一种山梨糖醇液中总糖含量的测定方法与流程

本发明属于糖醇测定，特别涉及一种山梨糖醇液中总糖含量的测定方法。

背景技术：

1、食品添加剂山梨糖醇液是植物淀粉乳或淀粉，经水解、精制得到葡萄糖后，再经氢化、精制、浓缩后制得的。山梨糖醇液中总糖含量是评价其质量优劣的主要依据之一。国标gb1886.187-2016《食品安全国家标准食品添加剂山梨糖醇和山梨糖醇液》中规定了山梨糖醇液中总糖的含量要求，介绍了采用高锰酸钾滴定法测定山梨糖醇液中总糖含量的方法，包括如下步骤：

2、称取20～50g试样(根据含总糖的量确定称样量)，精确至0.0002g，置于500ml磨口锥形瓶中，加100ml盐酸溶液和约80ml水，装上冷凝管加热回流。沸腾开始计时，续沸45min，冷却后，加溴甲酚绿-甲基红指示液，用氢氧化钠溶液中和至溶液ph约为7，移入250ml或500ml容量瓶(根据含总糖的量确定容量瓶的体积)中，加水稀释至刻度，充分摇匀，移取20.00ml，置于250ml锥形瓶中。加40ml费林溶液及几颗玻璃珠，充分摇匀。置于电炉上加热，控制在4min内沸腾，继续煮沸3min，快速冷却至室温，立即用砂芯坩埚进行减压抽滤，用温水反复洗涤烧杯及沉淀使滤液清亮，直至滤液不呈碱性，弃去滤液，洗净抽滤瓶。在砂芯坩埚中分3次加60ml硫酸铁溶液，使氧化亚铜沉淀充分溶解，抽滤，用水洗涤砂芯坩埚数次，收集滤液。用高锰酸钾标准滴定溶液滴定滤液，至微红色为终点。记录实际消耗高锰酸钾标准滴定溶液的体积。最后将相关数据代入公式，计算得到总糖含量值。该方法准确度较高，但是样品处理耗时长，操作过程复杂繁琐，且滴定过程易受颜色干扰。

3、公开号cn109541111a的专利介绍了一种利用高效液相色谱分析方法，先测定溶液中麦芽四糖醇、麦芽三糖醇和麦芽糖醇的含量，然后用这三个含量数据，通过公式计算得到溶液中总糖的含量。该方法需要使用高效液相色谱仪，而且检测条件苛刻，操作困难。

技术实现思路

1、本发明所要解决的技术问题在于，提供一种快速简便、准确度高、重复性好、对检测条件的要求简单的山梨糖醇液中总糖含量的测定方法，该方法减少了试剂消耗，极大地缩短了测定时间，提高了检测效率。

2、本发明是这样实现的，提供一种山梨糖醇液中总糖含量的测定方法，包括如下步骤：

3、步骤一、葡萄糖标准储备液的制备：称取葡萄糖置于容量瓶中，用水溶解并稀释至刻度，摇匀，得到葡萄糖标准储备液；

4、步骤二、山梨糖醇供试品溶液的制备：称取待测量总糖含量的山梨糖醇液置于容量瓶中，用水溶解并稀释至刻度，摇匀，得到山梨糖醇供试品溶液；

5、步骤三、苯酚溶液的制备：称取苯酚置于容量瓶中，用水溶解并稀释至刻度，摇匀，得到苯酚溶液；

6、步骤四、葡萄糖吸光度标准曲线的绘制：选取步骤一制备的不同体积的葡萄糖标准储备液分别放入不同的比色管中，各分别加入步骤三制备的相同体积的苯酚溶液，摇匀，再各加入相同体积的浓硫酸，摇匀，分别置水浴中反应后，取出放至冰水浴中至室温，分别加水至刻度，摇匀，得到不同浓度的葡萄糖标准溶液，然后分别转移至比色皿中，使用分光光度计测量每个浓度的葡萄糖标准溶液的吸光度，将测得的数据绘制葡萄糖吸光度标准曲线，再进一步计算出葡萄糖吸光度与其浓度的线性公式；

7、步骤五、测量山梨糖醇供试品溶液中葡萄糖的吸光度：将步骤二制备的山梨糖醇供试品溶液移取置于比色管中，加入浓盐酸，摇匀，置水浴中反应，取出放至冰水浴中至室温，再加入与步骤四同体积的步骤三制备的苯酚溶液，摇匀，再加入与步骤四同体积的浓硫酸，置水浴中反应后，取出放至冰水浴中至室温，然后转移至比色皿中，使用分光光度计测量山梨糖醇供试品溶液中葡萄糖的吸光度；

8、步骤六、结果计算：根据步骤五测定的吸光度数据，再利用步骤四得到的线性公式计算出步骤五山梨糖醇供试品溶液中葡萄糖的含量，再根据葡萄糖含量与总糖含量的对应公式计算出步骤二的山梨糖醇供试品溶液中总糖的含量。

9、与现有技术相比，本发明的山梨糖醇液中总糖含量的测定方法使用苯酚、盐酸、硫酸作为试剂，利用分光光度法和制备好的葡萄糖标准溶液，绘制葡萄糖标准曲线，在实验相同条件下再利用分光光度法测量山梨糖醇液供试品溶液的吸光度值，再根据葡萄糖含量与总糖含量的对应公式计算出山梨糖醇液中总糖的含量。本发明方法还具有以下特点：

10、1、减少试剂消耗，本发明方法只涉及苯酚、盐酸、硫酸的使用，不需要国标方法中的费林溶液、硫酸铁溶液、高锰酸钾标准滴定溶液等溶液。

11、2、大大缩短检测时间，提高检测效率，国标方法检测一个样品至少2个小时，而本发明的方法只需要45分钟即可完成。

12、3、测定结果可靠，使用本发明的方法测定的山梨糖醇液中的总糖含量结果与国标中的高锰酸钾滴定法测定结果基本一致，偏差基本固定在0.1以内。

技术特征：

1.一种山梨糖醇液中总糖含量的测定方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.如权利要求1所述的山梨糖醇液中总糖含量的测定方法，其特征在于，在所述步骤一中，称取葡萄糖0.3g，置于100ml容量瓶中，用水溶解并稀释至刻度，得到浓度为3mg/ml的葡萄糖标准储备液。

3.如权利要求1所述的山梨糖醇液中总糖含量的测定方法，其特征在于，在所述步骤二中，称取山梨糖醇液10g，置于100ml容量瓶中，用水溶解并稀释至刻度，得到浓度为100mg/ml的山梨糖醇供试品溶液。

4.如权利要求3所述的山梨糖醇液中总糖含量的测定方法，其特征在于，在所述步骤三中，称取苯酚10g，置于100ml容量瓶中，用水溶解并稀释至刻度，得到浓度为10％的苯酚溶液。

5.如权利要求4所述的山梨糖醇液中总糖含量的测定方法，其特征在于，在所述步骤四中，选取步骤一制备的葡萄糖标准溶液储备液各0、0.5ml、1.0ml、2.0ml、4.0ml、5.0ml分别置于不同的比色管中，各分别加入步骤三制备的2.5ml苯酚溶液，再各分别加入2.5ml浓硫酸，得到不同浓度的葡萄糖标准溶液。

6.如权利要求5所述的山梨糖醇液中总糖含量的测定方法，其特征在于，在所述步骤四中，将步骤二制备的山梨糖醇供试品溶液移取1.0ml置于容量比色管中，加入2ml浓盐酸。

7.如权利要求6所述的山梨糖醇液中总糖含量的测定方法，其特征在于，在所述步骤四和步骤五中进行水浴的条件为：水浴温度90℃，水浴时间15分钟。

8.如权利要求6所述的山梨糖醇液中总糖含量的测定方法，其特征在于，在所述步骤四和步骤五中，所述比色皿为1cm比色皿。

技术总结
本发明涉及一种山梨糖醇液中总糖含量的测定方法，使用苯酚、盐酸、硫酸作为试剂，利用分光光度法和制备好的葡萄糖标准溶液，绘制葡萄糖标准曲线，在实验相同条件下再利用分光光度法测量山梨糖醇液供试品溶液中葡萄糖的吸光度值，计算出山梨糖醇液供试品溶液中的葡萄糖含量，再根据葡萄糖含量与总糖含量的对应公式计算出山梨糖醇液中总糖的含量。本发明的方法测定结果可靠有效，不仅节省试剂，而且大幅缩短测定时间，提高检测效率。

技术研发人员：徐菁菁,姚智慧,徐艳艳,余佳,江凯莉,徐波,熊国辉,徐欣
受保护的技术使用者：浙江华康药业股份有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13