一种包含当归的中药组合物中的药材黄柏的薄层鉴别方法及其应用与流程

本发明涉及医药，具体涉及一种包含当归的中药组合物中的药材黄柏的薄层鉴别方法及其应用。

背景技术：

1、薄层色谱法在中药材及其制剂的定性鉴别中得到广泛的应用，这主要是由于其具有分离分析双重功能，大大提高了鉴别工作的灵敏度和专属性，成为中药鉴别的重要方法。薄层色谱法还可用于药品的杂质检查和含量测定。

2、现有技术中未见包含当归的中药组合物中的药材黄柏的薄层鉴别方法的相关报道。

技术实现思路

1、基于此，本发明提供了一种包含当归的中药组合物中的药材黄柏的薄层鉴别方法，该薄层鉴别方法包括如下步骤：

2、(1)将包含当归的中药组合物进行前处理得到供试品溶液，将缺少黄柏的中药组合物进行前处理得到阴性样品溶液，将对照药材进行前处理得到对照药材溶液；以及

3、(2)对该对供试品溶液、该阴性样品溶液和该对照药材溶液进行薄层色谱鉴别分析；

4、其中，在该薄层色谱鉴别分析的步骤中，采用三氯甲烷-甲醇-水作为展开剂，该三氯甲烷、该甲醇与该水之间的体积之比为(1～20):(1～10):(0.1～5)。

5、进一步地，该包含当归的中药组合物包含当归、生地黄、熟地黄、黄柏、黄连、黄芩和黄芪。

6、进一步地，该当归、该生地黄、该熟地黄、该黄柏、该黄连、该黄芩与该黄芪之间的质量之比为(1～10):(1～10):(1～10):(1～10):(1～10):(1～10):(10～20)。

7、进一步地，该当归、该生地黄、该熟地黄、该黄柏、该黄连、该黄芩与该黄芪之间的质量之比为约7.74:约7.74:约7.74:约7.74:约7.74:约7.74:约15.48。

8、进一步地，该包含当归的中药组合物粉末的制备方法包括：称取适量的当归、生地黄、熟地黄、黄柏、黄连、黄芩和黄芪，破碎至粗颗粒，加水浸泡，武火煎煮至沸，文火煎煮一段时间，得到煎煮液；以及将该煎煮液趁热过滤取滤液，减压浓缩至在15～25℃下相对密度为1.05～1.10的浸膏，预冻或速冻之后将该浸膏在冷冻干燥机中干燥，粉碎，过筛，混匀，得到该包含当归的中药组合物粉末。

9、进一步地，该粗颗粒的直径为3～6mm，例如4～5mm。

10、进一步地，该水与该该包含当归的中药组合物的体积/质量之比为25～35，例如约29。

11、进一步地，该浸泡的时间为10～100min，例如约60min。

12、进一步地，该武火煎煮时加盖。

13、进一步地，该文火煎煮时不加盖。

14、进一步地，该文火煎煮的时间为10～100min，例如约50min。

15、进一步地，该趁热过滤的温度为80～85℃。

16、进一步地，该过滤为120目尼龙滤布单层过滤。

17、进一步地，该滤液与该水的体积之比值为0.2～1，例如约0.5。

18、进一步地，在该预冻或速冻之前，将该浸膏置于不锈钢盘中，使其铺料厚度为9～11mm。

19、进一步地，该预冻为在≦-18℃冰柜中将该浸膏预冻过夜。

20、进一步地，该速冻为使用液氮将该浸膏速冻至内无湿心。

21、进一步地，该减压浓缩的温度不高于60℃。

22、进一步地，该减压浓缩的真空度为-0.085～-0.099mpa。

23、进一步地，该冷冻干燥的冷阱温度不高于-40℃。

24、进一步地，该冷冻干燥的真空度不高于100pa。

25、进一步地，该冷冻干燥至水分不高于8％。

26、进一步地，该筛为三号筛。

27、进一步地，该供试品溶液的制备方法包括：称取适量的包含当归的中药组合物粉末，加入第一溶剂进行溶解，使用第二溶剂进行提取，得到第一溶液；将该第一溶液使用第三溶剂进行提取，得到第二溶液，将该第二溶液进行蒸干，得到残渣；以及在该残渣中加入第四溶剂进行溶解，得到该供试品溶液。

28、进一步地，该对照药材溶液的制备方法包括：称取适量的对照药材，使用第二溶剂进行处理，过滤取滤液，将该滤液使用第三溶剂进行提取，将所得溶液蒸干，得到残渣；以及在该残渣中加入第四溶剂进行溶解，得到该对照药材溶液。

29、进一步地，该阴性样品溶液的制备方法包括：称取适量的缺少黄柏的中药组合物粉末，之后的步骤与该供试品溶液的制备方法相同。

30、进一步地，该缺少黄柏的中药组合物粉末通过如下方法进行制备：称取适量的当归、生地黄、熟地黄、黄连、黄芩和黄芪，之后的步骤与该包含当归的中药组合物粉末的制备方法相同。

31、进一步地，该包含当归的中药组合物与该第一溶剂的质量/体积(g/ml)之比为(0.1～5):(1～50)，例如约1:约30。

32、进一步地，该包含当归的中药组合物与该第二溶剂的质量/体积(g/ml)之比为(0.1～5):(1～50)，例如约1:约20。

33、进一步地，该包含当归的中药组合物与该第三溶剂的质量/体积(g/ml)之比为(0.1～5):(0.1～50)，例如约1:约20。

34、进一步地，该包含当归的中药组合物与该第四溶剂的质量/体积(g/ml)之比为(0.1～5):(0.1～5)，例如约1:约1。

35、进一步地，该第一溶剂为水。

36、进一步地，该第二溶剂为水饱和正丁醇。

37、进一步地，该提取的方式为振摇提取、超声提取和/或回流提取，例如振摇提取。

38、进一步地，该振摇提取的次数为1～5次，例如2次。

39、进一步地，该第三溶剂为氨试液。

40、进一步地，该第四溶剂为醇，例如甲醇。

41、进一步地，该对照药材与该第二溶剂的质量/体积(g/ml)之比为(0.1～5):(1～30)，例如约0.2:约20。

42、进一步地，该对照药材与该第三溶剂的质量/体积(g/ml)之比为(0.1～5):(1～30)，例如约0.2:约20。

43、进一步地，该对照药材与该第四溶剂的质量/体积(g/ml)之比为(0.1～5):(0.1～5)，例如约0.2:约1。

44、进一步地，该处理的方式为超声处理。

45、进一步地，该超声处理的时间为10～60min，例如约30min。

46、进一步地，该供试品溶液的点样量为0.5～10μl，例如约3μl。

47、进一步地，该对照药材溶液的点样量为0.5～10μl，例如约3μl。

48、进一步地，该阴性样品溶液的点样量为0.5～10μl，例如约3μl。

49、进一步地，该三氯甲烷、该甲醇与该水之间的体积之比为(5～15):(3～7):(0.1～2)。

50、进一步地，该三氯甲烷、该甲醇与该水之间的体积之比为(9～11):(4.5～5.5):(0.5～1.5)。

51、进一步地，该三氯甲烷、该甲醇与该水之间的体积之比为约10:约5:约1。

52、进一步地，该薄层色谱鉴别分析的步骤中的展开为将薄层板置于氨试液饱和10～30min例如约20min的展开缸内展开。

53、进一步地，该薄层色谱鉴别分析的步骤中的显色方式为：将展开完毕的薄层板取出，晾干，喷以碘化铋钾试液进行显色。

54、进一步地，该薄层色谱鉴别分析的步骤中的温度条件为5℃～25℃。

55、进一步地，该薄层色谱鉴别分析的步骤中的湿度条件为42％～88％。

56、进一步地，该薄层色谱鉴别分析的步骤中的展距条件为8～18cm，例如约10cm。

57、进一步地，该薄层板为硅胶g薄层板。

58、进一步地，该硅胶g薄层板为青岛海洋硅胶g薄层板或青岛胜海硅胶g薄层板。

59、进一步地，该对照药材为黄柏对照药材。

60、进一步地，该薄层鉴别的标准包括：查看薄层板在与黄柏对照药材相应位置上，是否显示出相同颜色的特征斑点，以及阴性样品是否有干扰；如果该薄层板具有该特征斑点且该阴性样品无干扰，则在所检测的包含当归的中药组合物中含有黄柏药材。

61、根据本发明的另一个方面，提供了一种上述薄层鉴别方法在鉴别包含当归的中药组合物中的药材黄柏中的用途。

62、根据本发明的另一个方面，提供了一种用于鉴别包含当归的中药组合物中的药材黄柏的试剂盒，其包括薄层板和展开剂，其中该展开剂为三氯甲烷-甲醇-水，该薄层板为硅胶g薄层板。

63、进一步地，该三氯甲烷、该甲醇与该水之间的体积之比为(1～20):(1～10):(0.1～5)。

64、进一步地，该三氯甲烷、该甲醇与该水之间的体积之比为(5～15):(3～7):(0.1～2)。

65、进一步地，该三氯甲烷、该甲醇与该水之间的体积之比为(9～11):(4.5～5.5):(0.5～1.5)。

66、进一步地，该三氯甲烷、该甲醇与该水之间的体积之比为约10:约5:约1。

67、本发明的有益效果：

68、本发明的薄层鉴别方法展开剂选择适当、鉴别效率高、鉴别精度高并且操作方便，通过对于包含当归的中药组合物中的药材黄柏的检测，为包含当归的中药组合物的质量控制和药效物质基础的深入研究提供了理论依据。