一种蛋黄卵磷脂中快速检测胆固醇含量的方法与流程

本发明属于现代检验，具体涉及一种蛋黄卵磷脂中快速检测胆固醇含量的方法。

背景技术：

1、卵磷脂作为一种重要的磷脂混合物，由于其出色的生理功能，包括抗氧化、改善脂质代谢、防止脂肪肝、增强免疫功能、促进神经传导等，使其在医药、食品、化妆品等行业具有广泛的用途。

2、医药领域生产卵磷脂，常采用鸡蛋的卵黄作为原料，由于鸡蛋中含有较高含量的胆固醇，而相关研究表明胆固醇含量过高将引起高血脂并进而引发一系列心血管疾病，所以控制卵磷脂中胆固醇的含量至关重要，因此中国药典(规定卵磷脂中胆固醇含量小于2％)等相关标准也对卵磷脂中胆固醇的含量进行了相关的规定。

3、蛋黄卵磷脂在提取纯化过程中会通过溶剂a等溶剂将杂质胆固醇洗脱，目前对于杂质胆固醇的含量检测，广泛使用的方法主要有气相色谱法、薄层色谱法以及高效液相色谱法等，但这些方法均存在一定的局限性，如需要使用特殊的检测设备，检测时间长，且需要有经验的人员进行操作，所以难于推广使用，因此建立一种快速、方便的测定胆固醇含量的方法是至关重要的。

4、2020版中国药典中仅仅以显色反应进行胆固醇的鉴别，但并未涉及不同浓度下蛋黄卵磷脂中胆固醇含量的快速测定，因此本专利在中国药典中胆固醇的鉴别反应方法原理基础上，通过显色后不同的颜色深浅对比能快速检测出蛋黄卵磷脂中胆固醇的含量。

技术实现思路

1、本发明的目的在于，提供一种蛋黄卵磷脂中快速检测胆固醇含量的方法，此法仅通过加入二氯甲烷、乙酸酐、浓硫酸等试剂，并通过判断溶液颜色深浅情况即可快速粗略地检测出蛋黄卵磷脂中胆固醇的大致含量范围。

2、为了解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案：

3、一种蛋黄卵磷脂中快速检测胆固醇含量的方法，包括：将样品进行溶解，之后加入乙酸酐、浓硫酸进行显色反应，摇匀后进行颜色比对，通过颜色深浅情况即可快速检测样品中的胆固醇含量范围。

4、优选的，样品使用二氯甲烷进行溶解。

5、优选的，样品与二氯甲烷的体积质量比为0.25g：25ml，溶解后获得样品溶液。

6、蛋黄卵磷脂粗品或成品样品和二氯甲烷的比例为1：100。

7、优选的，显色反应中，所述样品溶液与乙酸酐、浓硫酸的体积比为2：1：0.1，浓硫酸的用量为1～2滴。

8、优选的，通过与胆固醇标准溶液的显色反应进行颜色比对，或者根据胆固醇标准溶液的显色反应颜色制成的标准比色卡进行颜色比对，快速检测样品中的胆固醇含量范围。

9、优选的，所述胆固醇标准溶液的显色反应中，所述胆固醇标准溶液与乙酸酐的体积比为2：1：0.1，浓硫酸的用量为1～2滴。

10、优选的，胆固醇标准溶液或卵磷脂样品溶液的加入体积为2ml，乙酸酐体积为1ml，硫酸体积为0.1ml，即大概1～2滴。

11、优选的，所述胆固醇标准溶液的制备包括：取胆固醇标准品适量，加二氯甲烷溶解并分别配制成0.05mg/ml、0.1mg/ml、0.2mg/ml的所述胆固醇标准溶液。

12、优选的，通过颜色深浅情况快速检测样品中的胆固醇含量范围的具体操作包括：

13、若样品溶液的显色反应颜色深于0.2mg/ml胆固醇标准溶液的显色反应颜色，则样品中胆固醇含量大于2％；

14、若样品溶液的显色反应颜色深于0.1mg/ml胆固醇标准溶液的显色反应颜色，但浅于0.2mg/ml胆固醇标准溶液的显色反应颜色，则样品中胆固醇含量为1～2％；

15、若样品溶液的显色反应颜色深于0.05mg/ml胆固醇标准溶液的显色反应颜色，但浅于0.1mg/ml胆固醇标准溶液的显色反应颜色，则样品中胆固醇含量为0.5～1％；

16、若样品溶液的显色反应颜色浅于0.05mg/ml胆固醇标准溶液的显色反应颜色，则样品中胆固醇含量小于0.5％。

17、优选的，还包括对快速检测结果进行色谱法佐证。

18、优选的，所述色谱法佐证包括如下步骤：

19、s1、将蛋黄卵磷脂中间体用溶剂a分别多次洗涤精制除胆固醇去得到卵磷脂粗品以及后续的蛋黄卵磷脂成品，做为样品；

20、s2、将样品首先用薄层色谱法粗略判断其含量，再用气相色谱法进行检验，得到每个样品较为准确的胆固醇含量；

21、s3、将色谱结果与快速检测结果进行比对，判断快速检测结果的准确性。

22、优选的，s1中所述的溶剂a为丙酮溶液，做为洗脱剂，用于除去蛋黄卵磷脂中的胆固醇，进而纯化胆固醇。

23、与现有技术相比较，实施本发明，具有如下有益效果：

24、本发明提供了一种蛋黄卵磷脂中快速检测胆固醇含量的方法，该方法简单易行、操作方便、可以快速检测到胆固醇的大致含量范围，可以更好的解决在医药以及其他领域中需要快速检测蛋黄卵磷脂中胆固醇含量限度的问题。

技术特征：

1.一种蛋黄卵磷脂中快速检测胆固醇含量的方法，其特征在于，包括：将样品进行溶解，之后加入乙酸酐、浓硫酸进行显色反应，摇匀后进行颜色比对，通过颜色深浅情况即可快速检测样品中的胆固醇含量范围。

2.如权利要求1所述蛋黄卵磷脂中快速检测胆固醇含量的方法，其特征在于，样品使用二氯甲烷进行溶解。

3.如权利要求2所述蛋黄卵磷脂中快速检测胆固醇含量的方法，其特征在于，样品与二氯甲烷的体积质量比为0.25g：25ml，溶解后获得样品溶液。

4.如权利要求3所述蛋黄卵磷脂中快速检测胆固醇含量的方法，其特征在于，显色反应中，所述样品溶液与乙酸酐、浓硫酸的体积比为2：1：0.1。

5.如权利要求1所述蛋黄卵磷脂中快速检测胆固醇含量的方法，其特征在于，通过与胆固醇标准溶液的显色反应进行颜色比对，或者根据胆固醇标准溶液的显色反应颜色制成的标准比色卡进行颜色比对，快速检测样品中的胆固醇含量范围。

6.如权利要求5所述蛋黄卵磷脂中快速检测胆固醇含量的方法，其特征在于，所述胆固醇标准溶液的显色反应中，所述胆固醇标准溶液与乙酸酐、浓硫酸的体积比为2：1：0.1，浓硫酸的用量为1～2滴。

7.如权利要求5所述蛋黄卵磷脂中快速检测胆固醇含量的方法，其特征在于，所述胆固醇标准溶液的制备包括：取胆固醇标准品适量，加二氯甲烷溶解并分别配制成0.05mg/ml、0.1mg/ml、0.2mg/ml的所述胆固醇标准溶液。

8.如权利要求7所述蛋黄卵磷脂中快速检测胆固醇含量的方法，其特征在于，通过颜色深浅情况快速检测样品中的胆固醇含量范围的具体操作包括：

9.如权利要求1所述蛋黄卵磷脂中快速检测胆固醇含量的方法，其特征在于，还包括对快速检测结果进行色谱法佐证。

10.如权利要求9所述蛋黄卵磷脂中快速检测胆固醇含量的方法，其特征在于，所述色谱法佐证包括如下步骤：

技术总结
本发明属于现代检验技术领域，具体涉及一种蛋黄卵磷脂中快速检测胆固醇含量的方法，包括：将样品进行溶解，之后加入乙酸酐、浓硫酸进行显色反应，摇匀后进行颜色比对，通过颜色深浅情况即可快速检测样品中的胆固醇含量范围。本发明提供了一种蛋黄卵磷脂中快速检测胆固醇含量的方法，该方法简单易行、操作方便、可以快速检测到胆固醇的大致含量范围，可以更好的解决在医药以及其他领域中需要快速检测蛋黄卵磷脂中胆固醇含量限度的问题。

技术研发人员：陈洪亮,李咏华,许文东,朱映萍,黄程程,钱大焕,袁诚,韩亚明,林铮华,蒙昌露,祝阳露
受保护的技术使用者：广州白云山汉方现代药业有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/12