能预测变应性鼻炎免疫治疗预后疗效的生物标志物与应用

本发明属于变应性鼻炎检测，具体地指一种能预测变应性鼻炎免疫治疗预后疗效的生物标志物与应用。

背景技术：

1、变应性鼻炎是指当机体暴露于变应原后，以ige介导为主的鼻黏膜非感染性慢性炎性疾病，我国部分地区变应性鼻炎患病率为4～38％。变应性鼻炎的主要症状包括鼻痒，喷嚏，流涕，眼痒和鼻塞等，影响患者的生活、睡眠、工作质量，并造成严重的社会和经济负担。当前对变应性鼻炎的治疗方案包括避免接触变应原、药物治疗、ait(变应原特异性免疫治疗)和患者教育。与避免接触变应原和药物治疗等暂时缓解症状的方式不同，ait中的变应原提取物(疫苗)通过反复与患者接触，并逐渐增加剂量，可诱导机体产生免疫耐受，从而控制或减轻过敏症状。

2、然而，ait也有治疗周期长、花费高、患者依从性差、易引发严重并发症等缺点。更重要的是，相当一部分变应性鼻炎患者对ait反应不佳，造成了大量的社会医疗资源浪费和个人经济损失。但是，对于预测变应性鼻炎特异性免疫治疗疗效的生物标志物尚不清楚。目前在临床应用中，详细的临床病史和对相关过敏原的ige致敏证明可能有助于选择适合ait的患者，但这些临床标志物仍不足以区分ait应答者和无应答者。比如：文献《生物标志物在变应性鼻炎特异性免疫治疗疗效评价中的应用》提到目前国内外已发现一些与变应性鼻炎发生和诊治相关的潜在指标，如特异性ige、白细胞介素2(il-2)、il-4、il-5、嗜酸性粒细胞阳离子蛋白、嗜酸性粒细胞、特异性igg4和干扰素γ、treg细胞(调节性t细胞)、sige(血清抗原特异性ige)/tige(血清总ige)比率等。

3、因此，寻找可靠的预测ait疗效的生物标志物，探索可以增强ait疗效的新方法，是变应性鼻炎和ait研究的重点和难点。

技术实现思路

1、为了克服上述现有背景技术的不足之处，本发明的目的在于提供一种能预测变应性鼻炎免疫治疗预后疗效的生物标志物与应用。本发明首次提出用tfr细胞与tfh2细胞作为生物标志物建立预测变应性鼻炎免疫治疗疗效的模型，检测方法简便快捷，预测性能良好，具有良好临床应用前景。

2、为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

3、一种能预测变应性鼻炎免疫治疗预后疗效的生物标志物，所述生物标志物包含tfr细胞(滤泡辅助性t细胞)与tfh2细胞(2型滤泡调节性t细胞)。

4、一种如前所述的生物标志物在构建变应性鼻炎免疫治疗预后疗效预测模型中的应用。

5、优选地，预测模型为：

6、风险评分＝tfr/tfh2，其中tfr代表所检测的外周血单个核细胞中tfr细胞的比例，tfh2代表所检测的外周血单个核细胞中tfh2细胞的比例；

7、其中，如果风险评分值高于预测界值，则判断为免疫治疗无应答组，免疫治疗疗效差；如果风险评分值低于预测界值，则判断为免疫治疗应答组，免疫治疗疗效好。

8、优选地，预测界值为0.31。

9、优选地，采用预测模型预测变应性鼻炎免疫治疗预后疗效的方法包括：

10、1)检测变应性鼻炎患者在接受免疫治疗前外周血单个核细胞中tfr细胞与tfh2细胞的比例；

11、2)检测数据代入预测模型，计算风险评分，以此判断变应性鼻炎免疫治疗预后疗效。

12、优选地，步骤1)的具体过程如下：

13、1.1)从外周血中分离外周血单个核细胞；

14、1.2)在外周血单个核细胞悬液中，用荧光色素标记的抗体对tfr细胞与tfh2细胞进行染色；

15、1.3)染色后的细胞悬液进行流式细胞术分析，检测单个核细胞中tfr细胞与tfh2细胞的比例。

16、优选地，标记tfr细胞的荧光抗体为抗人cd3抗体、抗人cd4抗体、抗人cxcr5抗体、抗人cd127抗体、抗人cd25抗体；标记tfh2细胞的荧光抗体为抗人cd3抗体、抗人cd4抗体、抗人cxcr5抗体、抗人cd25抗体、抗人cxcr3抗体、抗人ccr6抗体。

17、优选地，tfr细胞的荧光标记为cd3+cd4+cxcr5+cd127lowcd25high；tfh2细胞的荧光标记为cd3+cd4+cxcr5+cd25low cxcr3-ccr6-。

18、一种如前所述的生物标志物在制备变应性鼻炎免疫治疗预后疗效诊断试剂中的应用。

19、一种如前所述的生物标志物在制备变应性鼻炎免疫治疗预后疗效诊断试剂盒中的应用。

20、本发明取得的有益效果如下：

21、1.本发明基于tfr细胞与tfh2细胞作为生物标志物建立预测变应性鼻炎免疫治疗疗效的模型。受试者工作曲线(roc曲线)分析显示，运用tfr/tfh2细胞比例预测变应性鼻炎免疫治疗疗效的敏感度为69.4％，特异度为87％，auc为0.815。而目前临床常用的预测指标sige/tige比率的敏感度为61.2％，特异度为69.6％，auc为0.697。因此，使用tfr/tfh2细胞比例建立的预测模型优于使用sige/tige的比例，预测性能良好。

22、2.本发明涉及的检测技术流式细胞术分析简便快捷，具有良好临床应用前景，从而有效节约患者和医疗卫生支出，指导医生合理用药的方法，进而建立精准医疗体系。

技术特征：

1.一种能预测变应性鼻炎免疫治疗预后疗效的生物标志物，其特征在于，所述生物标志物包含tfr细胞与tfh2细胞。

2.一种如权利要求1所述的生物标志物在构建变应性鼻炎免疫治疗预后疗效预测模型中的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，预测模型为：

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，预测界值为0.31。

5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，采用预测模型预测变应性鼻炎免疫治疗预后疗效的方法包括：

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，步骤1)的具体过程如下：

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，标记tfr细胞的荧光抗体为抗人cd3抗体、抗人cd4抗体、抗人cxcr5抗体、抗人cd127抗体、抗人cd25抗体；标记tfh2细胞的荧光抗体为抗人cd3抗体、抗人cd4抗体、抗人cxcr5抗体、抗人cd25抗体、抗人cxcr3抗体、抗人ccr6抗体。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，tfr细胞的荧光标记为cd3+cd4+cxcr5+cd127lowcd25high；tfh2细胞的荧光标记为cd3+cd4+cxcr5+cd25lowcxcr3-ccr6-。

9.一种如权利要求1所述的生物标志物在制备变应性鼻炎免疫治疗预后疗效诊断试剂中的应用。

10.一种如权利要求1所述的生物标志物在制备变应性鼻炎免疫治疗预后疗效诊断试剂盒中的应用。

技术总结
本发明公开一种能预测变应性鼻炎免疫治疗预后疗效的生物标志物与应用，属于变应性鼻炎检测技术领域。所述生物标志物包含T<subgt;FR</subgt;细胞与T<subgt;FH</subgt;2细胞，本发明基于T<subgt;FR</subgt;细胞与T<subgt;FH</subgt;2细胞作为生物标志物建立预测变应性鼻炎免疫治疗疗效的模型。受试者工作曲线(ROC曲线)分析显示，运用T<subgt;FR</subgt;/T<subgt;FH</subgt;2细胞比例预测变应性鼻炎免疫治疗疗效的敏感度为69.4％，特异度为87％，AUC为0.815。而目前临床常用的预测指标sIgE/tIgE比率的敏感度为61.2％，特异度为69.6％，AUC为0.697。因此，使用T<subgt;FR</subgt;/T<subgt;FH</subgt;2细胞比例建立的预测模型优于使用sIgE/tIgE的比例，预测性能良好。

技术研发人员：刘争,姚银,孙诗然,王男,宋佳,李静娴,王志超,王恒,陆翔,郭翠莲,吴兴亮
受保护的技术使用者：华中科技大学同济医学院附属同济医院
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15