一种土壤和水中4-氟-N-异丙基苯胺的HPLC-MS/MS检测方法与流程

本发明属于环境检测领域，具体涉及一种土壤和水中4-氟-n-(1-甲基乙基)苯胺的hplc-ms/ms检测方法。

背景技术：

1、4-氟-n-异丙基苯胺，又名4-氟-n-(1-甲基乙基)苯胺，分子式为c9h12fn，分子量153.2，cas号为70441-63-3。4-氟-n-异丙基苯胺是一种重要的有机合成中间体和农药中间体，其通常可以用于合成氟噻草胺，氟噻草胺是一种芳氧酰胺类除草剂，其主要通过抑制细胞分裂与生长来发挥作用，具有除草活性高、杀草谱广、适用作物宽、高度安全等优点，可有效防除一年生禾本科杂草及阔叶杂草的芽前、芽后早期除草。4-氟-n-异丙基苯胺结构式如下所示：

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3、由于土壤基质和水体环境的吸附作用和物理化学吸收作用，苯胺类物质进入土壤或水体环境后极易在土壤中累积，对环境造成持久危害。污染土壤基质和水体环境复杂，干扰物质种类多而目标物质含量低，对分析检测手段要求极高。目前，4-氟-n-异丙基苯胺公开的含量测定方法为气相色谱法，高效液相色谱串联质谱的检测方法未见文献报道。

4、企业标准“q/frg 067-20214-氟-n-异丙基苯胺”公开了4-氟-n-异丙基苯胺的气相色谱检测方法，具体公开了“采用agi1ent6890或7890a气相色谱仪或等同色谱仪；fid检测器，色谱柱：db-624(30×0.32m×1.80um)或类似色谱柱；载气：高纯氮；恒流：1.0ml/min；氢气流量：50ml/min；空气流量：300ml/min；分流比：100：1；化室温度：260℃；检测室温度：300℃；柱温：50℃保持1min然后以12℃/min的速度升温至260℃，保温10min。直接进样10ul进行分析，面积归一法计算含量”。该方法用于4-氟-n-异丙基苯胺纯品物质的检测，而针对环境土壤或水体中4-氟-n-异丙基苯胺的检测存在灵敏度不够高，抗干扰能力差，稳定性无法保证的问题。

5、因此，建立一种准确高效、环境友好的土壤和水体中4-氟-n-异丙基苯胺的检测方法，对4-氟-n-异丙基苯胺生产应用地区的环境监测以及后续治理都具有十分重要的意义。

技术实现思路

1、本发明的目的是克服现有技术4-氟-n-异丙基苯胺的检出方法灵敏度较低、稳定性较差，无法对环境土壤和水体中的4-氟-n-异丙基苯胺进行检测的问题，提供一种灵敏度高，专属性强，检出限为ng/l级别的土壤和水中4-氟-n-异丙基苯胺的hplc-ms/ms检测方法。

2、本发明的目的将通过如下技术方案达到：

3、一种土壤和水中4-氟-n-异丙基苯胺的hplc-ms/ms检测方法，检测步骤如下：

4、1.一种土壤和水中4-氟-n-异丙基苯胺的hplc-ms/ms检测方法，其特征在于，检测步骤如下：

5、(1)标准工作溶液的制备：精密称取0.10225g的4-氟-n-异丙基苯胺标样于100ml容量瓶中，用乙腈溶解并定容刻度，摇匀，配制得到浓度为1000.00mg/l的标准储备液；吸取适量标准储备液，用乙腈逐级稀释配制成浓度为0.50～20.0μg/l的系列标准工作溶液。

6、(2)标准曲线的绘制：设置hplc-ms/ms仪器操作条件，吸取5μl步骤(1)中的系列标准工作溶液注入液质联用仪进行测定，以4-氟-n-异丙基苯胺的浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制校正曲线和线性回归方程。

7、(3)土壤样品溶液的制备：采集待测土壤样品，依次进行风干、研磨和过筛处理，称取10.0g处理好的待测土壤样品于250ml锥形瓶中，加入50ml乙腈振荡后静置，取上清液用0.22μm滤膜过滤即得；

8、(4)水体样品溶液的制备：吸取10ml待测水体样品，用0.22μm滤膜过滤即得。

9、(5)样品的测定和计算：设置hplc-ms/ms仪器操作条件，分别吸取5μl待测土壤样品溶液和待测水体样品溶液进行测定，记录色谱图，按外标法计算样品中4-氟-n-异丙基苯胺的含量。

10、优选为，系列标准工作溶液的浓度为0.50、1.00、2.00、4.00、8.00、10.0、20.0μg/l。

11、hplc-ms/ms仪器操作条件中，高效液相色谱以eclipse plus c18 rrhd为色谱柱，规格为50×2.1mm，1.8μm。高效液相色谱的分析条件为：流速为0.3ml/min；流动相由乙腈和0.1％甲酸水组成，乙腈和0.1％甲酸水的体积比为80:20；柱温为30℃。

12、hplc-ms/ms仪器操作条件中，质谱的离子源为ajs esi源，正离子模式。

13、质谱的离子源参数为：干燥气：n2；干燥气温度：300℃；干燥气流速：5l/min；鞘气：n2；鞘气温度：250℃；鞘气流速：11l/min；雾化器压力(nebulizer)：45psi；喷嘴电压：+500/-500v；毛细管电压(capillary)：+3500/-3500v。

14、质谱的监测模式为mrm。

15、mrm离子采集参数如下：

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17、*为定量离子。

18、本方法4-氟-n-异丙基苯胺浓度在0.50μg/l～20μg/l范围时，峰面积y与浓度x之间呈线性关系，线性回归方程为y＝55256.42x-299.60，线性相关系数r2＝0.9996。

19、本方法对4-氟-n-异丙基苯胺的检出限为4.08ng/l，定量限为10.89ng/l。

20、本发明土壤样品的采集参照hj/t166-2004《土壤环境监测技术规范》中的规定进行采样。一般情况下采集混合样品，根据实际污染情况(及时发现的事故：抛洒0-5cm、爆炸0-20cm；未及时发现的长期泄漏：城市或厂区土壤0-30和30-60cm分两层采样、农田土壤0-20cm、果林土壤0-60cm)，选择合适的深度采集土壤。区域内的采集点为5～20个。各点采集的土壤均匀混合后用四分法弃取，保留1～2kg土壤样品。

21、本发明水体样品的采集参照hj494-2009《水质采样技术指导》中对不同采样类型的规定进行采样，如开阔河流的采样，水库和湖泊的采样，地下水的采样，污水的采样等。

22、本发明的有益效果是：

23、1、本发明的分析方法验证学试验结果表明：4-氟-n-异丙基苯胺的进样浓度在0.50μg/l～20.0μg/l范围内呈良好的线性关系，线性方程为

24、y＝55256.42x-299.60，线性相关系数r2＝0.9996；土壤中的平均添加回收率范围为82.4％～83.2％，水中的平均添加回收率范围为86.1％～97.0％；精密度rsd％为0.3645％，目标峰的rsdr.t.为0.65％，rsdarea为3.19％。本发明具有操作简便、重复性好、分离效果好，准确度和精密度高等优点。

25、2、本发明克服了以往用气相色谱法的灵敏度低，抗干扰能力差，稳定性无法保证的问题，本发明检出限为4.08ng/l，定量限为10.89ng/l，检测灵敏度高，在土壤或水体环境中4-氟-n-异丙基苯胺含量较低时仍能达到检测目的；目标峰在0.5min出峰，检测效率高，仪器运行时间短，检测成本低，该方法既适用于生产应该过程土壤和水体环境中氯醇亚胺的定性定量检测，也适用于实验室的检测分析。

26、3、本发明提供了一种土壤和水中4-氟-n-异丙基苯胺的hplc-ms/ms检测方法，该方法能很好地检测出环境土壤和水体中4-氟-n-异丙基苯胺的含量，对土壤和水体环境保护有重要意义。