一种采用反相色谱法检测伏立康唑右旋异构体的方法与流程

本发明涉及药物分析领域，具体涉及一种反相色谱法检测伏立康唑右旋异构体的方法。

背景技术：

1、伏立康唑是在氟康唑的结构基础上合成的一种新型高亲脂性三唑类抗真菌药，具有抗菌谱广、抗菌效力强的特点。伏立康唑水溶性差，水中溶解度仅为0.1 mg/ml。磺丁基β环糊精钠是一种药物制剂辅料，属于阴离子型高水溶性的β环糊精磺酸基衍生物，具有高水溶性。它对含氮药物有特殊的亲和性，可以包合药物分子形成非共价化合物。采用磺丁基倍他环糊精钠包合伏立康唑制成注射用伏立康唑冻干制剂，对伏立康唑增溶效果明显，制剂成品水溶性良好。

2、

3、伏立康唑含有两个手性中心，式2所示右旋异构体为伏立康唑原料的工艺副产物及伏立康唑的降解杂质，故需在制剂成品中对右旋异构体进行控制。查阅文献及资料，中国药典2020版伏立康唑右旋异构体的测定方法为正相色谱法，伏立康唑被环糊精包合后溶解性质与环糊精一致，正相溶剂难以完全溶解制剂成品中伏立康唑及右旋异构体；文献报道及其他各国药典中伏立康唑右旋异构体测定方法均为反相色谱法搭配环糊精手性色谱柱，可用于注射用伏立康唑的测定。依据药典方法分离度要求，右旋异构体与主峰的分离度需达到4.0以上，但在方法使用过程中我们发现，右旋异构体与主峰的分离度很难满足要求，该色谱柱随使用次数增加柱效降低明显，色谱柱不耐用。基于以上原因，开发一种耐用性更好的反相色谱方法用于伏立康唑中右旋异构体的检测具有重要意义。

技术实现思路

1、本发明针对现有方法测定伏立康唑中右旋异构体方法耐用性差的情况，提供了一种检测伏立康唑中的右旋异构体的方法，该方法耐用性好，专属性强、灵敏度高、准确度好及精密度好，适用于伏立康唑原料药和制剂中右旋异构体的检测。

2、为实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案。

3、本发明提供了一种采用反相色谱法检测伏立康唑右旋异构体的方法，采用以硅胶表面共价键合直链淀粉-三（3-氯-5-甲基苯基氨基甲酸酯）为填料的色谱柱，流动相为乙腈-水。

4、本方法所述色谱柱为chiralpak ig柱，更优选为chiralpak ig（daicel，4.6mm×250mm，5μm）柱。

5、本方法所述流动相中，乙腈-水的体积比为48：50~52：48，优选乙腈-水的体积比为50：50。

6、进一步地，上述本发明的方法，流速为0.8~1.2ml/min，优选为1.0ml/min。

7、进一步地，上述本发明的方法，检测波长为210~300nm，优选为256nm。

8、进一步地，上述本发明的方法，柱温为25~35℃，优选为30℃；

9、进一步地，上述本发明的方法，进样体积为10~30μl，优选为20μl；

10、进一步地，上述本发明的方法，检测器采用紫外检测器，洗脱模式为等度洗脱。

11、进一步地，上述本发明的方法包括以下步骤：

12、（1）伏立康唑右旋异构体对照品溶液的制备：取伏立康唑右旋异构体对照品适量，加适量乙腈溶解，用40%乙腈水溶液配制成对照品溶液；

13、（2）供试品溶液的制备：取注射用伏立康唑适量，用水复溶，用40%乙腈水溶液稀释，作为供试品溶液；

14、或，取伏立康唑原料药适量，加入适量乙腈超声溶解，用40%乙腈水溶液稀释，配制成供试品溶液；

15、或，取除注射用伏立康唑之外的其他伏立康唑制剂适量，配制成供试品溶液；

16、（3）取伏立康唑右旋异构体对照品溶液和供试品溶液，注入高效液相色谱仪，按照上述色谱条件进行高效液相色谱分析。

17、本发明选用的色谱柱为chiralpak ig柱，填料为硅胶表面共价键合直链淀粉-三（3-氯-5-甲基苯基氨基甲酸酯），属于多糖键合型手性柱，不仅适用于正相色谱体系，也可在反相色谱体系下使用，对手性化合物具有区分力，色谱柱稳定性高，柱温耐受范围为0-40℃，ph耐受范围为2.0-9.0，柱压上限为30mpa，使用寿命长。

18、本发明设计以硅胶表面共价键合直链淀粉-三（3氯-5-甲基苯基氨基甲酸酯）为填料的色谱柱为分析柱的反相液相色谱分析方法，以乙腈水溶液为流动相，实现伏立康唑与其右旋异构体的分离，适用于伏立康唑原料药和制剂中右旋异构体的分析。本方法具有明显优点，改善了方法耐用性，灵敏度高，检测限达到0.25μg/ml，定量限达到0.15μg/ml，专属性好，各破坏条件下右旋异构体测定均不受干扰，流动相体系及样品溶液制备简单，操作简单，检测成本低，检测结果准确度高、重复性好。

技术特征：

1.一种采用反相色谱法检测伏立康唑右旋异构体的方法，其特征在于，采用以硅胶表面共价键合直链淀粉-三（3-氯-5-甲基苯基氨基甲酸酯）为填料的色谱柱，流动相为乙腈-水，所述伏立康唑右旋异构体为式2所示化合物，

2. 根据权利要求1所述的方法，所述色谱柱为chiralpak ig柱。

3.根据权利要求2所述的方法，流动相中，乙腈-水的体积比为48：50~52：48，优选乙腈-水的体积比为50：50。

4.根据权利要求3所述的方法，流速为0.8~1.2ml/min，优选为1.0ml/min。

5.根据权利要求3所述的方法，检测波长为210~300nm，优选为256nm。

6.根据权利要求3所述的方法，柱温为25~35℃，优选为30℃。

7.根据权利要求3所述的方法，进样体积为10~30μl，优选为20μl。

8.根据权利要求3所述的方法，检测器采用紫外检测器。

9.根据权利要求3所述的方法，洗脱模式为等度洗脱。

10.根据权利要求1-9任一项所述的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

技术总结
本发明提供了一种反相色谱法检测伏立康唑右旋异构体的方法，采用以硅胶表面共价键合直链淀粉‑三（3‑氯‑5‑甲基苯基氨基甲酸酯）为填料的色谱柱，流动相为乙腈‑水。本发明方法耐用性好，专属性强、灵敏度高、准确度好及精密度好，适用于伏立康唑原料药和制剂中右旋异构体的检测。

技术研发人员：甘瑞雪,殷梦舟,卫中华,何林波,冯英
受保护的技术使用者：重庆药友制药有限责任公司
技术研发日：
技术公布日：2024/3/11