一种人工尿液缓冲液基质及其制备方法和应用与流程

本发明属于体外诊断试剂检测，涉及一种人工尿液缓冲液基质及其制备方法和应用。

背景技术：

1、人工尿液在医学研究、药物测试和尿液分析校准等领域有多种应用。开发人工尿液的主要目的是创造一种与真实尿液的化学和物理性质相似的物质，包括复制尿液中主要的成分，例如ph值、比重以及各种代谢物和废物的存在。

2、虽然人工尿液已在某些研究背景下使用，但其应用有局限性。现有的人工尿液通常配方单一，并且无法准确再现真实尿液中发现的全部生化成分。此外，由于泌尿系统和人体代谢过程的复杂性，开发一种能够持续复制人类尿液的化学和物理特性的人造尿液是一项具有挑战性的任务。

3、hutipongtanate等人在2010年发表的文献中提到一种适用于体外细胞研究的人工尿液基质；sarigul等在2019年发表的文献中提到一种新的人工尿液配方，并与其他两种人工尿液做了比较，通过ftir成分分析，说明这是一种成分上最接近人体真实尿液的配方，可以广泛应用于各领域。

4、专利cn202310017611中提到一种可以用于尿液生化分析用的质控品基质，包括人尿液基质、缓冲基质、质控项目添加物质、稳定剂、冻干添加物质等。该基质需要采集人体尿液过滤后作为基质的一部分，对样本的生物安全性有较高要求，不适用于常规实验室配制用。专利cn202211622890中提到一种可以消除malb试剂检测中非特异性干扰的试剂组合，该试剂组合包含了磷酸盐、氯离子、防腐剂、peg6000、羊抗人malb抗血清等组分，主要用于免疫比浊法测试malb中减少非特异性干扰和提高检测准确性，但该试剂组合只适用于尿微量白蛋白的免疫比浊法检测，并不适用于尿液中其他项目检测，且不适用于免疫层析法。

5、综上所述，目前现有尿液生化分析用的质控品基质存在无法适用尿液中特定蛋白或多种项目的检测，现有基质配方成分干扰背景检测等问题。如何提供一种人工尿液缓冲液基质，保证尿液中小分子、蛋白质或其他生物标志物通过免疫反应的检测不受影响，已成为目前体外诊断试剂技术领域亟待解决的问题之一。

技术实现思路

1、针对现有技术的不足和实际需求，本发明提供一种人工尿液缓冲液基质及其制备方法和应用，解决了现有尿液生化分析用的质控品基质存在无法适用尿液中特定蛋白或多种项目的检测，现有基质配方成分干扰背景检测等问题，能够针对尿液中特定蛋白或小分子，能够消除背景干扰，保证尿液中小分子、蛋白质、其他生物标志物的免疫反应检测不受影响，基质效应小。

2、为达到此发明目的，本发明采用以下技术方案：

3、第一方面，本发明提供了一种人工尿液缓冲液基质，所述人工尿液缓冲液基质包括：尿素、尿酸、α-羟基酸、氨基酸、离子类和糖类。

4、本发明的人工尿液缓冲液基质能够针对尿液中特定蛋白或小分子，能够消除背景干扰，保证尿液中小分子、蛋白质、其他生物标志物的免疫反应检测不受影响，基质效应小。

5、优选地，所述人工尿液缓冲液基质中尿酸的体积百分比为0.1-0.5％。

6、上述0.1-0.5％中的具体点值可以选择0.1％、0.2％、0.3％、0.4％、0.5％等。

7、优选地，所述人工尿液缓冲液基质中尿酸的浓度为0.1-0.4mmol/l。

8、上述0.1-0.4mmol/l中的具体点值可以选择0.1mmol/l、0.12mmol/l、0.13mmol/l、0.2mmol/l、0.3mmol/l、0.36mmol/l、0.37mmol/l、0.4mmol/l等。

9、优选地，所述人工尿液缓冲液基质中α-羟基酸的体积百分比为0.1-0.5％。

10、上述0.1-0.5％中的具体点值可以选择0.1％、0.2％、0.3％、0.4％、0.5％等。

11、优选地，所述α-羟基酸包括乳酸、柠檬酸或乙醇酸中的任意一种或至少两种的组合。

12、优选地，所述α-羟基酸为乳酸、柠檬酸和乙醇酸的组合。

13、优选地，所述人工尿液缓冲液基质中柠檬酸的浓度为50-70mm。

14、上述50-70mm中的具体点值可以选择50mm、52mm、56mm、60mm、64mm、66mm、68mm、69mm、70mm等。

15、优选地，所述人工尿液缓冲液基质中乳酸的浓度为10-30mm。

16、上述10-30mm中的具体点值可以选择10mm、11mm、12mm、15mm、20mm、25mm、26mm、28mm、29mm、30mm等。

17、优选地，所述人工尿液缓冲液基质中乙醇酸的浓度为1-5mm。

18、上述1-5mm中的具体点值可以选择1mm、2mm、3mm、4mm、5mm等。

19、优选地，所述离子类包括钠离子、钾离子、钙离子、镁离子或铵离子中的任意一种或至少两种的组合。

20、优选地，所述氨基酸包括谷氨酰胺。

21、优选地，所述糖类包括葡萄糖。

22、优选地，所述人工尿液缓冲液基质中尿素的浓度为0.1-0.18mol/l。

23、上述0.1-0.18mol/l中的具体点值可以选择0.1mol/l、0.12mol/l、0.13mol/l、0.14mol/l、0.15mol/l、0.16mol/l、0.17mol/l、0.18mol/l等。

24、优选地，所述人工尿液缓冲液基质中钠离子的浓度为50-170mmol/l。

25、上述50-100mmol/l中的具体点值可以选择50mmol/l、55mmol/l、60mmol/l、65mmol/l、70mmol/l、75mmol/l、80mmol/l、90mmol/l、150mmol/l、160mmol/l、165mmol/l、170mmol/l等。

26、优选地，所述人工尿液缓冲液基质中钾离子的浓度为10-30mmol/l。

27、上述10-30mmol/l中的具体点值可以选择10mmol/l、15mmol/l、20mmol/l、25mmol/l、26mmol/l、27mmol/l、28mmol/l、29mmol/l、30mmol/l等。

28、优选地，所述人工尿液缓冲液基质中镁离子的浓度为2-10mmol/l。

29、上述2-10mmol/l中的具体点值可以选择2mmol/l、3mmol/l、4mmol/l、5mmol/l、6mmol/l、7mmol/l、8mmol/l、9mmol/l、10mmol/l等。

30、优选地，所述人工尿液缓冲液基质中钙离子的浓度为0.5-3mmol/l。

31、上述0.5-3mmol/l中的具体点值可以选择0.5mmol/l、0.8mmol/l、1mmol/l、1.4mmol/l、2mmol/l、2.4mmol/l、2.7mmol/l、3mmol/l等

32、优选地，所述人工尿液缓冲液基质中氨基酸的浓度为1-2mmol/l。

33、上述1-2mmol/l中的具体点值可以选择1mmol/l、1.2mmol/l、1.5mmol/l、1.6mmol/l、1.7mmol/l、1.8mol/l、1.9mol/l、2mmol/l等。

34、优选地，所述人工尿液缓冲液基质中糖类的浓度为1-5mmol/l。

35、上述1-5mmol/l中的具体点值可以选择1mmol/l、1.5mmol/l、2mmol/l、2.5mmol/l、3mmol/l、3.5mmol/l、4mmol/l、4.8mmol/l、4.9mmol/l、5mmol/l等。

36、优选地，所述人工尿液缓冲液基质还包括防腐剂。

37、优选地，所述人工尿液缓冲液基质中防腐剂的体积百分比为0.04-0.06％。

38、上述0.04-0.06％中的具体点值可以选择0.04％、0.042％、0.043％、0.048％、0.05％、0.055％、0.058％、0.0559％、0.06％等。

39、优选地，所述防腐剂包括pc-300和/或叠氮钠。

40、第二方面，本发明提供了一种制备第一方面所述的人工尿液缓冲液基质的方法，所述方法包括：

41、尿素、尿酸、α-羟基酸、氨基酸、离子类和糖类混合均质，将ph调至5.5-6.0，即得所述人工尿液缓冲液基质。

42、上述5.5-6.0中的具体点值可以选择5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0等

43、第三方面，本发明提供了一种试剂盒，所述试剂盒含有第一方面所述的人工尿液缓冲液基质。

44、第四方面，本发明提供了第一方面所述的人工尿液缓冲液基质在检测尿液中的应用。

45、优选地，所述检测尿液的方法包括免疫比浊法或免疫层析法。

46、优选地，所述尿液中的成分包括蛋白类和非蛋白类。

47、优选地，所述蛋白类包括白蛋白、微量白蛋白、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白、β2-微球蛋白、免疫球蛋白、人绒毛膜促性腺激素中的任意一种或至少两种的组合。

48、优选地，所述非蛋白类包括肌酐、hiv或毒品。

49、与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：

50、(1)本发明的人工尿液缓冲液基质在针对尿液中特定成分的检测中作为缓冲液，可以大大减少基质效应，提高检测的准确性和可靠性，本发明的人工尿液缓冲液基质完全为实验室配制，不含人体或其他生物样本，避免了病原体感染风险；

51、(2)本发明的人工尿液缓冲液具有良好的稳定性，适合作为尿液免疫检测试剂开发阶段的缓冲液以及产品质控缓冲液基质；

52、(3)本发明中的人工尿液缓冲液基质与真实尿液样本最为一致，可以替代样本作为检测试剂开发阶段的缓冲液以及质控用缓冲液基质。