一种高灵敏度多通道分子免疫检测装置及其检测方法

文档序号:31356264发布日期:2022-08-31 13:42阅读:来源:国知局

技术特征:
1.一种高灵敏度多通道分子免疫检测装置,其特征在于:包括标记分子、检测基板、倒置样品台、激发光源、倒置荧光显微成像光路模块和成像器件;所述标记分子具有若干种,其由具有不同荧光特性的荧光标记物一一对应标记不同种待测生物分子得到,或者由具有不同荧光特性的荧光标记物一一对应标记不同种检测分子得到,所述检测分子可与所述待测生物分子特异性结合;所述荧光标记物具有长荧光寿命;所述检测基板上修饰有若干种探针分子,不同种探针分子可一一对应与不同种待测生物分子特异性结合,并使标记分子结合固定于所述检测基板的底部,且所述探针分子与所述待测生物分子特异性结合的位点和所述检测分子与所述待测生物分子特异性结合的位点不同;所述倒置样品台用以固定所述检测基板;所述倒置荧光显微成像光路模块与所述倒置样品台、所述激发光源、以及所述成像器件光路连接;所述倒置荧光显微成像光路模块用以将所述激发光源发出的光线反射至所述检测基板,并使结合固定于所述检测基板上的标记分子的荧光标记物激发荧光,激发的荧光经过所述倒置荧光显微成像光路模块到达所述成像器件,并由所述成像器件形成图像。2.根据权利要求1所述的高灵敏度多通道分子免疫检测装置,其特征在于:所述荧光标记物为上转换光致发光纳米材料或时间分辨荧光微球。3.根据权利要求2所述的高灵敏度多通道分子免疫检测装置,其特征在于:所述激发光源为波长为808nm、980nm或365nm的led灯源。4.根据权利要求2所述的高灵敏度多通道分子免疫检测装置,其特征在于:所述倒置显微成像光路模块包括二向色镜、物镜以及滤光装置,所述二向色镜将光路分成两路,其中一路光路中,所述激发光源、所述二向色镜、所述物镜与所述倒置样品台依次光路连接,另一路光路中,所述倒置样品台、所述物镜、所述二向色镜、所述滤光装置以及所述成像器件依次光路连接;所述滤光装置用于单一波长光束的筛选。5.根据权利要求4所述的高灵敏度多通道分子免疫检测装置,其特征在于:所述倒置显微成像光路模块还包括小孔光阑以及准直透镜,所述激发光源、所述小孔光阑、所述准直透镜与所述二向色镜依次光路连接。6.根据权利要求4所述的高灵敏度多通道分子免疫检测装置,其特征在于:所述滤光装置包括若干可切换设置的滤光片,且每一所述滤光片可筛选滤出特定工作波长的光束。7.根据权利要求6所述的高灵敏度多通道分子免疫检测装置,其特征在于:所述倒置显微成像光路模块还包括双胶合透镜,所述成像器件包括面阵ccd相机以及图像显示设备;所述二向色镜、所述滤光装置、所述双胶合透镜与所述面阵ccd相机依次光路连接,所述图像显示设备与所述面阵ccd相机电性连接。8.根据权利要求1所述的高灵敏度多通道分子免疫检测装置,其特征在于:所述检测基板为96孔板。9.一种高灵敏多通道分子免疫检测方法,其特征在于,应用权利要求1-8任一所述的高灵敏度多通道分子免疫检测装置进行检测,其包括以下具体操作步骤:s1、对应不同种待测生物分子,选用具有不同荧光特性的荧光标记物,建立荧光特性与待测生物分子的种类对应关系库;s2、在检测基板上修饰若干种与待测生物分子一一对应特应性结合的探针分子;
s3、使用具有不同荧光特性的荧光标记物一一对应与待测生物分子进行标记反应,得到若干种标记分子;将若干种标记分子加入至检测基板,检测基板上的探针分子对应与待测生物分子进行杂交反应,以使标记分子固定于检测基板;或者,使用具有不同荧光特性的荧光标记物一一对应与检测分子进行标记反应,得到若干种标记分子;将待测生物分子与若干种标记分子加入至检测基板,检测基板上的探针分子对应与待测生物分子、标记分子进行杂交反应,以使标记分子结合固定于检测基板;s4、将步骤s3得到的杂交反应后的检测基板固定于所述倒置样品台,通过选用特定波长的激发光源进一步经所述倒置荧光显微光路模块以及所述成像器件对结合固定的标记分子上的荧光标记物进行检测和成像;s5、根据测得的荧光标记物的荧光特性,结合步骤s1建立得到的荧光特性和待测生物分子的种类对应关系库,识别待测生物分子的种类,并根据测得的荧光标记物的数量计算得到待测分子的浓度。

技术总结
本发明涉及一种高灵敏度多通道分子免疫检测装置及其检测方法。检测装置包括标记分子、检测基板、倒置样品台、激发光源、倒置荧光显微成像光路模块和成像器件;本发明在检测基板上修饰若干种探针分子,并对应使用具有不同荧光特性的荧光标记物标记得到不同标记分子,标记分子经过反应固定于所述检测基板后经激发光源激发荧光反应,经荧光显微成像后利用荧光特性与待测生物分子的对应关系,实现对待测生物分子的检测,并可单次实现对多通道检测,有效提高检测效率;另外,具有长荧光寿命的荧光标记物在短寿命荧光完全衰减后仍能稳定激发荧光,可有效地避免生物样品本身的自发荧光、散射光以及背景荧光的干扰,在免疫检测中提高信噪比以及灵敏度。提高信噪比以及灵敏度。提高信噪比以及灵敏度。


技术研发人员:吉雁鸿 朱珊珊
受保护的技术使用者:华南师范大学
技术研发日:2022.04.26
技术公布日:2022/8/30
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