本发明属于药物分析,具体涉及一种人参叶特征图谱的构建方法和应用。
背景技术:
1、人参叶为五加科植物人参属人参panax ginseng c.a.mey.的干燥叶。人参的药用部位较多,包括了人参、人参叶、人参花等,人参的不同部位的化学成分类似,主要是以人参皂苷类成分为主,并且同科属植物西洋参叶的化学成分也是以人参皂类成分为主,因人参属的化学成分的相似性,以药典的标准难以将人参叶和其它人参属的植物区分,中药配方颗粒由中药饮片加水提取,并以提取、干燥、制粒等工艺生产制成,中药配方颗粒失去了原药材的性状鉴别特征,无法从药材的形状、大小、质地等方面进行检查和鉴别。因此需要建立一种鉴别人参叶的方法,为有效控制和科学评价人参叶质量提供依据。现有技术得到的人参叶的特征图谱存在特征峰间的分离度较差、图谱专属性不够等问题。
技术实现思路
1、因此,本发明要解决的技术问题在于克服现有技术在评价人参叶质量时,构建得到的图谱中特征峰的分离度差、专属性不强等缺陷,从而提供了一种人参叶特征图谱的构建方法和应用。
2、为此,本发明提供了以下技术方案。
3、本发明提供了一种人参叶特征图谱的构建方法,包括以下步骤:
4、供试品溶液的制备:将供试品制成供试品溶液;
5、参照物溶液的制备:将对照药材制成参照物溶液;
6、测定:按照高效液相色谱法,测定;
7、其中,高效液相色谱法的色谱条件包括:以乙腈为流动相a,以磷酸水溶液为流动相b,梯度洗脱;
8、梯度洗脱程序包括:0-10min,5→20%流动相a,95→80%流动相b;10-18min,20→22%流动相a,80→78%流动相b;18-20min,22→31%流动相a,78→69%流动相b;20-30min,31→33%流动相a,69→67%流动相b;
9、所述梯度洗脱程序还包括:30-40min,33→60%流动相a,67→40%流动相b;40-45min,60→90%流动相a,40→10%流动相b;或,30-50min,33→80%流动相a,67→20%流动相b。
10、所述高效液相色谱法的色谱条件还包括:以十八烷基硅烷键合硅胶柱为填充剂,色谱柱规格为:内径4.6mm,柱长150mm,粒径2.7μm;和/或,
11、柱温为23-27℃;和/或,
12、波长为201-205nm;和/或,
13、进样量为5-15μl;和/或,
14、流速为0.9-1.1ml/min;和/或,
15、以0.08-0.12%磷酸水溶液为流动相b。
16、所述供试品为人参叶饮片、人参叶配方颗粒、人参叶标准汤剂冻干粉、人参叶浸膏粉和人参叶药材中的至少一种。
17、所述供试品溶液的制备方法包括:取供试品,加提取溶剂,提取,过滤;
18、优选地,在制备所述供试品溶液时,提取溶剂为水、甲醇和乙醇中的至少一种;
19、优选地,所述提取溶剂为甲醇;
20、优选地,在制备所述供试品溶液时,提取的方法为回流提取法或超声提取法。
21、当供试品为人参叶配方颗粒、人参叶标准汤剂冻干粉和人参叶浸膏粉中的至少一种时,在制备所述供试品溶液时,供试品质量与提取溶剂体积的比值为1g:(45-55)ml。
22、所述参照物溶液的制备方法包括:取对照药材,加水提取,过滤后蒸干,得到水提物;在水提物中加提取溶剂,提取,过滤;
23、优选地,在制备所述参照物溶液时,提取溶剂为水、甲醇和乙醇中的至少一种;
24、优选地,所述提取溶剂为甲醇;
25、优选地,所述对照药材质量与提取溶剂体积的比值为1g:(15-19)ml;
26、优选地,在制备所述参照物溶液时,提取的方法为回流提取法或超声提取法。
27、所述构建方法还包括对照品参照物溶液的制备;
28、对照品为山柰酚-3-o-槐糖苷对照品、人参皂苷rg1对照品、人参皂苷re对照品和人参皂苷rd对照品中的至少一种。
29、所述构建方法得到的特征图谱包括14个特征峰;
30、以2号峰为参照物峰1,1号峰的相对保留时间的规定值为:0.58;
31、以4号峰为参照物峰2,5号峰、6号峰、7号峰、8号峰、9号峰、10号峰、12号峰、13号峰和14号峰的相对保留时间的规定值分别为:1.11、1.25、1.29、1.35、1.43、1.48、1.72、1.76和1.79;
32、其中,特征峰的相对保留时间在规定值的±10%。
33、本发明还提供了一种人参叶的鉴别方法,采用上述构建方法得到待测供试品特征图谱,利用3号峰和11号峰面积鉴别待测供试品是否为人参叶。
34、所述鉴别方法,当a为0.43-1.5时,待测样品为人参叶;
35、其中,
36、s11号峰为11号峰的峰面积,s3号峰为3号峰的峰面积。
37、本发明技术方案,具有如下优点:
38、1.本发明提供的人参叶特征图谱的构建方法,包括:供试品溶液的制备,参照物溶液的制备,按照高效液相色谱法,测定,并限定了以乙腈为流动相a和磷酸水溶液为流动相b和特定的梯度洗脱程序。该构建方法得到的特征图谱中各个特征峰的分离度好,图谱专属性强,易实现,为有效控制和科学评价人参叶药材及其制剂的质量提供了依据。本发明提供的方法操作简便、结果准确、结果重现性好。
39、2.本发明提供的人参叶的鉴别方法,利用本发明提供的构建方法得到的特征图谱可以区分人参叶与人参其它药用部位以及区分人参叶与同科属的植物。
1.一种人参叶特征图谱的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述高效液相色谱法的色谱条件还包括:以十八烷基硅烷键合硅胶柱为填充剂,色谱柱规格为:内径4.6mm,柱长150mm,粒径2.7μm;和/或,
3.根据权利要求1或2所述的构建方法,其特征在于,所述供试品为人参叶饮片、人参叶配方颗粒、人参叶标准汤剂冻干粉、人参叶浸膏粉和人参叶药材中的至少一种。
4.根据权利要求1-3任一项所述的构建方法,其特征在于,所述供试品溶液的制备方法包括:取供试品,加提取溶剂,提取,过滤;
5.根据权利要求4所述的构建方法,其特征在于,当供试品为人参叶配方颗粒、人参叶标准汤剂冻干粉和人参叶浸膏粉中的至少一种时,在制备所述供试品溶液时,供试品质量与提取溶剂体积的比值为1g:(45-55)ml。
6.根据权利要求1-5任一项所述的构建方法,其特征在于,所述参照物溶液的制备方法包括:取对照药材,加水提取,过滤后蒸干,得到水提物;在水提物中加提取溶剂,提取,过滤;
7.根据权利要求1-6任一项所述的构建方法,其特征在于,还包括对照品参照物溶液的制备;
8.根据权利要求1-7任一项所述的构建方法,其特征在于,所述构建方法得到的特征图谱包括14个特征峰;
9.一种人参叶的鉴别方法,其特征在于,采用权利要求1-8任一项所述构建方法得到待测供试品特征图谱,利用3号峰和11号峰面积鉴别待测供试品是否为人参叶。
10.根据权利要求9所述的鉴别方法,其特征在于,当a为0.43-1.5时,待测样品为人参叶;