一种半乳甘露聚糖样本处理剂及其应用的制作方法

本发明涉及半乳甘露聚糖检测，尤其涉及一种半乳甘露聚糖样本处理剂及其应用。

背景技术：

1、侵袭性真菌病即深部真菌病，是指致病性真菌侵犯皮下组织、黏膜、肌肉和内脏器官等所引起的真菌感染性疾病。近年来，由于造血干细胞移植和实体器官移植的广泛开展，高强度免疫抑制剂和大剂量化疗药物使用，各种导管的体内介入性检查和治疗等原因，人类侵袭性真菌感染的发病率急剧上升。据统计，自2000年以来，侵袭性真菌病每年以10％-20％的病例增加，已经成为医院感染防控面临的严重挑战，成为威胁住院病人生命安全的主要原因之一。侵袭性真菌感染占医院获得性感染的8％～15％。而侵袭性真菌病多发生在伴有严重基础疾病的患者身上，故预后差、病死率高，其中侵袭性曲霉病病死率高达50％～90％，未获得有效治疗的患者死亡率几乎达100％。

2、半乳甘露聚糖(gm)是曲霉菌细胞壁上的一种多聚抗原，其从薄弱的菌丝顶端释放，曲霉菌感染的患者血液内存在该物质，并且gm含量与感染程度相关，连续检测可作为病情转归和治疗疗效的评价指标，而且常于临床症状和影像学出现异常之前数日出现。所以，gm试验可用于曲霉菌感染的早期诊断的筛查指标。

3、市面上gm试验主要检测方法主要是酶联免疫法和化学发光法，影响gm检验准确性和检验效率的一个重要原因是临床样本处理，而目前的样本处理均采用：样本和样本处理剂混匀后先水浴加热或加热器加热(一般在120℃)然后再离心处理，操作繁琐，处理时间长，样本批量处理工作量大，并且加热处理存在安全隐患，所以gm试验亟需一种处理样本简便安全的样本处理剂。

技术实现思路

1、本发明的目的是解决现有技术中存在的问题，而提出一种半乳甘露聚糖样本处理剂及应用。

2、为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：

3、一种半乳甘露聚糖样本处理剂，包括蛋白质变性剂、tcep盐酸盐、乙二胺四乙酸盐、peg2000～20000，所述蛋白质变性剂为鞣酸、tca、磺基水杨酸、异硫氰酸胍、丙酮中的至少一种。

4、优选地，所述半乳甘露聚糖样本处理剂包括ph值为5.0-6.5的缓冲液，以避免半乳甘露聚糖过酸水解，对后续免疫反应影响较小，所述缓冲液优选为10mm-100mm、ph值为5.5-6.5的mes缓冲液或10mm-100mm、ph值为5.0-6.5的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。

5、优选地，所述蛋白质变性剂的浓度为10-100g/l，优选10-80g/l的磺基水杨酸。

6、优选地，所述tcep盐酸盐的浓度为0.1-0.5g/l。

7、优选地，所述乙二胺四乙酸盐的浓度为0.01-0.1g/l。

8、优选地，所述peg2000～20000的浓度为20-80g/l。

9、一种用于测定半乳甘露聚糖样本的前处理方法，包括将所述半乳甘露聚糖样本与上述处理剂混合、离心的步骤。

10、优选地，半乳甘露聚糖样本与处理剂混合的体积比为2-5:1，优选为3:1。

11、优选地，半乳甘露聚糖样本与处理剂的混合液在10000g离心力下离心的时间不少于3min。

12、本发明还提供一种检测半乳甘露聚糖的试剂盒，包括上述的半乳甘露聚糖样本处理剂。

13、一种半乳甘露聚糖样本处理剂的应用，将所述半乳甘露聚糖样本处理剂应用于半乳甘露聚糖检测的样本预处理中。

14、与现有技术相比，本发明提供了一种半乳甘露聚糖样本处理剂及其应用，具备以下有益效果：

15、(1)本发明提供的半乳甘露聚糖样本处理剂，简化了半乳甘露聚糖检测的样本处理过程，避免加热处理，降低了样本处理的安全隐患，并且缩短了样本处理时间，提高了半乳甘露聚糖样本的检测效率，并且使得半乳甘露聚糖的检验结果准确可靠；

16、(2)本发明提供的半乳甘露聚糖样本处理剂，通过蛋白变性沉淀法，不仅释放待测半乳甘露聚糖抗原，同时有效避免样本中的非特异性干扰，如降低因异嗜性抗体、类风湿因子等引起的假阳性率和假阴性率，提高诊断的准确性，本品结合化学发光免疫分析法使得gm试验的灵敏度、准确度和精密度高，本发明原理和理念适用其他免疫分析平台以及需要样本处理的免疫分析实验。

技术特征：

1.一种半乳甘露聚糖样本处理剂，其特征在于，包括蛋白质变性剂、tcep盐酸盐、乙二胺四乙酸盐、peg2000～20000，所述蛋白质变性剂为鞣酸、tca、磺基水杨酸、异硫氰酸胍、丙酮中的至少一种。

2.根据权利要求1所述的半乳甘露聚糖样本处理剂，其特征在于，还包括ph值为5.0-6.5的缓冲液，所述缓冲液优选为10mm-100mm、ph值为5.5-6.5的mes缓冲液或10mm-100mm、ph值为5.0-6.5的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。

3.根据权利要求1或2所述的半乳甘露聚糖样本处理剂，其特征在于，所述蛋白质变性剂的浓度为10-100g/l，优选为10-80g/l的磺基水杨酸。

4.根据权利要求1-3任一项所述的半乳甘露聚糖样本处理剂，其特征在于，所述tcep盐酸盐的浓度为0.1-0.5g/l。

5.根据权利要求1-4任一项所述的半乳甘露聚糖样本处理剂，其特征在于，所述乙二胺四乙酸盐的浓度为0.01-0.1g/l。

6.根据权利要求1-5任一项所述的半乳甘露聚糖样本处理剂，其特征在于，所述peg2000～20000的浓度为20-80g/l。

7.一种用于测定半乳甘露聚糖样本的前处理方法，其特征在于，包括将半乳甘露聚糖样本与权利要求1-6任一项所述的处理剂混合、离心的步骤。

8.根据权利要求7所述的用于测定半乳甘露聚糖样本的前处理方法，其特征在于，半乳甘露聚糖样本与处理剂混合的体积比为2-5:1，优选为3:1；半乳甘露聚糖样本与处理剂的混合液在10000g离心力下离心的时间优选为不少于3min。

9.一种检测半乳甘露聚糖的试剂盒，其特征在于，包括权利要求1-6任一项所述的半乳甘露聚糖样本处理剂。

10.一种半乳甘露聚糖样本处理剂的应用，其特征在于，将权利要求1-6任一项所述的半乳甘露聚糖样本处理剂应用于半乳甘露聚糖检测的样本预处理中。

技术总结
本发明公开了一种半乳甘露聚糖样本处理剂及其应用，所述半乳甘露聚糖样本处理剂包括蛋白质变性剂、TCEP盐酸盐、乙二胺四乙酸盐、PEG2000～20000，所述蛋白质变性剂为鞣酸、TCA、磺基水杨酸、异硫氰酸胍、丙酮中的至少一种；本发明简化了半乳甘露聚糖样本的处理过程，避免加热处理，降低了样本处理的安全隐患，并且缩短了样本处理时间，提高了检测效率，使得半乳甘露聚糖的检验结果准确可靠。

技术研发人员：蔡淑娟,张亚楠,李大军,邹昌鹏
受保护的技术使用者：苏州长光华医生物医学工程有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/3/4