一种改进的罗替高汀中的杂质的检测方法与流程

本发明涉及医药检测领域，本发明具体提供了一种改进的罗替高汀中的杂质的检测方法。

背景技术：

1、罗替高汀为多巴胺受体激动剂，是帕金森氏病早期患者的有效对症治疗药物，而大多数现有的多巴胺受体激动剂需要每日三次口服，依从性较差。而罗替高汀透皮贴剂每日一贴，药效平稳，依从性高。其原料药罗替高汀中的杂质可能会影响制剂的产品质量，因此对罗替高汀中存在的杂质有准确的了解，并在此基础上采用适当地分析方法对杂质进行控制，具有重要意义。

2、罗替高汀质量标准目前已收载在欧洲药典和美国药典中，这两个药典中有关物质检测方法一致，但是该法定方法并不能分开本原料药工艺中所产生的所有杂质(图1)，其中杂质sm3、lys-3、a、c、d、k、f、e、g、j检测方法已被欧洲和美国药典收录。杂质4a为原料药的新工艺杂质.其中，

3、sm3：

4、

5、2-噻吩乙酸

6、lys-3

7、

8、(s)-6-(丙胺基)-5,6,7,8-四氢化萘-1-醇。

9、杂质a：

10、(2s)-5-羟基-n-丙基-n-(2-(噻吩-2-基)乙基)-1,2,4-四氢萘-2-氧化胺杂质c：

11、

12、(s)-6-(2-(噻吩-2-基)乙基)氨基)-5,6,7,8-四氢萘-1-醇杂质k

13、

14、7,8-二氢萘-1-醇

15、杂质d

16、(s)-6-(乙基(2-(噻吩-2-基)乙基)氨基)-5,6,7,8-四氢萘-1-醇杂质4a

17、

18、5,6,7,8-四氢-6-s-[n-丙基-2-(3-噻吩基)-n-乙基]-氨基-1-萘酚

19、cas:102121-00-6

20、杂质f

21、

22、(s)-6-(二(2-(噻吩-2-基)乙基)氨基)-5,6,7,8-四氢萘-1-醇

23、杂质e

24、

25、(s)-6-(丙基(2-(噻吩-2-基)乙基)氨基)-5,6,7,8-四氢萘-1-基乙酸酯杂质g

26、

27、(s)-5-甲氧基-n-丙基-n-(2-(噻吩-2-基)乙基)-1,2,3,4-四氢萘-2-胺

28、杂质j

29、

30、(s)-n-丙基-5-[2-(噻吩-2-基)乙氧基]-n-[2-(噻吩-2-基)乙基]-1,2,3,4-四氢萘-2-胺

31、目前，还尚未有杂质4a能与其他杂质完全分离、并能与其他杂质同时进行检测的方法的报道，而现在技术报道的检测方法由于专属性差，尚未能分开原料药工艺中所有的杂质。

32、因此，有必要开发一种改进的能分开欧洲药典和美国药典规定的所有杂质且还能分开本工艺中特异生成的杂质的方法，以解决现有检测技术中的难题。

技术实现思路

1、针对以上技术现状，本发明提供了一种改进的罗替高汀中的杂质的检测方法，所述方法中的色谱条件包括：

2、色谱柱：watersc8,150mm*4.6mm,3.5μm或c8(2)，150mm*4.6mm,3μm；

3、流动相a：10mm k2hpo4(用磷酸调节ph为7.3)-乙腈(90:10)

4、流动相b：乙腈

5、所述杂质包括4a、sm3、lys-3、a、c、d、k、f、e、g和j。

6、本发明方法中，作为实施方案之一，所述方法中的色谱条件包括洗脱梯度如下

7、

8、本发明方法中，作为实施方案之一，所述方法中的色谱条件包括：溶剂：甲醇；流速：1.2ml/min。

9、本发明方法中，作为实施方案之一，所述方法中的色谱条件包括：进样体积：10μl；供试品浓度：1mg/ml。

10、本发明方法中，作为实施方案之一，所述方法中的色谱条件包括：柱温：35℃；检测波长：220nm(215nm-225nm)；进样盘温度：5℃。

11、本发明方法中，作为实施方案之一，所述方法还包括：

12、待测样品的制备：取罗替高汀产品的样品适量，精密称定，加甲醇溶解并稀释制成每1ml中约含1mg罗替高汀产品的样品溶液。

13、对照品的制备：各称取杂质sm3、杂质e对照品适量，加乙腈溶解并稀释成每1ml中约含500μg的溶液；各称取杂质lys-3对照品、杂质a对照品、杂质c对照品、杂质k对照品、杂质d对照品、杂质4a对照品、罗替高汀对照品、杂质f对照品、杂质g对照品、杂质j对照品适量，加甲醇溶解并稀释成每1ml中各约含500μg的溶液；分别精密量取上述杂质sm3、杂质e、lys-3、杂质a、杂质c、杂质k、杂质d、杂质4a、罗替高汀、杂质f、杂质g、杂质j对照品溶液适量，用甲醇稀释成每1ml中约含杂质sm3、杂质lys-3、杂质4a1.5μg，每1ml中约含罗替高汀、杂质e、杂质a、杂质k、杂质d、杂质g、杂质j1μg，每1ml中约含杂质c、杂质f 2μg的混合溶液；本发明方法中，作为实施方案之一，所述方法包括：

14、待测样品的制备：取罗替高汀产品的样品适量，精密称定，加甲醇溶解并稀释制成每1ml中约含1mg罗替高汀产品的样品溶液。

15、对照品的制备：各称取杂质sm3、杂质e对照品适量，加乙腈溶解并稀释成每1ml中约含500μg的溶液；各称取杂质lys-3对照品、杂质a对照品、杂质c对照品、杂质k对照品、杂质d对照品、杂质4a对照品、罗替高汀对照品、杂质f对照品、杂质g对照品、杂质j对照品适量，加甲醇溶解并稀释成每1ml中各约含500μg的溶液；分别精密量取上述杂质sm3、杂质e、lys-3、杂质a、杂质c、杂质k、杂质d、杂质4a、罗替高汀、杂质f、杂质g、杂质j对照品溶液适量，用甲醇稀释成每1ml中约含杂质sm3、杂质lys-3、杂质4a1.5μg，每1ml中约含罗替高汀、杂质e、杂质a、杂质k、杂质d、杂质g、杂质j1μg，每1ml中约含杂质c、杂质f 2μg的混合溶液；色谱柱：watersc8,150mm*4.6mm,3.5μm,yf-1823/1824

16、柱温：35℃

17、流速：1.2ml/min

18、检测波长：220nm(215nm-225nm)

19、进样体积：10μl

20、溶剂：甲醇

21、进样盘温度：5℃

22、流动相a：10mm k2hpo4(用磷酸调节ph为7.3)-乙腈(90:10)

23、流动相b：乙腈

24、供试品浓度：1mg/ml

25、

26、本发明方法中，作为实施方案之一，罗替高汀产品中杂质4a的量4a杂质限度最高为0.15％；优选4a杂质含量范围在0.04％-0.05％。

27、本发明方法中，作为实施方案之一，所述罗替高汀产品包括但不限于罗替高汀原料，或含罗替高汀的外用制剂贴剂、凝胶膏贴、或乳膏剂。

28、相对于现有技术，本发明方法优化了检测方法中的色谱条件，包括但不限于：色谱柱、流动相、梯度、ph(ph7.2-ph7.5)、柱温(33℃-37℃)、波长(215nm-225nm)等。

29、本发明改进后的检测方法具有专属性强，灵敏度高，方法控制原料药质量更加准确可靠，其他品牌c8色谱柱，采用本方法中流动相，柱温，流速等参数可能也能实现本发明目的。