一种基于破壁高压色谱法同步测定人参中人参皂苷F2和人参皂苷Rg3含量的方法与流程

本发明属于功效成分分析，尤其涉及一种基于破壁高压色谱法同步测定人参药材中人参皂苷f2和人参皂苷rg3含量的方法。

背景技术：

1、人参皂苷f2和人参皂苷rg3是人参药材中的稀有元素，对人体有安神益智、复脉固脱、补气益血、提高免疫力的作用。

2、目前，现有药材处理的方法一般为粉碎、浸泡、反复提取(回流、超声)、蒸干、溶解，操作步骤繁琐，损耗多，准确度不高。尚不见有将药材进行简捷处理，再同步或分项检测人参药材中人参皂苷f2和人参皂苷rg3的含量的方法。

技术实现思路

1、本发明的目的之一在于提供一种基于破壁高压色谱法同步测定人参药材中人参皂苷f2和人参皂苷rg3含量的方法，所述方法包括以下步骤：

2、步骤一，取药材适量，用破壁机进行细胞破壁，碎成150～200目的极细粉；

3、步骤二，称取极细粉并用甲醇溶解，摇匀，放入高压蒸汽灭菌器中灭菌0.4-0.6h，取出，放冷至室温，补甲醇至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，取续滤液备用；

4、步骤三，分别取人参皂苷f2和人参皂苷rg3对照品适量，加甲醇溶解，制成含人参皂苷f2和人参皂苷rg3分别为30.438～37.202μg/ml和67.005～81.895μg/ml的混合对照溶液，备用；

5、步骤四，分别取步骤三中的混合对照溶液和步骤二中的续滤液，采用液相色谱仪在203nm波长处对其进行测定，以获得所述对照液和样品液的液相色谱图，确定二者的峰面积；

6、步骤五，根据所述对照溶液和所述样品续滤液溶液的液相色谱图的峰面积，确定所述样品中人参皂苷f2和人参皂苷rg3的含量。

7、优选地，所述极细粉与甲醇的质量体积比为1.8～2.2g：50ml。

8、更优选地，所述高压蒸汽灭菌器的灭菌时间为0.5h，温度为121℃，压力为0.11mpa。

9、更优选地，所述色谱条件如下：

10、色谱柱为c18色谱柱，4.6mm×250mm，5μm；

11、色谱柱柱温为30℃；

12、检测波长为203nm；

13、流动相包括流动相a和流动相b，所述流动相a为0.4％磷酸水溶液，所述流动相b为乙腈；

14、流动相流速为1.0ml/min；

15、所述液相色谱法采用梯度洗脱，程序如下：

16、 时间(min) 0.4％磷酸溶液(a) 乙腈(b) 0.00 90 10 30.00 90 10 36.00 70 30 45.00 65 35 70.00 69 31 80.00 50 50 110.00 40 60 115.00 90 10 120.00 90 10

17、更优选地，按照下式求出人参药材中人参皂苷f2和人参皂苷rg3的含量：

18、x＝a2×c×v×100/a1/m/1000

19、式中：

20、x为试样中人参皂苷f2或人参皂苷rg3的含量，mg/100g；

21、a2为试样中人参皂苷f2或人参皂苷rg3的峰面积；

22、a1为对照液人参皂苷f2或人参皂苷rg3的峰面积；

23、c为对照液人参皂苷f2或人参皂苷rg3的浓度，ug/ml。

24、v为样品定容的甲醇体积，ml；

25、m为称取试样的质量，g；

26、100为待测物中量以每100克计算的换算系数；

27、1000为单位转换系数。

28、本发明的目的之二在于提供上述方法在人参皂苷f2和/或人参皂苷rg3检测中的应用。

29、与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：

30、本发明的方法操作简单、易于掌握，能快速、准确地同步测定人参药材中人参皂苷f2和人参皂苷rg3的含量；目前尚不见有将药材进行简捷处理，再同步或分项检测人参药材中人参皂苷f2和人参皂苷rg3的含量的方法，本方法省时省力成本低，具有广阔的市场应用前景，利于普及和推广。

技术特征：

1.一种基于破壁高压色谱法同步测定人参药材中人参皂苷f2和人参皂苷rg3含量的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述极细粉与甲醇的质量体积比为1.8～2.2g：50ml。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述高压蒸汽灭菌器的灭菌时间为0.5h，温度为121℃，压力为0.11mpa。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述色谱条件如下：

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，按照下式求出人参药材中人参皂苷f2和人参皂苷rg3的含量：

6.权利要求1-5中任一项所述的方法在人参皂苷f2和/或人参皂苷rg3检测中的应用。

技术总结
本发明公开了一种基于破壁高压色谱法同步测定人参药材中人参皂苷F2和人参皂苷Rg3含量的方法，属于功效成分分析技术领域。该方法的步骤为：先用破壁机将人参药材进行细胞破壁，碎成极细粉，称样后加甲醇，利用高压蒸汽灭菌器的压力、温度使甲醇渗透于药粉细胞中，溶解药粉制得供试液，再配制含人参皂苷F<subgt;2</subgt;和人参皂苷Rg<subgt;3</subgt;一定浓度的混合对照溶液，用高效液相色谱仪对对照溶液和药粉供试液进行测定，根据对照溶液和药粉中的人参皂苷F<subgt;2</subgt;和人参皂苷Rg<subgt;3</subgt;的浓度、峰面积，确定样品中人参皂苷F<subgt;2</subgt;和人参皂苷Rg<subgt;3</subgt;的含量。

技术研发人员：罗功才,王祝彬
受保护的技术使用者：纽斯葆广赛(广东)生物科技股份有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13