胰腺癌的检查方法与流程

本发明涉及胰腺癌的检查方法、胰腺癌的检查剂等。

背景技术：

胰腺癌的每年死亡人数，多至在癌症之中在男性中排第5位，在女性中排第4位(2014年)，该数字仍有增加的倾向。胰腺癌死亡人数多的原因之一在于其难以早期发现。胰腺癌在初期没有特征性的症状，使得早期发现较为困难。因此，大多情况在诊断为胰腺癌时，癌症已经进展而难以治疗。

已有报道称糖链抗原或针对其的抗体作为各种癌症的检查指标。作为胰腺癌的检查方法，例如已报道了使用糖链抗原之一的CA19-9(碳水化合物抗原(carbohydrate antigen)19-9)的方法(非专利文献1)。

现有技术文献

非专利文献

非专利文献1：Erxi W.Shuang Z.Kruttika B.Qingyong M.：CA19-9 and pancreatic cancer.Clin Adv Hematol Oncol.201311(1)：53-55.

技术实现要素：

发明所要解决的问题

本发明的课题在于提供胰腺癌的检查方法。进一步，本发明的课题在于提供对即使更早期的胰腺癌也能够进行判定的胰腺癌的检查方法。

解决问题的方法

本发明基于这样的见解：与健康人相比，在胰腺癌患者中具有在血清中的抗糖链抗体(抗3-唾液酸乳糖糖链抗体及抗(LN)3糖链抗体)值较低的倾向，及通过以该抗糖链抗体值作为指标可以判定胰腺癌患病的可能性。

对本发明而言，作为一种实施方式，包括下述实施方式：

项目1.检查胰腺癌患病可能性的方法，其包括：(1)测定从被检者提取的生物样品中的选自由抗3-唾液酸乳糖糖链抗体及抗(LN)3糖链抗体组成的组中的至少一种抗糖链抗体的量或浓度的工序，其中，上述抗3-唾液酸乳糖糖链抗体，为能够与Neu5Acα(2→3)Galβ(1→4)Glc表示的糖链结合的抗体或识别上述糖链的抗体，并且上述抗(LN)3糖链抗体为能够与Galβ1→3GlcNAcβ1→3Galβ1→4GlcNAc表示的糖链结合的抗体或识别上述糖链的抗体。

项目2.项目1所述的方法，其中，上述工序(1)包括：(1a)使选自由包含3-唾液酸乳糖糖链结构的化合物1及包含(LN)3糖链结构的化合物2的组中的至少一种化合物，与上述生物样品接触的工序；以及(1b)测定结合至上述化合物的抗糖链抗体的量的工序。

项目3.项目1或2所述的方法，其进一步包括：(2a)当上述工序(1)中测定的上述抗糖链抗体的量或浓度的值低于预先设定的截止值以下的情况下，判定上述被检者患胰腺癌的可能性高的工序。

项目4.项目3所述的方法，其中，上述截止值为从没有患胰腺癌的被检者提取的生物样品中的上述抗糖链抗体的量或浓度的值的平均值、百分比值或最小值。

项目5.项目1或2所述的方法，其进一步包括，(2c)当上述工序(1)中测定的上述抗糖链抗体的量或浓度的值为预先设定的截止值以下的情况下，暂时判定上述被检者患胰腺癌的可能性高的工序；(3c)测定上述生物样品中的糖链胰腺癌标记的量或浓度，其中测定的上述糖链胰腺癌标记的量或浓度的值为预先设定的截止值以上的情况下，暂时判定上述被检者患胰腺癌的可能性高的工序；以及(3d)基于上述工序(2c)的暂时判定及上述工序(3c)的暂时判定，判定上述被检者患胰腺癌的可能性高的工序。

项目6.项目5所述的方法，其中，在上述工序(3d)中，当上述工序(2c)的暂时判定及上述工序(3c)的暂时判定中，有任一个或两者暂时判定为上述被检者患胰腺癌的可能性高的情况下，判定上述被检者患胰腺癌的可能性高。

项目7.项目5或6所述的方法，其中，上述抗糖链抗体的量或浓度的截止值，为从没有患胰腺癌的被检者提取的生物样品中的上述抗糖链抗体的量或浓度的值的平均值、百分比值或最小值。

项目8.项目5～7中任一项所述的方法，其中，上述糖链胰腺癌标记为选自由CA19-9及DUPAN-2组成的组中的至少一种。

项目9.项目8所述的方法，其中，上述糖链胰腺癌标记为CA19-9。

项目10.项目1～9中任一项所述的方法，其中，上述抗糖链抗体为IgG。

项目11.项目1～10中任一项所述的方法，其中，上述生物样品为体液或源自体液的样品。

项目12.项目11所述的方法，其中，上述体液为选自由以下组成的组中的至少一种：全血、血清及血浆。

项目13.项目1～12中任一项所述的方法，其中，作为检查对象的上述胰腺癌为阶段0～2的胰腺癌。

项目14.胰腺癌的检查剂，其包含选自由包含3-唾液酸乳糖糖链结构的化合物1及包含(LN)3糖链结构的化合物2组成的组中的至少一种化合物，上述3-唾液酸乳糖糖链结构为Neu5Acα(2→3)Galβ(1→4)Glc表示的糖链结构，并且上述(LN)3糖链结构为Galβ1→3GlcNAcβ1→3Galβ1→4GlcNAc表示的糖链结构。

另外，本发明作为另外的一种实施方式也包含下述实施方式：

项目15.辅助判定胰腺癌患病可能性的方法，其包括：(1)测定从被检者提取的生物样品中的选自由抗3-唾液酸乳糖糖链抗体及抗(LN)3糖链抗体组成的组中的至少一种抗糖链抗体的量或浓度的工序。

项目16.测定被检者中的抗糖链抗体的量或浓度的方法，其包括：(1)测定从被检者提取的生物样品中的选自由抗3-唾液酸乳糖糖链抗体及抗(LN)3糖链抗体组成的组中的至少一种抗糖链抗体的量或浓度的工序。

项目17.项目16所述的方法，其中，在工序(1)中，作为抗糖链抗体而对选自由抗3-唾液酸乳糖糖链抗体及抗(LN)3糖链抗体组成的组中的仅一种抗糖链抗体的量或浓度进行测定。

项目18.项目16或17所述的方法，其中，工序(1)包括：

将选自由包含3-唾液酸乳糖糖链结构的化合物1及包含(LN)3糖链结构的化合物2组成的组中的至少一种化合物，固定于固相的工序；

使固定于固相的化合物，与从被检者提取的生物样品接触的工序；

用包含三羟甲基氨基甲烷和/或醚型非离子表面活性剂的溶液，对固定有已与生物样品接触的化合物的固相进行洗涤的工序；

向经洗涤的固相，添加包含牛血清白蛋白且进一步包含三羟甲基氨基甲烷和/或醚型非离子表面活性剂的封闭溶液的工序；以及

测定与固定于固相的化合物结合的抗体的量或浓度的工序。

项目19.诊断被检者中的胰腺癌的方法，其包括：

(1)测定从被检者提取的生物样品中的选自由抗3-唾液酸乳糖糖链抗体及抗(LN)3糖链抗体组成的组中的至少一种抗糖链抗体的量或浓度的工序；

(2a)当上述工序(1)中测定的上述抗糖链抗体的量或浓度的值为预先设定的截止值以下的情况下，判定上述被检者患胰腺癌的可能性高的工序；以及

(3a)对在上述工序(2a)中判定为患胰腺癌的可能性高的受试者，采用胰腺癌的诊断方法的工序。

项目20.项目19所述的方法，其中，在上述工序(3a)中适用的胰腺癌的诊断方法，为选自由以下组成的组中的至少一种：活检法、PET检验法、CT检验法及超声波检验法。

项目21.诊断及治疗被检者中的胰腺癌的方法，其包括：

(1)测定从被检者提取的生物样品中的选自由抗3-唾液酸乳糖糖链抗体及抗(LN)3糖链抗体组成的组中的至少一种抗糖链抗体的量或浓度的工序；

(2a)当上述工序(1)中测定的上述抗糖链抗体的量或浓度的值为预先设定的截止值以下的情况下，判定上述被检者患胰腺癌的可能性高的工序；或

(3b)在上述工序(1)中测定的上述抗糖链抗体的量或浓度的值(被检抗糖链抗体值)为预先设定的截止值以下的情况下，判定上述被检者患胰腺癌的可能性高的工序；及对判定为患胰腺癌的可能性高的受试者采用胰腺癌的诊断方法的工序；以及

(4)对在上述工序(2a)中判定为患胰腺癌的可能性高的受试者或在上述工序(3b)中诊断为患胰腺癌的受试者进行胰腺癌治疗的工序。

项目22.选自由包含3-唾液酸乳糖糖链结构的化合物1及包含(LN)3糖链结构的化合物2组成的组中的至少一种化合物，其用作胰腺癌患病可能性的检查剂。

项目23.选自由包含3-唾液酸乳糖糖链结构的化合物1及包含(LN)3糖链结构的化合物2组成的组中的至少一种化合物的用途，其用于检查胰腺癌患病的可能性。

项目24.选自由包含3-唾液酸乳糖糖链结构的化合物1及包含(LN)3糖链结构的化合物2组成的组中的至少一种化合物的用途，其用于制备胰腺癌患病可能性的检查剂。

发明的效果

根据本发明可以提供胰腺癌的检查方法。根据本发明的检查方法，可以实现以更高的灵敏度检查胰腺癌(优选为更初期的胰腺癌)的患病的可能性，并且更早期发现胰腺癌。

附图简单说明

[图1]示出了参考例1(b)中测定及算出的在健康人被检物及胰腺癌患者被检物的血清中的抗糖链抗体(抗3-唾液酸乳糖糖链抗体及抗(LN)3糖链抗体)浓度(抗糖链抗体值)。各坐标图纵轴示出抗糖链抗体值(单位为荧光强度值/IgG量(μg))。横轴中，“健康”表示健康人被检物的结果，“胰腺癌”表示胰腺癌患者被检物的结果，“N”表示被检物数量。

[图2]示出实施例1及比较例1中进行的每个阶段的胰腺癌患病的判定结果。纵轴示出判定指标。横轴示出胰腺癌的阶段。坐标图中的横线表示预先设定的截止值。坐标图中的分数示出了(判定为患胰腺癌的可能性高的被检物数/胰腺癌患者被检物数)＝灵敏度。

[图3]示出在参考例2及实施例2中测定的健康人被检物及胰腺癌患者被检物的血清中的抗3-唾液酸乳糖糖链抗体浓度。

[图4]针对参考例2及实施例2中测定的健康人被检物及胰腺癌患者被检物的血清中的抗3-唾液酸乳糖糖链抗体浓度(μg/mL)，示出ROC曲线。纵轴示出灵敏度。横轴示出从100％减去特异度％而得的值(100％-特异度％)。

具体实施方式

在本说明书中，对于“含有”及“包含”的表述，包括“含有”、“包含”、“实质上由......组成”及“仅由......组成”这样的概念。

1.胰腺癌患病可能性的检查方法

本发明在其一个实施方式中，涉及检查胰腺癌患病可能性的方法，其包括：(1)测定从被检者提取的生物样品中的选自由抗3-唾液酸乳糖糖链抗体及抗(LN)3糖链抗体组成的组中的至少一种抗糖链抗体的量或浓度的工序(工序(1))(在本说明书中，也称为“本发明的检查方法”)。以下，对所述方法进行说明。

1-1.工序(1)

作为检查对象的胰腺癌，没有特别的限制，包含所有种类、阶段(分期)等的胰腺癌。对作为检查对象的胰腺癌的种类而言，可列举例如：胰腺导管癌、胰腺内分泌肿瘤、导管内乳头状粘液性肿瘤、粘液性囊性肿瘤、腺泡细胞癌等，优选为胰腺导管癌等。对作为检查对象的胰腺癌的阶段而言，可从更早期的阶段起依次列举：阶段0、阶段1、阶段2、阶段3及阶段4(阶段4a、阶段4b)。本发明的检查方法，在即使是初期的胰腺癌也可进行判定这方面有用。在本发明的检查方法中，对于阶段2、或比阶段2更初期的胰腺癌，特别是阶段1或2的胰腺癌，可以以比公知的方法更高的精度进行判定。

从这样的目的出发，作为检查对象的胰腺癌的阶段优选为阶段0～3，更优选为阶段0～2，进一步优选为阶段1～2。

被检者是本发明的检查方法的对照生物，对其生物种类没有特别限制。作为被检者的生物种类，可列举例如：人、猴、小鼠、大鼠、犬、猫、兔等各种哺乳类动物，优选可列举人。

对于被检者的与胰腺癌相关的状态，没有特别限制。作为被检者，可列举例如：不清楚是否患有胰腺癌的被检者、没有胰腺癌患病史的被检者、存在胰腺癌患病史并且接受了胰腺癌治疗的被检者、通过其它判定方法已经判定患有胰腺癌(或者没有患有)的被检者等。

生物样品只要是可含有抗糖链抗体的那些即可，没有特别限制。作为生物样品，可列举例如：全血、血清、血浆、唾液、髓液、关节液、尿液、组织液、汗液、泪液、唾液等体液、源自这些体液的样品。作为源自体液的样品，只要是从体液制备的样品即可，没有特别的限制，可列举例如：以从体液中将在该体液中包含的抗体(优选为抗糖链抗体、更优选为选自由抗3-唾液酸乳糖糖链抗体及抗(LN)3糖链抗体组成的组中的至少一种抗糖链抗体)进行浓缩、纯化等方式得到的样品等。作为体液，可列举优选为全血、血清、血浆等。生物样品可以单独采用一种，也可以组合采用两种以上。

生物样品可以利用对本领域技术人员而言公知的方法从被检者中提取。例如，全血可以通过使用了注射器等的采血而取得。需要说明的是，采血优选由医生、护士等医疗工作者进行。血清为从血液除去血细胞及特定的血液凝固因子后的部分，可以以例如使血液凝固后的上清液的形式得到。

血浆为从血液除去血细胞后的部分，可以例如以在使血液不发生凝固的条件下对其进行离心时的上清液的形式得到。

3-唾液酸乳糖糖链，是指Neu5Acα(2→3)Galβ(1→4)Glc表示的糖链，即神经氨酸(Neu5Ac)的2位的羟基和半乳糖(Gal)的3位的羟基利用α糖苷键连接，且该半乳糖(Gal)的1位的羟基和葡萄糖(Glc)的4位的羟基利用β糖苷键连接而成的糖链。作为3-唾液酸乳糖糖链的结构式的一例，可列举下述式(A)[式中，Ac表示乙酰基]。

[化学式1]

(LN)3糖链是指Galβ1→3GlcNAcβ1→3Galβ1→4GlcNAc表示的糖链，即半乳糖(Gal，为了方便也称为“半乳糖A”)的1位的羟基和N-乙酰基葡糖胺(GlcNAc，为了方便也称为“N-乙酰基葡糖胺A”)的3位的羟基利用β糖苷键连接，该N-乙酰基葡糖胺A的1位的羟基与与半乳糖A不同的半乳糖(Gal，为了方便也称为“半乳糖B”)的3位的羟基利用β糖苷键连接，且该半乳糖B的1位的羟基与与N-乙酰基葡糖胺A不同的N-乙酰基葡糖胺的4位的羟基利用β糖苷键连接而成的糖链。作为(LN)3糖链的结构式的一例，可列举下述式(B)[式中，Ac表示乙酰基]。

[化学式2]

抗3-唾液酸乳糖糖链抗体，为能够与3-唾液酸乳糖糖链(优选为特异性)结合的抗体，和/或(优选为特异性)识别3-唾液酸乳糖糖链的抗体，在该范围内没有特别限制。抗(LN)3糖链抗体，为能够与(LN)3糖链(优选为特异性)结合的抗体，和/或(优选为)特异性识别(LN)3糖链的抗体，在该范围内没有特别限制。在本说明书中，有时将它们合称而称为“本发明的抗糖链抗体”。

在工序(1)中，对选自由抗3-唾液酸乳糖糖链抗体及抗(LN)3糖链抗体组成的组中的至少一种抗体的量或浓度进行测定。在工序(1)中，从检查的效率性的观点出发，优选对作为抗糖链抗体选自由抗3-唾液酸乳糖糖链抗体及抗(LN)3糖链抗体组成的组中的仅一种的量或浓度进行测定。

对作为检测对象的本发明的抗糖链抗体的同种型没有特别限制。作为该同种型，可列举例如：IgG(IgG1、IgG2、IgG3、IgG4)、IgM、IgA、IgD、IgE等。在这些中，从能够以更高精度检查胰腺癌患病可能性的观点出发，优选可列举IgG等。

在本发明的检查方法中包括的测定抗体量的工序中，对测定抗糖链抗体的量或浓度的方法而言，在可以测定该抗体的量和/或浓度的方法的范围内没有特别限制。作为该方法，可列举例如免疫测定法。对免疫测定法而言，不论直接法、间接法、均一法、不均一法、竞争法、非竞争法等，均可以广泛采用。作为免疫测定法，更具体而言，可列举例如：ELISA(例如直接法、间接法、夹心法、竞争法等)、放射性免疫测定(RIA)、免疫放射分析(IRMA)、酶免疫测定(EIA)、夹心EIA、免疫层析、蛋白质印迹、免疫沉降、狭缝或者斑点印迹分析、免疫组织染色、荧光免疫测定、使用亲和素-生物素或链霉菌抗生物素蛋白-生物素体系的免疫测定法、使用表面等离子共振(SPR)法的免疫测定法等。检测方法可以单独采用一种，也可以组合采用两种以上。

在测定抗体的量或浓度的工序中，对检测抗体时使用的标记(例如标记抗体等)中的标记的种类没有特别限制。作为标记，可列举例如：荧光物质、发光物质、染料、酶、胶体金、放射性同位素等。在这些中，从安全性、经济性、探测灵敏度等观点出发，优选为过氧化物酶、碱性磷酸酶等酶标记。

利用工序(1)，可以从被检者提取的生物样品中测定、算出本发明的抗糖链抗体的量或浓度。对于测定、算出方法的细节，在工序(1)的下述优选的实施方式中说明。

作为工序(1)的优选的一种实施方式，可以例示包括以下工序的工序：(1a)使选自由包含3-唾液酸乳糖糖链结构的化合物1及包含(LN)3糖链结构的化合物2组成的组中的至少一种化合物，与从被检者提取的生物样品接触的工序(工序(1a))；以及(1b)测定结合至上述化合物的抗体量的工序(工序(1b))。

包含3-唾液酸乳糖糖链结构的化合物1，是指3-唾液酸乳糖糖链本身、或包含3-唾液酸乳糖糖链作为部分结构的化合物。在为后者的情况下，对除了3-唾液酸乳糖糖链结构以外的结构没有特别的限制，可以为不具有抗原性的结构、也可以为具有抗原性的结构。作为不具有抗原性的结构，可列举例如：在制作糖链阵列时作为间隔序列发挥作用的结构。在为具有抗原性的结构的情况下，考虑在化合物1中，比较多地结合除了抗3-唾液酸乳糖糖链抗体以外的抗体，虽然预计其将会成为背景，但在背景较大时，只要另行进行仅使用了包含该“具有抗原性的结构”的化合物的测定，将得到的测定值作为背景值减去即可。作为化合物1，可列举优选为包含3-唾液酸乳糖糖链结构的糖链(例如糖残基数3～30、优选为3～10，更优选为3～5、进一步优选为3)，该“包含3-唾液酸乳糖糖链结构的糖链”与合成聚合物(例如聚丙烯酰胺、聚赖氨酸、聚苯乙烯、聚乙烯、聚酯、聚氯乙烯、聚氨酯等)共价键合而成的糖链聚合物、该糖链与血清白蛋白、粘蛋白共价键合而成的糖蛋白、该糖链与肽共价键合而成的糖肽、糖链树状高分子(Dendrimer)、经利用还原性的氨基化反应标记的糖链等。化合物1可以使用依照公知的方法合成的那些，也可以使用各种市售品，例如3′-唾液酸乳糖-PAA(GlycoTech Corporation制，产品目录编号：08-038)。

包含(LN)3糖链结构的化合物2是指，(LN)3糖链本身、或包含(LN)3糖链作为部分结构的化合物。在为后者的情况下，对除了(LN)3糖链结构以外的结构没有特别的限制，可以为不具有抗原性的结构，也可以为具有抗原性的结构。作为不具有抗原性的结构，可列举例如：在制作糖链阵列时，作为间隔序列发挥作用的结构。在为具有抗原性的结构的情况下，考虑在化合物2中，比较多地结合除了抗(LN)3糖链抗体以外的抗体，虽然预计其将会成为背景，但在背景较大时，只要另行进行仅使用了包含该“具有抗原性的结构”的化合物的测定，将得到的测定值作为背景值减去即可。作为化合物2，可列举优选为包含(LN)3糖链结构的糖链(例如糖残基数4～30、优选为4～6，更优选为4～5，进一步优选为4)，该“包含(LN)3糖链结构的糖链”与合成聚合物(例如聚丙烯酰胺、聚赖氨酸、聚苯乙烯、聚乙烯、聚酯、聚氯乙烯、聚氨酯等)共价键合而成的糖链聚合物、该糖链与血清白蛋白、粘蛋白共价键合而成的糖蛋白、该糖链与肽共价键合而成的糖肽、糖链Dendrimer、经利用还原性的氨基化反应标记的糖链等。化合物2可以使用依照公知的方法合成的那些，也可以使用各种市售品，例如Galβ1→3GlcNAcβ1→3Galβ1→4GlcNAc-PAA(GlycoTech Corporation制，产品目录编号：08-096)。

对工序(1a)中的接触的实施方式，没有特别的限制，可以根据测定上述抗糖链抗体的量或浓度的方法(例如，各种免疫测定等)的种类而选择适当的实施方式。作为接触实施方式，可列举例如以仅将生物样品中的抗体及糖链抗原(化合物1和/或化合物2)中的任一方固定于固相的状态使其接触的实施方式、以它们的两方均不固定于固相的状态使其接触的实施方式等。这些中，从效率性等观点出发，可列举优选仅将糖链抗原(化合物1和/或化合物2)固定于固相的状态使其接触的实施方式。当在工序(1a)中的接触的实施方式中，仅将生物样品中的抗体及糖链抗原中的任一方固定于固相时，优选在固定后，用包含三羟甲基氨基甲烷(Tris)和/或醚型非离子表面活性剂的溶液，对固定有抗体或抗体中的任一方的固相进行洗涤。

作为固相，只要能够固定生物样品中的抗体或糖链抗原(化合物1和/或化合物2)即可，没有特别限制。作为这样的固相，可列举例如含有聚苯乙烯、玻璃、硝酸纤维素等作为主要成分的板、载玻片、膜等。对固相而言，可以是被用于使生物样品中的抗体或糖链抗原(化合物1和/或化合物2)更容易固定的成分，例如，易反应性化合物(例如，具有易反应性基团的化合物、胶体金等)包覆而成的那些。作为具有易反应性基团的化合物，可列举具有可与糖链或糖链衍生物形成共价键的基团，例如：(1H-咪唑-1-基)羰基、琥珀酰亚胺氧基羰基、环氧基、醛基、氨基、硫羟基、羧基、叠氮基、氰基、活性酯基(1H-苯并三唑-1-基氧基羰基、五氟苯基氧基羰基、对硝基苯基氧基羰基等)、或卤代羰基(氯代羰基、氟代羰基、溴代羰基、碘代羰基)等的化合物。

作为具有易反应性基团的化合物，可列举例如：环氧基硅烷及聚赖氨酸等。

在使用被易反应性化合物包覆而成的固相的情况下，优选使用牛血清白蛋白(BSA)缓冲液将易反应性化合物封闭，封闭时间优选为60分钟以上。

封闭液优选进一步包含三羟甲基氨基甲烷(Tris)和/或醚型非离子表面活性剂。

对工序(1b)中的抗体的量或浓度的测定的实施方式没有特别的限制，可以根据测定上述抗糖链抗体的量或浓度的方法(例如，各种免疫测定法等)的种类而选择适当的实施方式。该测定可以通过例如，对源自使用的标记的标记的信号进行定量而进行。作为更具体的实施方式，可以通过例如，使标记抗体相对于结合于糖链抗原(化合物1和/或化合物2)上的抗体进行接触，对源自发生结合的标记抗体的标记的信号进行定量而进行。

作为其的一个例子，有ELISA法。根据ELISA法，可以使用标准抗体制作标准曲线，对本发明的抗糖链抗体的浓度进行定量。标准抗体，例如可以利用使用了生物素标记糖链抗原和链霉菌抗生物素蛋白-琼脂糖树脂的亲和纯化，而从市售的抗体制备。首先，将适当的ELISA用板的孔用糖链抗原进行包覆后，用BSA缓冲液进行封闭。接下来，将各浓度的标准抗体或被检物加入孔并静置一定时间后洗涤孔，向孔中加入用过氧化物酶标记的二次抗体并静置一定时间。其后，洗涤孔，向孔中加入过氧化物酶的底物并静置一定时间使其生色，在加入硫酸等反应停止液后，使用读板仪测定吸光度。基于标准抗体的浓度和其吸光度制作标准曲线后，基于标准曲线，对被检物中的抗糖链抗体的浓度进行定量。

基于得到的信号量，可以计算出本发明的抗糖链抗体的量。例如，在为非竞争法的情况下，可以将得到的信号量直接作为本发明的抗糖链抗体的量。另外，作为另外的例子，在为竞争法的情况下，由于得到的信号量与本发明的抗糖链抗体的量为反比例的关系，因此可以基于该关系而从得到的信号量计算出本发明的抗糖链抗体的量。

另外，可以通过用本发明的抗糖链抗体的量除以生物样品的量、生物样品内的成分量(例如，抗体总量、与检测对象的本发明的抗糖链抗体相同的同种型的抗体总量等)，从而计算出本发明的抗糖链抗体的浓度。

根据包含工序(1)的本发明的检查方法，可以提供作为胰腺癌患病的检测指标的被检抗糖链抗体值，由此可以辅助胰腺癌患病可能性的判定等。

1-2.工序(2a)

在本发明的检查方法中，作为一种实施方式，优选进一步包括：(2a)在工序(1)中测定的本发明的抗糖链抗体的量或浓度的值为预先设定的截止值以下的情况下，判定上述被检者患胰腺癌的可能性高的工序(工序(2a))。这里，所述“患胰腺癌的可能性”是指“在生物样品提取时患胰腺癌的可能性”。

根据包括该工序(2a)的本发明的检查方法，可实现对患胰腺癌的可能性进行判定。另外，本发明的检查方法可以以更高的灵敏度判定患胰腺癌的可能性，因此，通过包括该工序(2a)的本发明的检查方法，可以将真的患有胰腺癌的被检者更切实地判定为“患胰腺癌”(即，可进一步降低错误判定为“没有患胰腺癌”的可能性)。

对截止值而言，可以由本领域技术人员从灵敏度、特异度、阳性正确率、阴性正确率等观点出发而适当设定，可以设为例如：从没有患胰腺癌的被检者提取的生物样品中的本发明的抗糖链抗体的量、或浓度的值的平均值、百分比值或最小值。更具体而言，可以通过对例如：患胰腺癌的被检者及从患胰腺癌的被检者提取的生物样品中的本发明的抗糖链抗体的量或浓度进行测定，使用该测定值，进行基于接受者操作特征(Receiver Operating Characteristic，ROC)曲线的分析等的统计分析(更具体而言，可例示使用了Youden指数的方法)而设定。对截止值而言，可以设为例如：从没有患胰腺癌的被检者提取的生物样品中的本发明的抗糖链抗体的量或浓度的值的10～90百分比值、优选为30～70百分比值、更优选为40～60百分比值、进一步优选为45～55百分比值。

也可以将从同一被检者在一定时期前提取的生物样品中的上述抗糖链抗体的量或浓度的值作为截止值。所述“一定时期”，只要是本发明的抗糖链抗体的量或浓度在同一被检者内可发生变化的时期即可，没有特别限制。可列举例如：1个月～10年、2个月～5年、3个月～2年、4个月～1年左右的时期。

1-3.工序(2b)

作为本发明的检查方法的变形的方法，可列举代替上述工序(2a)而包括下述工序的方法：工序(2b)，当工序(1)中测定的本发明的抗糖链抗体的量或浓度的值，低于从同一被检者在一定时期前提取的生物样品中的本发明的抗糖链抗体的量或浓度的值的情况下，判定上述被检者将来患胰腺癌的可能性高(工序(2b))。利用包括该工序(2b)的上述检查方法，判定在将来的胰腺癌患病风险。

所述“一定时期”，只要是本发明的抗糖链抗体的量或浓度在同一被检者内可发生变化的时期即可，没有特别限制。可列举例如：1个月～10年、2个月～5年、3个月～2年、4个月～1年左右的时期。

对“低于”的程度没有特别限制，可例示在工序(1)中测定的本发明的抗糖链抗体的量或浓度的值，为从同一被检者在一定时期前提取的生物样品中的本发明的抗糖链抗体的量或浓度的值的90％以下、70％以下、50％以下、30％以下。

1-4.工序(2c)

作为本发明的检查方法的另外的一种实施方式，可列举代替上述工序(2a)，而包括以下工序的方法：

(2c)当上述工序(1)中测定的上述抗糖链抗体的量或浓度的值为预先设定的截止值以下的情况下，暂时判定上述被检者患胰腺癌的可能性高的工序(工序(2c))；

(3c)测定上述生物样品中的糖链胰腺癌标记的量或浓度，当测定的上述糖链胰腺癌标记的量或浓度的值为预先设定的截止值以上的情况下，暂时判定上述被检者患胰腺癌的可能性高的工序(工序(3c))；以及

(3d)基于上述工序(2c)的暂时判定及上述工序(3c)的暂时判定，判定上述被检者患胰腺癌的可能性高的工序(工序(3d))。根据包括该工序(2c)、(3c)、(3d)的上述检查方法，检查胰腺癌患病的可能性。包括上述工序(2c)、(3c)、(3d)的本发明的检查方法，对于初期的胰腺癌，具体而言，比阶段2或阶段2更初期的胰腺癌，特别是阶段1或2的胰腺癌患病，可以比公知的方法更高的精度进行判定。

通过在上述工序(3d)中，例如，当上述工序(2c)的暂时判定及上述工序(3c)的暂时判定中，有任一个或两者暂时判定上述被检者患胰腺癌的可能性高的情况下，判定上述被检者患胰腺癌的可能性高，由此可以进一步降低患胰腺癌的被检者被错误判定为“没有患胰腺癌”的可能性。

作为上述糖链胰腺癌标记，可列举：CA19-9、DUPAN-2、Span-1、CA50、CA242、TAG-72、SLX、STN等，优选可列举CA19-9、DUPAN-2等，更优选可列举CA19-9。作为上述糖链胰腺癌标记，也可以采用例如选自CA19-9及DUPAN-2中的一种以上的组合。

2.胰腺癌的更高精度的诊断

在利用包括工序(2a)的本发明的检查方法而将被检者判定为患胰腺癌的可能性高的情况下，通过将本发明的检查方法，进一步与(3a)对于在工序(2a)中判定为患胰腺癌的可能性高的受试者适用胰腺癌的诊断方法的工序(工序(3a))进行组合，由此可以以更高的精度诊断胰腺癌患病。另外，本发明的检查方法可以以更高的灵敏度判断患胰腺癌的可能性，因此，通过将本发明的检查方法与工序(3a)进行组合，由此可以将真的患胰腺癌的被检者更切实地诊断为“患胰腺癌”(即，可以进一步降低被错误诊断为“没有患胰腺癌”的可能性和从工序(3a)的诊断对象中排除的可能性)。

作为工序(3a)中采用的胰腺癌的诊断方法，没有特别的限制，可以广泛采用公知的诊断方法。作为该诊断方法，可列举例如：活检法、PET检验法、CT检验法、超声波检验法、胰腺癌标记(例如CA19-9、DUPAN-2、CEA、CA50等)检验法等。其中，从能够以更高精度诊断胰腺癌的观点出发，优选可列举：活检法、PET检验法、CT检验法、超声波检验法等。对诊断方法而言，可以单独采用一种，也可以组合采用两种以上。

3.胰腺癌的治疗

当利用包括工序(2a)的本发明的检查方法将被检者判定为患胰腺癌的可能性高的情况下，或利用工序(3a)诊断被检者为胰腺癌的情况下，通过进一步进行(4)对于工序(2a)中判定为患胰腺癌的可能性高的受试者，或工序(3a)中诊断为患胰腺癌的受试者胰腺癌进行治疗的工序(工序(4))，由此实现对被检者的胰腺癌进行治疗。另外，本发明的检查方法可以以更高的灵敏度判断患胰腺癌的可能性，因此，通过将本发明的检查方法或本发明的检查方法与工序(3a)的组合再进一步与工序(4)组合，使得可以更切实地对真的患胰腺癌的被检者进行治疗(即，可以进一步减少将真的患胰腺癌的被检者从治疗对象排除的可能性)。

作为治疗胰腺癌的方法，没有特别的限制，可以广泛采用公知的治疗方法。作为治疗方法，可列举例如：化学疗法、外科治疗法、放射线治疗法、免疫疗法等。这些可以依照公知的方法实施。

作为用于化学疗法的治疗药，没有特别的限制，可以使用各种抗癌剂。作为抗癌剂，可列举例如：烷基化剂、代谢拮抗剂、微管抑制剂、抗生素抗癌剂、拓扑异构酶抑制剂、铂制剂、分子靶向药物、激素制剂、生物制剂等。作为烷基化剂，可列举例如：环磷酰胺、异环磷酰胺、亚硝基脲、达卡巴嗪、替莫唑胺、尼莫司汀、白消安、马法兰、甲基苄肼、雷莫司汀等。作为代谢拮抗剂，可列举例如：依诺他滨、卡莫氟、卡培他滨、替加氟、替加氟尿嘧啶、替加氟·吉美嘧啶·奥替拉西钾、吉西他滨、阿糖胞苷、阿糖胞苷辛酸酯、奈拉滨、氟尿嘧啶、氟达拉滨、培美曲塞、喷司他丁、甲氨蝶呤、克拉屈滨、去氧氟尿苷、羟基脲、巯嘌呤等。作为微管抑制剂，可列举例如：长春新碱等生物碱类抗癌剂，多西他赛、紫杉醇等紫杉烷类抗癌剂。作为抗生素抗癌剂，可列举例如：丝裂霉素C、多柔比星，表柔比星、柔红霉素、博来霉素、放线菌素D、阿柔比星、伊达比星、吡柔比星、培洛霉素、米托蒽醌、氨柔比星、净司他丁等。作为拓扑异构酶抑制剂，可列举具有拓扑异构酶I抑制作用的CPT-11、依立替康、拓扑替康，具有拓扑异构酶II抑制作用的依托泊苷、索布佐生。作为铂制剂，可列举例如：顺氯氨铂、奈达铂、奥沙利铂、卡铂等。作为激素制剂，可列举例如：地塞米松、非那雄胺、他莫昔芬、阿那曲唑、依西美坦、乙炔雌二醇、氯地孕酮、戈舍瑞林、比卡鲁胺、氟他胺、泼尼松龙、亮丙瑞林、来曲唑、雌莫司汀、托瑞米芬、磷雌酚、米托坦、甲基睾酮、甲羟孕酮、美雄烷等。作为生物制剂，可列举例如：干扰素α、β及γ、白介素2、乌本美司、干燥BCG等。作为分子靶向药物，可列举例如：利妥昔单抗、阿仑单抗、曲妥珠单抗、西妥昔单抗、帕尼单抗、伊马替尼、达沙替尼、尼罗替尼、吉非替尼、厄洛替尼、西罗莫司、贝伐珠单抗、VEGF捕获剂(VEGF trap)、舒尼替尼、索拉非尼、托西莫单抗(tosituzumab)、硼替佐米、吉妥珠单抗·奥佐米星、替伊莫单抗-奥佐米星、替伊莫单抗、他米巴罗汀、维甲酸等。这里，除了特定的分子靶向药物以外，也可以包括：人表皮生长因子受体2抑制剂、表皮生长因子受体抑制剂、Bcr-Abl酪氨酸激酶抑制剂、表皮生长因子酪氨酸激酶抑制剂、mTOR抑制剂、血管内皮生长因子受体2抑制剂(α-VEGFR-2抗体)等以血管新生为靶标的抑制剂、MAP激酶抑制剂等各种酪氨酸激酶抑制剂、以细胞因子为靶标的抑制剂、蛋白酶体抑制剂、抗体-抗癌剂配合体等分子靶向药物等。这些抑制剂中也包括抗体。

作为代表的胰腺癌治疗药，可列举：吉西他滨、TS-1、厄洛替尼、吉西他滨与厄洛替尼的组合使用药，吉西他滨与白蛋白结合型紫杉醇的组合使用药，四种药品(奥沙利铂、左亚叶酸盐、依立替康及氟尿嘧啶)的组合使用药等。

4.胰腺癌的检查剂

本发明的一个实施方式中涉及胰腺癌的检查剂(本说明书中，也称为“本发明的检查剂”)，其包含选自由包含3-唾液酸乳糖糖链结构的化合物1及包含(LN)3糖链结构的化合物2组成的组中的至少一种化合物。以下对其进行说明。

本发明的检查剂为检查胰腺癌患病可能性的药剂。

本发明的检查剂，可以为包含选自由包含3-唾液酸乳糖糖链结构的化合物1及包含(LN)3糖链结构的化合物2组成的组中的至少一种化合物的组合物的形态。该组合物中，根据需要可以包含其它成分。作为其它成分，可列举例如：基质、载体、溶剂、分散剂、乳化剂、缓冲剂、稳定剂、赋形剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、增稠剂、润湿剂、色素、香料、螯合剂等。

本发明的检查剂，可以为包含选自由包含3-唾液酸乳糖糖链结构的化合物1及包含(LN)3糖链结构的化合物2组成的组中的至少一种化合物的试剂盒的形态。在该试剂盒中，可以包含可用于本发明的检查方法的实施的器具、试剂等。

作为器具，可列举例如：试管、微量滴定板、琼脂糖颗粒、胶乳颗粒、纯化用柱、环氧基包覆的载玻片、胶体金包覆的载玻片等。

作为试剂，可列举例如：标记抗体、标准样品(阳性对照、阴性对照)等。

作为标记抗体，可以根据作为检测对象的本发明的抗糖链抗体的同种型，使用各种市售的那些。

作为标准样品，可以使用本发明的抗糖链抗体。本发明的抗糖链抗体可以通过例如使用杂交瘤技术，获得产生与3-唾液酸乳糖糖链或(LN)3糖链结合的抗体的杂交瘤后，对其培养上清液进行纯化而得到。

更具体而言，可以例如如下进行而得到本发明的抗糖链抗体。首先，从淋巴结或脾脏制备淋巴细胞，使其与SPM4-0等骨髓瘤细胞融合而培养。融合之后4周后，提取杂交瘤培养上清液，选择与3-唾液酸乳糖糖链或(LN)3糖链发生反应的培养上清液的杂交瘤。可以从对选择的杂交瘤进行大量培养而成的上清，通过使用了盐析法及蛋白G柱等的亲和纯化法，得到本发明的抗糖链抗体。

实施例

以下，结合实施例对本发明进行详细地说明，但本发明并不限于这些实施例。

参考例1.血清中的抗糖链抗体值

(a)糖链阵列的制作

3′-唾液酸乳糖-PAA(GlycoTech Corporation制，产品目录编号：08-038)及Galβ1→3GlcNAcβ1→3Galβ1→4GlcNAc-PAA(GlycoTech Corporation制，产品目录编号：08-096)，分别用纯化水与Spotting Solution(松浪硝子工业制，产品目录编号：DSP0050)等量混合而成的溶液(以下，也称为“点样溶液”)进行稀释，制作成0.5mg/mL的稀释溶液。

接着，将包含该3′-唾液酸乳糖-PAA稀释溶液1μL，及包含Galβ1→3GlcNAcβ1→3Galβ1→4GlcNAc-PAA的稀释溶液1μL，分别以使其成为直径1mm的方式，滴加至被环氧基硅烷包被的载玻片(Schott AG制，产品目录编号：1066643)上，于室温静置16小时。

之后，将各载玻片用洗涤液(25mM Tris-HCl(pH 7.4)，0.8％NaCl，1％Triton-X 100)洗涤3次，由此除去过量的点样溶液，加入封闭溶液(25mM Tris-HCL(pH 7.4)、0.8％NaCl、1％Triton-X 100、4％BSA)于室温静置1小时，将环氧基硅烷的未反应的环氧基保护起来。像这样，分别制作成包含3′-唾液酸乳糖-PAA的糖链阵列，和包含Galβ1→3GlcNAcβ1→3Galβ1→4GlcNAc-PAA的糖链阵列。这些糖链阵列在使用之前一直冷藏保存。

(b)健康人被检物和胰腺癌患者被检物的血清中的抗糖链抗体值的测定

作为生物样品，通过和光纯药工业从2所医院获取健康人25份被检物，及胰腺癌患者16份被检物(阶段1：1份被检物、阶段2：6份被检物、阶段3：2份被检物、阶段4：7份被检物)的血清。

将各被检物的血清1μL用被检物稀释溶液(25mM Tris-HCL(pH 7.4)、0.8％NaCl、1％Triton-X 100、1mM MnCl2、1mM CaCl2、1％BSA)稀释100倍，得到的稀释液内的80μL(包含相当于血清0.8μL)加至参考例(a)中制作成的各糖链阵列，于室温静置3小时后，用洗涤液洗涤1次。

接着，向添加了用被检物稀释溶液稀释而成的血清的各糖链阵列，加入Cy3(注册商标)荧光染料标记山羊抗人IgG抗体(Jackson ImmunoResearch Laboratories公司制)，于室温静置1小时后，用洗涤液洗涤3次，使用荧光检测器FLA-5100获得荧光图像。

使用Image J(http：//imagej.nih.gov/ij/)测定各斑点的荧光强度，得到了各血清中的荧光强度值。

另外，使用Immunoglobulin G ELISA试剂盒(Immunodiagnostik公司制，产品目录编号：K6510A)，稀释各被检物的血清至200,901倍，测定了相当于血清0.8μL中包含的人IgG量。

将述测定值代入下式，算出血清中的抗糖链抗体(抗3-唾液酸乳糖糖链抗体及抗(LN)3糖链抗体)浓度(抗糖链抗体值)。

(抗糖链抗体值)＝(荧光强度值)/(相当于血清0.8μL中包含的人IgG量)

其结果，如图1所示那样，与健康人相比，在胰腺癌患者中，血清中的抗糖链抗体值明显降低，显示胰腺癌患病和这些抗糖链抗体值相关。

实施例1.以抗3-唾液酸乳糖糖链抗体或抗(LN)3糖链抗体的抗体值作为指标的胰腺癌的检查

将参考例1(b)中求出的胰腺癌患者16份被检物(阶段1：1份被检物、阶段2：6份被检物、阶段3：2份被检物、阶段4：7份被检物)的各血清中的各抗糖链抗体值与截止值相比，将为低于截止值的值的被检物判断为胰腺癌(阳性)。

这里，将截止值设为参考例1中得到的健康人25份被检物的抗糖链抗体值的50％百分比值。抗3-唾液酸乳糖糖链抗体的截止值为63.16(荧光强度值/IgG量(μg))，抗(LN)3糖链抗体的截止值为13.09(荧光强度值/IgG量(μg))。

将示出胰腺癌的每个阶段的结果的图示于图2。

将初期的胰腺癌(阶段1及2)患者被检物判定为阳性(患胰腺癌的可能性高)的比例，在采用了抗3-唾液酸乳糖糖链抗体的抗体值的情况下为6/7，在采用了抗(LN)3糖链抗体的抗体值的情况下为6/7。

比较例1.以已知标记作为指标的胰腺癌的检查

与参考例1同样地，使用市售的试剂盒(ALPCO制，产品目录编号：25-199HU-E01)测定了胰腺癌患者16份被检物(阶段1：1份被检物、阶段2：6份被检物、阶段3：2份被检物、阶段4：7份被检物)的各血清中CA19-9的浓度。

将得到的CA19-9的浓度与截止值相比，将为高于截止值的值的被检物判断为胰腺癌(阳性)。

这里，截止值取一般所用的值(37U/mL)。

将示出胰腺癌的每个阶段的结果的图示于图2。

将初期的胰腺癌(阶段1及2)患者被检物判定为阳性(患胰腺癌的可能性高)的比例为3/7。

从实施例1及比较例1的结果显示，将判定初期的胰腺癌(阶段1及2)的患病的精度，与使用了CA19-9的浓度的情况相比，使用了抗3-唾液酸乳糖糖链抗体或抗(LN)3糖链抗体的抗体值的情况下的一方更高。

参考例2.血清中的抗3-唾液酸乳糖糖链抗体浓度

(a)标准曲线的制作

将生物素标记3′-唾液酸乳糖-PAA 0.5mg溶解于0.8mL的PBS(磷酸缓冲生理盐水)，将总量添加至0.8mL的链霉菌抗生物素蛋白-琼脂糖树脂(Thermo Scientific制，产品目录编号：20353)，于4℃搅拌的同时反应12小时。反应后，将该树脂填充至Poly-Prep(注册商标)空柱(BIO-RAD制，产品目录编号：731-1550)中，制作了3′-唾液酸乳糖-PAA固定柱。将50mg的源自健康人血清的冷冻干燥IgG(和光纯药制，代码编号：289-95341，批次编号：WDN9152)溶解于5mL的包含0.1％Tween-20的PBS中，添加至3′-唾液酸乳糖-PAA固定柱。之后，将柱密闭，于4℃搅拌的同时反应12小时。反应后，将柱释放，洗脱非吸附成分。进一步，将柱用4mL的PBS洗涤后，添加3mM的3′-唾液酸乳糖(东京化成工业制，产品目录编号：S0885)PBS(-)溶液1mL而将柱密闭，于4℃搅拌的同时反应3小时。反应后，将柱释放，洗脱抗3-唾液酸乳糖糖链抗体(人IgG)。进一步，向柱添加3mM的3′-唾液酸乳糖PBS(-)溶液4mL，回收洗脱液后，与上述抗3-唾液酸乳糖糖链抗体洗脱液合并。使用Amicon(注册商标)Ultra 15mL(NMWL of 50kDa，Millipore制，代码编号：UFC905024)对该洗脱液进行超滤，测定IgG浓度后，制成了抗3-唾液酸乳糖糖链抗体的标准品。

向MaxiSorp 96孔板(Thermo Fisher制，产品目录编号：439454)的各孔加入10μg/ml的3′-唾液酸乳糖-PAA 100μL，于室温静置16小时。接着，用300μL的包含1％Triton-X 100的PBS(洗涤液)洗涤各孔3次，加入200μL的包含5％BSA及1％Triton-X 100的PBS，于室温静置1小时。用300μl的洗涤液洗涤各孔之后，添加抗3-唾液酸乳糖糖链抗体溶液(0、6.25、12.5、25、50、100、250ng/ml)各100μL，于室温静置2小时。之后，将各孔用300μL的洗涤液洗涤5次，添稀释至200倍的过氧化物酶标记山羊抗人IgG抗体(SeraCare Life Sciences制，产品目录编号：04-10-06)各100μL，于室温静置1小时后，用300μL的洗涤液洗涤3次，添加过氧化物酶底物液(SeraCare Life Sciences制过氧化物酶底物溶液A(代码编号：5120-0034)及B(代码编号：50-65-00)以等量的比例混合而成)各100μL，于室温静置20分钟。反应后，添加反应停止液(SeraCare Life Sciences制，代码编号：5150-0017)100μL，用微量板读数仪测定了各孔的450nm的吸光度。以纵轴为吸光度，横轴为抗3-唾液酸乳糖糖链抗体溶液量制作了标准曲线。

其结果，确认到抗3-唾液酸乳糖糖链抗体浓度与吸光度为高相关(R2＝0.9949)，利用下式算出了抗3-唾液酸乳糖糖链抗体浓度。

(抗3-唾液酸乳糖糖链抗体浓度)＝372.27x(吸光度)

(b)健康人被检物和胰腺癌患者被检物的血清中的抗3-唾液酸乳糖糖链抗体浓度的测定

作为生物样品，通过和光纯药工业从美国的医院获取健康人13份被检物，及胰腺癌患者55份被检物(阶段1：15份被检物、阶段2：15份被检物、阶段3：11份被检物、阶段4：14份被检物)的血清。

将各被检物的血清用被检物稀释溶液(1％BSA及1％Triton-X 100)稀释至750倍，向预先吸附有3′-唾液酸乳糖-PAA的MaxiSorp 96孔板添加了稀释血清100μL。与参考例(a)所示方法同样地测定了450nm的吸光度，基于标准曲线，算出各血清中的抗3-唾液酸乳糖糖链抗体浓度。

其结果，如图3所示那样，与健康人被检物相比，在胰腺癌患者被检物中，血清中的抗3-唾液酸乳糖糖链抗体的浓度明显降低，显示胰腺癌患病与血清中的抗3-唾液酸乳糖糖链抗体浓度相关。

实施例2.以抗3-唾液酸乳糖糖链抗体浓度作为指标的胰腺癌的检查

基于上述参考例2的结果，以灵敏度(阳性率)(％)为纵轴，以从100％减去特异度(％)而得的值(100％-特异度(％))(假阳性率)为横轴，使用医学统计软件GraphPad Prism制作了ROC曲线，示于图4。曲线下面积(Area Under the Curve，AUC)显示为0.87的高值，将Youden指数作为指标的截止值为50.08μg/mL(灵敏度＝76.36％，特异度＝92.31％)。这里，灵敏度表示将胰腺癌(阶段1、2、3及4)患者被检物判定为阳性的比例，特异度表示将健康人被检物判定为阴性的比例。基于该值进行判定，结果为本检验法为灵敏度76％、特异度92％。

实施例3.基于与已知标记的组合使用的初期的胰腺癌的检查

与参考例2(b)同样地，使用市售的试剂盒(Abnova制，产品目录编号：KA0207)测定了健康人13份被检物，及胰腺癌患者55份被检物(阶段1：15份被检物、阶段2：15份被检物、阶段3：11份被检物、阶段4：14份被检物)的各血清中的CA19-9的浓度。根据得到的测定值算出以Youden指数作为指标的截止值，结果为24.80U/mL。对于初期的胰腺癌(阶段1及2)患者被检物，计数了基于该值判定为阴性(没有患胰腺癌的可能性高)的例数(假阴性判定的例数)。另一方面，将实施例2.中所示的以抗3-唾液酸乳糖糖链抗体浓度作为指标的胰腺癌患病的判定、和以上述CA19-9作为指标的胰腺癌患病的判定中的任一个或两者判定为阳性(患胰腺癌的可能性高)的例作为“阳性”，将以抗3-唾液酸乳糖糖链抗体浓度作为指标的胰腺癌患病的判定、和以CA19-9作为指标的胰腺癌患病的判定中任一方均判定为阴性(没有患胰腺癌的可能性高)的例数作为假阴性判定的例数而计数。

将其结果示于表1。对于初期的胰腺癌(阶段1及2)患者被检物，在以抗3-唾液酸乳糖糖链抗体浓度作为指标的胰腺癌患病的判定和CA19-9作为指标的胰腺癌患病的判定中任一方均判定为阴性(没有患胰腺癌的可能性高)的例数(假阴性判定的例数)，少于以CA19-9单独作为指标的检验中被判定为假阴性的例数。

表1

工业实用性

本发明的检查方法与现有的检查方法相比，能够以更高的精度判定初期胰腺癌患病的可能性。通过测定本发明的抗糖链抗体的抗体值，也能够监测胰腺癌的发展、抗癌剂的有效性。