子，由于隔离带热压温度过高导致中空拭子管变形甚至熔断，影响拭子使用。
实施例6
与实施例1相比，除了海绵热压温度为150℃外，其他条件同实施例1。结果显示，实施例6制备得到的拭子，海绵热压不成型，放置一段时间后容易开裂脱落。
实施例7
与实施例1相比，除了海绵热压温度为170℃外，其他条件同实施例1。结果显示，实施例6制备得到的拭子，海绵融化变黑，影响拭子正常使用。
实施例8
与实施例1相比，除了ph试剂由甲基红和溴甲酚绿组成，比例为2:1之外，其他条件同实施例1。
实施例9
与实施例1相比，除了ph试剂不添加酚酞黄之外，其他条件同实施例1。
实施例10
与实施例1相比，除了ph试剂不添加百里酚蓝之外，其他条件同实施例1。
实施例11
与实施例1相比，除了只进行ph检测，不进行胺试验外，其他条件同实施例1。
人群测试
选择160名阴道疾病志愿者，包括细菌性阴道炎患者45名，滴虫性阴道炎患者35名，念珠菌性阴道炎患者43名，和宫颈炎患者37名。分别使用实施例1-3和实施例8-11的拭子进行检测，统计阴道疾病的检出准确度。
检测方法：
(1)取出拭子，用ph检测液一端的取样头自取阴道内的白带，取出后，用手挤压含有ph检测液的中空拭子管，使ph检测液渗入取样后的海绵头上，根据检测色卡的说明观察取样头颜色变化，红色表示ph<4.5，为阴性，表明阴道有自净作用；桔红色、桔黄色或黄色表示ph>4.5，为阳性，提示阴道炎症；蓝紫色表示ph>7.0，指示宫颈疾病；
(2)再用胺试剂一端的取样头自取阴道内白带，取出后，用手挤压含有胺试剂的中空拭子管，使胺试剂透入取样后的海绵头中，产生鱼腥臭味，则根据患者症状和体征可判断是否患有细菌性、滴虫、念珠菌性阴道炎或宫颈炎症。检测结果见表1。
表1阴道疾病检测准确率
比较实施例1与实施例4-7可知，热压温度控制对中空拭子管至关重要，过高或过低都不能使拭子成型。比较实施例1与实施例8-11可知，ph试剂的组成和配比对各种阴道疾病的检出准确率的影响，本发明所述ph检测液的优选组成和配比合理，且互相配合，ph检测液成分稳定，指示结果准确率高，单独使用ph检测方法仍会产生假阳性，须与胺试剂协同检测，细菌性阴道炎、滴虫性阴道炎和念珠菌性阴道炎的检出准确率可达100％，同时本发明提供的拭子可用来检测指示宫颈炎，准确率可达97％，检测种类更宽，应用价值大。
综上，本发明提供的拭子采用双头拭子的方式将两种检测方法整合在一根拭子上，结构简单便携，并将传统拭子中的拭子棒用中空拭子管替代，使用热压技术将中空拭子管封闭隔离成互不相通的两部分，并在隔离带两侧的拭子管中分别灌入检测试剂，通过简单挤压的方式使检测液渗透入取样后的取样头，通过颜色变化和味道变化，客观的反应结果，精确度高，避免试剂外置带来的运输和保存不便，医生和患者均可进行操作检测，操作简单，同时，双取样头和中空拭子管的设计节约成本，市场前景好。
申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的详细方法，但本发明并不局限于上述详细方法，即不意味着本发明必须依赖上述详细方法才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。