一种牡丹皮配方颗粒基准物质的制备及质量控制方法与流程

本发明涉及中医药产品
技术领域：
，尤其涉及一种牡丹皮配方颗粒基准物质的制备及质量控制方法。
背景技术：
：牡丹皮，性味苦、辛、微寒，具有清热凉血，活血化瘀的功效，用于热入营血，温毒发斑，吐血衄血，夜热早凉，无汗骨蒸，经闭痛经，跌扑伤痛，痈肿疮毒。牡丹皮大都是以饮片入药，临用前煎汤的服用的方式，其中药饮片质量不稳定不可控，煎煮质量难以保证，服用不方便，不易储存。而中药配方颗粒是以符合炮制规范的优质药材（中药饮片）为原料，采用现代高新技术提取、浓缩、制粒而成的产品系类，保证原有中药的性味特征。但如何保证牡丹皮配方颗粒在失去饮片外观性状的情况下的质量及与家庭煎煮疗效的一致性，目前还没有一个合理的对照，所以我们模仿家庭煎煮的方法，采用冷冻干燥和隔膜真空低温浓缩的方法制备牡丹皮配方颗粒基准物质，以高效液相色谱法建立其hplc特征图谱，作为牡丹皮配方颗粒整理质量控制的参照。技术实现要素：本发明目的就是为了弥补已有技术的缺陷，提供一种牡丹皮配方颗粒基准物质的制备及质量控制方法。本发明是通过以下技术方案实现的：一种牡丹皮配方颗粒基准物质的制备方法，所述牡丹皮配方颗粒基准物质的制备，采用冷冻干燥与隔膜真空低温浓缩相结合的方法制得。所述的牡丹皮配方颗粒基准物质的制备方法，具体包括以下步骤：（1）称取牡丹皮饮片，第一煎加饮片量8-10倍量的水，先浸泡30min，煮沸后再文火煎煮30min，趁热过滤分离出煎煮液，第二煎加6-8倍的量水煎煮30min，滤过，合并煎煮液，混匀，水蒸气蒸馏挥发油2小时，收集蒸馏液，备用；（2）取步骤1所得药液，调节真空度-0.090-0.099，在65℃以下浓缩至1.07-1.09的清膏，备用；（3）将步骤2所得清膏置于一定规格的不锈钢盘中，置于冷冻干燥机中，关闭门板开启制冷，等待隔板温度降至目标温度，调取配方存取的程序，开启真空泵、温度控制和配方开关，进行冷冻干燥，冷冻干燥结束后，关闭真空泵，打开放气阀，泵压达到常压，关闭制冷，迅速打开门板，收集样品，密封。所述冷冻干燥过程中先于-45℃保持8小时，再于-30℃保持4小时，再于-10℃保持3.5小时，再于20℃保持3小时，最后于50℃保持30小时。本发明还提供了一种牡丹皮配方颗粒基准物质的质量控制方法，质量控制采用高效液相色谱法，建立牡丹皮配方颗粒基准物质的hplc特征图谱。所述的质量控制方法，包括以下步骤：（1）取本品粉末0.2g，分别精密称定，置25ml量瓶中，加入甲醇20ml，超声30min，静置放冷，定容，过滤，滤液作为供试品；（2）取芍药苷0.6mg，置于10ml容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，作为参照物；取丹皮酚1.0mg，置于10ml容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，作为参照物；（3）利用高效液相色谱法试验，分别精密吸取供试品溶液、对照溶液5-10µl，注入色谱仪，依据下面色谱条件测定：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相按流动相二元梯度洗脱：时间（min）乙腈（%）0.1%甲酸水（%）079310168410.011783302080603565706535808020流速：1.0ml/min；柱温：30℃；检测波长：254nm；理论板数按丹皮酚峰计算应不低于5000；（4）将步骤3测定结果，进行分析比较，建立牡丹皮配方颗粒基准物质的hplc特征图谱。本发明的优点是：本发明在祖国传统中医药汤剂的基础上，结合现代冷冻干燥、隔膜真空低温浓缩高科技设备、制药技术及高效液相色谱技术，并参考牡丹皮化学成分研究，对牡丹皮进行家庭煎煮工艺研究、hplc特征图谱研究，获得一种可以作为牡丹皮配方颗粒整理质量控制的参照物质。该物质能够帮助实现全成分提取，生产科学、质量可控，可以实现大规模生产的牡丹皮中药配方颗粒与家庭煎煮疗效一致性的评价依据，保证中药配方颗粒质量。该物质具有制备简单，卫生、便于储存。附图说明图1所示为牡丹皮配方颗粒基准物质hplc特征图谱。具体实施方式以下结合具体的实例对本发明的技术方案做进一步说明：实施例1牡丹皮基准物质配方颗粒的制备：（1）称取原料：牡丹皮饮片3400g；（2）将牡丹皮饮片投入煎药壶，煎煮两次，第一次加饮片量9倍的水，浸泡30分钟，煎煮30分钟，第二次加饮片量7倍水，煎煮30分钟，药液滤过，滤液合并，水蒸气蒸馏挥发油2小时，收集蒸馏液，备用；药液泵入浓缩罐，浓缩（真空度－0.090－0.099mpa），浓缩至相对密度为1.07-1.09（65℃）的清膏，备用；（3）将步骤2所得清膏置于一定规格的不锈钢盘中，置于冷冻干燥机中，关闭门板开启制冷，等待隔板温度降至目标温度。调取配方存取的程序，开启真空泵、温度控制和配方开关，进行冷冻干燥，具体操作见表1：表1冻干条件设计段号目标温度℃小时分钟控制1-458002-3040303-1033010420301055030010冷冻干燥结束，关闭真空泵，打开放气阀，泵压达到常压，关闭制冷，迅速打开门板，收集样品，密封；（4）将步骤3所得干膏粉粉碎，过80目筛；先用10克聚乙烯袋装，再用50克全铝袋包装（装量50g/袋），即得成品。实施例2牡丹皮配方颗粒基准物质hplc特征图谱的质量控制方法：（1）取本品粉末、药材粉末、饮片粉末0.2g，分别精密称定，置25ml量瓶中，加入甲醇20ml，超声30min，静置放冷，定容，过滤，滤液作为供试品；（2）取芍药苷0.6mg，置于10ml容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，作为参照物；取丹皮酚1.0mg，置于10ml容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，作为参照物；（3）参照《中国药典》2015年版四部通则0512高效液相色谱法试验，分别精密吸取供试品溶液、对照溶液5-10µl，注入色谱仪，依据下面色谱条件测定；以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相按流动相二元梯度洗脱（如表2）；流速：1.0ml/min；柱温：30℃；检测波长：254nm；理论板数按丹皮酚峰计算应不低于5000；表2流动相洗脱条件时间（min）乙腈（%）0.1%甲酸水（%）079310168410.011783302080603565706535808020（4）将步骤3测定结果，进行分析比较，与牡丹皮配方颗粒基准物质的hplc特征图谱进行对照。如图1所示，表明供试样品中含有牡丹皮成分。实施例3牡丹皮配方颗粒基准物质中水分、浸出物及含量测定测定：对用上述方法制备的3个批次的牡丹皮配方颗粒基准物质中水分、浸出物及含量测定进行检测。水分按常规方法进行检测。浸出物测定按照醇溶性浸出物测定法项下的热浸法（《中国药典》2015年版四部通则2201）测定，用乙醇作溶剂。含量测定依据（《中国药典》2015年版一部）牡丹皮项下测定方法。各项检查结果如表3所示，表明各项指标均符合标准。表3各项检测结果批号水分（%）浸出物（%）丹皮酚含量（%）14.565.533.2224.763.413.0034.260.804.04当前第1页12