ACSL1作为检测靶点在制备ICP辅助诊断试剂盒中的应用的制作方法

发明领域本发明属于蛋白质组学及生殖医学领域，涉及acsl1作为检测靶点在制备icp辅助诊断试剂盒中的应用。

背景技术：

1、妊娠期肝内胆汁淤积症(intrahepatic cholestasis ofpregnancy,icp)是妊娠期严重危害母婴健康的并发症，这是一种以皮肤瘙痒、血清肝酶和总胆汁酸升高为特征的妊娠相关综合征，其发病率高达12.0％，可引起胎儿宫内窘迫、自发性早产、死胎等不良妊娠结局，增加围产儿发病率和死亡率。icp对妊娠最大的危害是发生难以预测的胎儿宫内死亡，有研究指出围产儿的死亡率约为正常妊娠者的6-10倍。如能早期发现icp并进行干预可有效降低该病所造成的母婴并发症，降低该病给母婴和其家庭带来的疾病痛苦和经济压力。然而目前为止临床上icp的监测手段非常有限，只能基于总胆汁酸的筛查，其敏感度及特异性较低。因而，探究icp疾病发生的敏感分子事件，并筛选易感生物标志物(susceptible biomarker)可为icp疾病的诊断和实施干预提供有效手段，对于促进人类母婴健康具有重大的科学意义。

2、蛋白质组学是在高通量水平上的研究，从蛋白质表达水平的变化，不同类型的修饰及蛋白间相互作用等方面入手，探索疾病的发生过程，为筛选疾病的辅助诊断分子标志物提供帮助。目前，蛋白质组学技术在妊娠期相关疾病中的研究逐年增多，包括妊娠期糖尿病，妊娠期高血压等疾病均通过蛋白质组学实验筛选出了有效的诊断标志物，提高了疾病的诊断效率。因此，通过蛋白质组学筛选诊断icp有效的生物标志物是一个新的，可行的实验手段。

3、然而，目前国内外还没有用于icp辅助诊断的较为稳定的蛋白质分子标志物的报道，若能通过蛋白质组学技术筛选出icp特异或异常表达的蛋白质分子作为生物标志物，并研制相应的辅助诊断试剂盒，将极大改善我国icp的诊断现状。

技术实现思路

1、本发明的首要目的是针对上述技术问题，提供一种与icp辅助诊断相关的孕期血清/血浆蛋白质分子标志物。

2、本发明的第二个目的是提供上述血清/血浆蛋白质分子标志物在制备icp辅助诊断试剂盒中的应用。

3、本发明第三个目的是提供用于icp辅助诊断的试剂盒。

4、本发明的目的是通过下列技术方案实现的：

5、acsl1(酰基辅酶a合成酶长链家族成员1)作为检测靶点在制备妊娠期肝内胆汁淤积症辅助诊断试剂盒中的应用。

6、acsl1在制备妊娠期肝内胆汁淤积症辅助诊断试剂盒中的应用。

7、检测acsl1的物质在制备妊娠期肝内胆汁淤积症辅助诊断试剂盒中的应用。

8、一种妊娠期肝内胆汁淤积症辅助诊断试剂盒，该试剂盒包括检测血清/血浆中acsl1的试剂。

9、本发明的发明点在于发现acsl1可以作为妊娠期肝内胆汁淤积症辅助诊断相关的血清/血浆蛋白质分子标志物。

10、具体地说，acsl1作为血清/血浆蛋白质分子标志物通过以下方法筛选得到：(1)构建icp孕鼠模型，以标准操作程序(sop)采集符合标准的胎盘组织标本。(2)icp孕鼠胎盘组织蛋白质组学分析：选择icp孕鼠作为病例组，健康孕鼠作为对照组，采用dia蛋白定量技术检测icp孕鼠及健康孕鼠胎盘组织中各蛋白质的含量，分析icp孕鼠和健康孕鼠蛋白质的共性和特性，筛选差异表达蛋白质。(3)为icp患者和健康妊娠者建立统一标准的标本库和数据库：以标准操作程序(sop)采集符合标准的血液样本，系统收集完整的人口学资料和临床资料。(4)icp患者血清/血浆中acsl1蛋白质分子标志物检测：血清/血浆蛋白质分子acsl1在icp患者中进行定量分析。

11、本发明的有益效果：

12、本发明提供的血清/血浆蛋白质分子标志物acsl1作为icp诊断的标志物的优越性在于：

13、本发明构建icp孕鼠模型，以标准操作程序(sop)采集符合标准的胎盘组织样本，并采用基于dia蛋白定量技术的蛋白质组学方法，通过icp孕鼠和健康孕鼠胎盘组织中蛋白质的变化，发现acsl1是与icp发病高度相关的高特异性和敏感性的蛋白质分子。同时，本发明以标准操作程序(sop)采集icp患者和健康妊娠者符合标准的血液，系统收集完整的人口学资料、临床资料等(这些资料可用于判断疾病进展，患者年龄等因素对于发病的影响)，验证初产、单胎妊娠的icp患者和与其年龄匹配的健康孕妇对照血清中acsl1的变化，多因素logistic回归分析结果表明，acsl1与icp的发病存在着显著关联，其roc如附图，auc为0.825，可为icp的筛查和诊断治疗提供实验室支持。

14、本发明初期采用蛋白质组学研究的方法获取icp孕鼠胎盘组织中疾病特异和异常表达的蛋白质acsl1，并同时应用酶联免疫吸附实验在icp患者大样本血清中进行了验证；以上方法和策略的应用加速和保证了血清/血浆蛋白质分子标志物acsl1诊断试剂盒的应用，也为其他疾病生物标志物的研制提供方法和策略上的借鉴。

15、本发明通过控制年龄等对疾病发展的影响因素，研究血清/血浆蛋白质分子标志物acsl1在icp诊断的应用前景，阐述异常表达的acsl1对于icp进展的影响，揭示其对icp的诊断价值。因此，本发明获得了icp发病特异性血清/血浆蛋白质分子标志物；通过血清/血浆蛋白质分子标志物acsl1和诊断试剂盒的研制和应用，可使得icp的诊断更加方便易行，为临床医生快速准确诊断icp及采取治疗措施奠定基础，并为发现具有潜在治疗价值的新型小分子药物靶标提供帮助。

技术特征：

1.acsl1作为检测靶点在制备妊娠期肝内胆汁淤积症辅助诊断试剂盒中的应用。

2.acsl1在制备妊娠期肝内胆汁淤积症辅助诊断试剂盒中的应用。

3.检测acsl1的物质在制备妊娠期肝内胆汁淤积症辅助诊断试剂盒中的应用。

4.一种妊娠期肝内胆汁淤积症辅助诊断试剂盒，该试剂盒包括检测血清/血浆中acsl1的试剂。

技术总结
本发明公开了ACSL1作为检测靶点在制备妊娠期肝内胆汁淤积症辅助诊断试剂盒中的应用。ACSL1在制备妊娠期肝内胆汁淤积症辅助诊断试剂盒中的应用。一种妊娠期肝内胆汁淤积症辅助诊断试剂盒，该试剂盒包括检测血清/血浆蛋白质分子标志物ACSL1的试剂。本发明发现ACSL1是与ICP发病高度相关的高特异性和敏感性的蛋白质分子，多因素Logistic回归分析结果表明，蛋白质分子与ICP的发病存在着显著关联，其ROC如附图，AUC为0.825，可为ICP的筛查和诊断治疗提供实验室支持。

技术研发人员：张婷,赵海剑,董蕊锐,程静,石英贤,黄欢,陈静,袁文青,赵敏,王铁军
受保护的技术使用者：无锡市妇幼保健院
技术研发日：
技术公布日：2024/2/29