一种日化产品中桉叶素含量的测定方法与流程

1.本发明涉及精细化工产品检测技术领域，尤其涉及一种日化产品中桉叶素含量的测定方法。


背景技术：

2.日化产品包括香皂、洗手液、沐浴剂、洗衣液、洗衣皂、洗发露、护发素等产品，主要用于人体或家庭的清洁及护理。人们对日化产品的抗抑菌性能的关注度日益提高，随之出现了种类繁多的抗抑菌型日化产品。日化产品中常用的抗抑菌成分一般为苯扎氯铵类、含氯类、酚类、胍类等化学成分。与这些化学成分相比，植物类抗抑菌物质凭借其纯天然无刺激这一特点有着得天独厚的优势。桉叶油正属于这一类物质，它是一种抗菌谱广、抗菌活性强、临床疗效好、不良反应少而轻微的天然抗菌药物。
3.桉叶油提取于桉树叶，是目前世界上由树叶提取天然精油中最多的一种，具有抗菌、抗氧化、杀虫等功效，而且还具有良好的表面活性。桉叶油用于日化产品中，主要用来增加产品的抗抑菌等功效。桉叶素为双环单萜化合物，是桉叶油中的主要活性成分，是桉叶油各种功效的主要贡献者。
4.目前，有文献报道采用气质联用色谱法测定桉叶油成分，还有采用气相色谱法对糖果或者药品中桉叶素含量进行测定，还没有对日化产品中桉叶素含量的测定的相关报道。因此，有必要提出一种测定日化产品中桉叶素含量的方法。


技术实现要素：

5.本发明的目的在于提供一种日化产品中桉叶素含量的测定方法，本发明的测定方法能够准确测量日化产品中桉叶素的含量，特异性强，精密度好，准确度高。
6.为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
7.本发明提供了一种日化产品中桉叶素含量的测定方法，包括以下步骤：
8.(1)将待测样品用乙醇溶液溶解后，采用石油醚萃取，将石油醚层洗涤后与无水硫酸钠混合，过滤，得到样品溶液；
9.(2)对不同浓度桉叶素的标准溶液进行气相色谱分析，以桉叶素浓度为横坐标，测定得到的峰面积为纵坐标绘制桉叶素的标准曲线；
10.(3)将步骤(1)中的样品溶液进行气相色谱分析，将得到的峰面积代入步骤(2)得到的标准曲线中，获得待测样品中桉叶素的含量。
11.进一步地，步骤(1)中的待测样品为洗衣皂、洗手液、沐浴剂、洗衣液、香皂、洗发露、护发素中的一种。
12.进一步地，步骤(1)中待测样品、乙醇溶液、无水硫酸钠的用量比例为8～12g：80～120ml：8～12g。
13.进一步地，步骤(1)中所述乙醇溶液的体积浓度为40～60％，所述石油醚为沸程30～60℃的石油醚。
14.进一步地，步骤(1)中所述石油醚萃取的次数为2～4次，每次萃取使用的石油醚的量为20～30ml。
15.进一步地，步骤(1)中采用体积浓度为40～60％的乙醇溶液进行洗涤，洗涤次数为2～4次，每次洗涤使用的乙醇溶液的量为20～30ml。
16.进一步地，步骤(1)中采用孔径为0.45μm的有机膜进行过滤。
17.进一步地，所述气相色谱分析的条件为：进样口温度220～280℃；检测器温度260～300℃；柱温30～70℃，保持4～6min，以2℃/min升至40～80℃，保持4～6min，再以10℃/min升至230～250℃，保持12～18min；分流比3～8:1；载气为高纯氮气；柱流量0.5～2ml/min。
18.进一步地，所述气相色谱中所用的色谱柱为kb-wax型毛细管色谱柱。
19.相比于现有技术，本发明的有益效果为：
20.1.本发明包含样品的前处理，采用石油醚将包括桉叶素在内的石油醚可溶物萃取出来，有效去除了待测样品对测定结果的干扰，分析结果更准确；
21.2.本发明样品前处理过程中包含采用无水硫酸钠除水的过程，有效保护了色谱柱。
22.3.本发明采用外标法对日化产品样品中桉叶素进行定量测定，方法特异性强，测定结果相对标准偏差为2.90％，重复性好，精密度好，采用加标回收法验证方法准确度，得出平均回收率为98.20％，准确度高。
附图说明
23.图1为桉叶素标样色谱图；
24.图2为实施例1样品中桉叶素分析色谱图；
25.图3为实施例2样品中桉叶素分析色谱图；
26.图4为实施例3样品中桉叶素分析色谱图；
27.图5为实施例4样品中桉叶素分析色谱图。
具体实施方式
28.本发明提供了一种日化产品中桉叶素含量的测定方法，包括以下步骤：
29.(1)将待测样品与乙醇溶液溶解后，采用石油醚萃取，将石油醚层用乙醇溶液洗涤，然后将石油醚层与无水硫酸钠混合，过滤，得到样品溶液；
30.(2)对不同浓度桉叶素的标准溶液进行气相色谱分析，以桉叶素浓度为横坐标，测定得到的峰面积为纵坐标绘制桉叶素的标准曲线；
31.(3)将步骤(1)中的样品溶液进行气相色谱分析，将得到的峰面积代入步骤(2)得到的标准曲线中，获得待测样品中桉叶素的含量。
32.在本发明中，将待测样品与乙醇溶液溶解后，采用石油醚萃取，将石油醚层洗涤后与无水硫酸钠混合，过滤，得到样品溶液。在本发明中，所述待测样品为洗衣皂、洗手液、沐浴剂、香皂、洗衣液、洗发露、护发素中的一种。
33.在本发明中，所述待测样品、乙醇溶液、无水硫酸钠的用量比例为8～12g： 80～120ml：8～12g，优选为9～11g：90～110ml：9～11g，进一步优选为9.5～10.5g： 95～105ml：
9.5～10.5g。
34.在本发明中，所述乙醇溶液的体积浓度为40～60％，优选为45～55％，进一步优选为48～52％；所述石油醚优选为沸程30～60℃的石油醚。
35.在本发明中，所述石油醚萃取的次数为2～4次，优选为3次；每次萃取使用的石油醚的量为20～30ml，优选为22～28ml，进一步优选为24～26ml。
36.在本发明中，所述洗涤的具体方法为：采用乙醇溶液进行洗涤，所述乙醇溶液的体积浓度为40～60％，优选为45～55％，进一步优选为48～52％；所述洗涤的次数为2～4次，优选为3次；每次洗涤使用的乙醇溶液的量为 20～30ml，优选为22～28ml，进一步优选为24～26ml。
37.在本发明中，所述步骤(1)中优选采用有机膜进行过滤，所述有机膜的过滤孔径大小优选为0.45μm。
38.在本发明中，对不同浓度桉叶素的标准溶液进行气相色谱分析，以桉叶素浓度为横坐标，测定得到的峰面积为纵坐标绘制桉叶素的标准曲线。
39.在本发明中，将步骤(1)中的样品溶液进行气相色谱分析，将得到的峰面积代入步骤(2)得到的标准曲线中，获得待测样品中桉叶素的含量。
40.在本发明中，所述气相色谱分析的条件为：进样口温度220～280℃，优选为230～270℃，进一步优选为240～260℃；检测器温度260～300℃，优选为270～290℃，进一步优选为275～285℃；柱温30～70℃，优选为40～60℃，进一步优选为45～55℃；保持4～6min，优选为5min；以2℃/min升至40～80℃，优选为50～70℃，进一步优选为55～65℃；保持4～6min，优选为5min；再以 10℃/min升至230～250℃，优选为235～245℃，进一步优选为238～242℃；保持12～18min，优选为13～17min，进一步优选为14～16min；分流比3～8:1，优选为4～7:1，进一步优选为5～6:1；载气优选为高纯氮气；柱流量 0.5～2ml/min，优选为0.8～1.5ml/min，进一步优选为1.0～1.2ml/min。
41.在本发明中，所述气相色谱中所用的色谱柱优选为kb-wax型毛细管色谱柱。
42.下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
43.实施例1
44.本实施例提供了一种洗衣皂中桉叶素含量的测定方法，包括以下步骤：
45.1)样品的制备：用刀或者粉碎器将洗衣皂粉碎，充分混匀；
46.2)样品的前处理：称取10g制备好的洗衣皂，使用100ml体积浓度为 50％的乙醇溶液溶解并定量转移至分液漏斗中。用沸程为30～60℃的石油醚萃取三次，每次石油醚的用量为25ml，合并石油醚层，用25ml体积浓度为50％的乙醇溶液洗涤，重复洗涤三次，弃去乙醇溶液层。将石油醚层转移至100ml容量瓶中，定容，加入10g无水硫酸钠，用孔径大小为0.45μm的有机膜过滤，得到样品溶液；
47.3)标准溶液的配制：称取0.1056g桉叶素至100ml容量瓶内，用沸程为30～60℃石油醚溶解定容。再分别稀释得到10.56mg/l、21.12mg/l、 42.24mg/l、63.36mg/l、105.6mg/l的桉叶素标准溶液；
48.4)气相色谱条件：进样口温度250℃；检测器温度280℃；柱温50℃，保持5min，以2℃/min升至60℃，保持5min，再以10℃/min升至240℃，保持15min；分流比5:1；载气为高纯
氮气；柱流量1ml/min；
49.5)标准曲线的建立：采用气相色谱对步骤3)配制的标准溶液进行分析，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线，标准曲线公式为：y＝ 3.0103x+6.2703，r2＝0.9996；
50.6)对样品溶液进行检测：采用气相色谱对步骤2)配制的样品溶液进行分析，得到峰面积，将峰面积代入标准曲线的回归方程中，得到样品溶液中桉叶素的浓度，进而得出洗衣皂中桉叶素的含量，单位为毫克/千克(mg/kg)。
51.实施例2
52.本实施例提供了一种洗手液中桉叶素含量的测定方法，包括以下步骤：
53.1)样品的前处理：称取10g洗手液，使用100ml体积浓度为45％的乙醇溶液溶解并定量转移至分液漏斗中。用沸程为30～60℃的石油醚萃取两次，每次石油醚的用量为30ml，合并石油醚层，用30ml体积浓度为45％的乙醇溶液洗涤，重复洗涤三次，弃去乙醇溶液层。将石油醚层转移至100ml 容量瓶中，定容，加入10.5g无水硫酸钠，用有机膜过滤，得到样品溶液；
54.2)标准溶液的配制：称取0.1082g桉叶素至100ml容量瓶内，用沸程为 30℃～60℃石油醚溶解定容。再分别稀释得到10.82mg/l、21.64mg/l、 43.28mg/l、64.92mg/l、108.2mg/l的桉叶素标准溶液；
55.3)气相色谱条件：进样口温度265℃；检测器温度295℃；柱温40℃，保持5min，以2℃/min升至50℃，保持5min，再以10℃/min升至250℃，保持14min；分流比4:1；载气为高纯氮气；柱流量1.5ml/min；
56.4)标准曲线的建立：采用气相色谱对步骤3)配制的标准溶液进行分析，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线，标准曲线公式为：y＝ 3.0506x+6.0641，r2＝0.9997；
57.5)对样品溶液进行检测：采用气相色谱对步骤2)配制的样品溶液进行分析，得到峰面积，将峰面积代入标准曲线的回归方程中，得到样品溶液中桉叶素的浓度，进而得出洗手液中桉叶素的含量，单位为毫克/千克(mg/kg)。
58.实施例3
59.本实施例提供了一种沐浴剂中桉叶素含量的测定方法，包括以下步骤：
60.1)样品的前处理：称取10g沐浴剂，使用112ml体积浓度为48％的乙醇溶液溶解并定量转移至分液漏斗中。用沸程为30～60℃的石油醚萃取四次，每次石油醚的用量为20ml，合并石油醚层，用20ml体积浓度为48％的乙醇溶液洗涤，重复洗涤四次，弃去乙醇溶液层。将石油醚层转移至100ml 容量瓶中，定容，加入10.0g无水硫酸钠，用有机膜过滤，得到样品溶液；
61.2)标准溶液的配制：称取0.1015g桉叶素至100ml容量瓶内，用沸程为 30℃～60℃石油醚溶解定容。再分别稀释得到10.15mg/l、20.30mg/l、 40.60mg/l、60.90mg/l、101.50mg/l的桉叶素标准溶液；
62.3)气相色谱条件：进样口温度260℃；检测器温度270℃；柱温40℃，保持5min，以2℃/min升至70℃，保持5min，再以10℃/min升至240℃，保持16min；分流比5:1；载气为高纯氮气；柱流量1.2ml/min；
63.4)标准曲线的建立：采用气相色谱对步骤3)配制的标准溶液进行分析，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线，标准曲线公式为：y＝ 3.0481x+5.8457，r2＝0.9999；
64.5)对样品溶液进行检测：采用气相色谱对步骤2)配制的样品溶液进行分析，得到峰面积，将峰面积代入标准曲线的回归方程中，得到样品溶液中桉叶素的浓度，进而得出沐浴剂中桉叶素的含量，单位为毫克/千克(mg/kg)。
65.实施例4
66.本实施例提供了一种洗衣液中桉叶素含量的测定方法，包括以下步骤：
67.1)样品的前处理：称取10.2g洗衣液，使用95ml体积浓度为52％的乙醇溶液溶解并定量转移至分液漏斗中。用沸程为30～60℃的石油醚萃取三次，每次石油醚的用量为30ml，合并石油醚层，用28ml体积浓度为55％的乙醇溶液洗涤，重复洗涤三次，弃去乙醇溶液层。将石油醚层转移至100ml 容量瓶中，定容，加入10.2g无水硫酸钠，用有机膜过滤，得到样品溶液；
68.2)标准溶液的配制：称取0.1006g桉叶素至100ml容量瓶内，用沸程为 30℃～60℃石油醚溶解定容。再分别稀释得到10.06mg/l、20.12mg/l、40.24mg/l、60.36mg/l、100.60mg/l的桉叶素标准溶液；
69.3)气相色谱条件：进样口温度250℃；检测器温度260℃；柱温40℃，保持6min，以2℃/min升至50℃，保持5min，再以10℃/min升至240℃，保持15min；分流比5:1；载气为高纯氮气；柱流量0.9ml/min；
70.4)标准曲线的建立：采用气相色谱对步骤3)配制的标准溶液进行分析，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线，标准曲线公式为：y＝ 3.0888x+3.7589，r2＝0.9996；
71.5)对样品溶液进行检测：采用气相色谱对步骤2)配制的样品溶液进行分析，得到峰面积，将峰面积代入标准曲线的回归方程中，得到样品溶液中桉叶素的浓度，进而得出洗衣液中桉叶素的含量，单位为毫克/千克(mg/kg)。
72.实验例
73.实施例1～4的测定方法检测桉叶素含量的分析色谱图见图2～5，图1为桉叶素标准样品色谱图。采用实施例1的测定方法对精密度和回收率进行测定，对实施例1中的洗衣皂平行测定6次，测定结果见表1，由表1可知，测定结果相对标准偏差为2.90％，重复性好，精密度高。
74.表1：6次重复实验测得的桉叶素含量
[0075][0076]
采用实施例1的测定方法验证方法准确度，进行3次重复实验，采用加标回收法计
算回收率，在样品中加入已知量的桉叶素，测定桉叶素总量，扣除样品中桉叶素的量，从而得出桉叶素的加标回收率。得出平均回收率为 98.20％，结果见表2。
[0077]
表2：加标回收法测得桉叶素的回收率
[0078][0079][0080]
由以上实施例可知，本发明提供了一种日化产品中桉叶素含量的测定方法，本发明的测定方法能够准确测量日化产品中桉叶素的含量，特异性强，精密度好，准确度高。
[0081]
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。