一种测定烟酰胺注射液含量及检测有关物质的高效液相色谱方法与流程

本发明涉及医疗药品，尤其涉及一种测定烟酰胺注射液含量及检测有关物质的高效液相色谱方法。

背景技术：

1、烟酰胺是烟酸的酰胺化合物，系吡啶衍生物3-吡啶甲酰胺，属于水溶性b族维生素类药物，为辅酶ⅰ和辅酶ⅱ的组成部分，参与体内的代谢过程，为脂类代谢、组织呼吸的氧化作用和糖原分解所必需，具有抗氧化、抗炎、代谢调控作用，可在皮肤病、肿瘤等治疗方面发挥作用。

2、烟酰胺目前常使用的剂型为注射剂、片剂，现行质量标准烟酰胺原料使用滴定法、制剂使用紫外分光光度法测定含量，缺乏专属性；有关物质使用薄层色谱法控制烟酸及其他未知杂质，使用三氯甲烷作为展开剂，根据实验室前期实验，烟酸的灵敏度易受三氯甲烷质量的影响，不同来源的三氯甲烷导致灵敏度溶液的清晰程度不同，对实验结果带来较大的影响，未能有效控制产品的质量。

3、因此我们对此做出改进，提出一种测定烟酰胺注射液含量及检测有关物质的高效液相色谱方法。

技术实现思路

1、(一)本发明要解决的技术问题是：使用hplc梯度洗脱法测定烟酰胺注射液的含量和检测有关物质，所建立的方法专属性好，灵敏度高，可用于烟酰胺注射液的质量控制。

2、(二)技术方案

3、为了实现上述发明目的，本发明提供了一种测定烟酰胺注射液含量及检测有关物质的高效液相色谱方法，包括色谱条件下的检测和溶液的制备，所述色谱条件下的检测包括以下步骤：

4、s1、稀醋酸：取12g的冰醋酸，用水稀释至100ml，得到混合溶液x；

5、s2、取5ml的混合溶液x，加水900ml，再加稀氨溶液30ml与乙腈15ml，用水稀释至1000ml，再加入四氢呋喃5ml，摇匀，得到混合溶液z；

6、s3、观察流速梯度变化，设定柱温为30℃，含量测定检测波长为261nm、有关物质测定波长为264nm，进样量为10μl。

7、优选的，所述步骤s1中，冰醋酸的含量为99.0％～100.5％。

8、优选的，所述步骤s2中，取0.7g浓氨水，用水稀释至100ml。

9、优选的，所述浓氨水的含量为25.0％～30.0％。

10、优选的，所述溶液的制备包括以下步骤：

11、a、制作含量测定对照品溶液，取烟酰胺对照品约10mg置于量瓶中，精密称定，加入流动相约7ml，超声使溶解，冷至室温，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为烟酰胺对照品储备液；精密量取烟酰胺对照品储备液1ml置于量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，得到烟酰胺对照品溶液；

12、b、制作有关物质检测对照品溶液，取烟酰胺及杂质a、b、c、d、e对照品各约10mg分别置于量瓶中，加入流动相约7ml，超声使溶解，冷至室温，用流动相稀释至刻度，摇匀，即得各对照品储备液。精密量取各对照品储备液各5ml置于同一量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，记得混合对照品储备液。精密量取混合对照品储备液1ml置于量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，得到有关物质检测用对照品溶液；

13、c、制作系统适用性溶液，取利巴韦林对照品置于10ml量瓶中，精密加入步骤a烟酰胺对照品溶液1ml，加入流动相约6ml，超声使溶解，冷至室温，用流动相稀释至刻度，摇匀；

14、d、制作含量测定供试品溶液，精密量取注射液1ml，置于量瓶中用流动相稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml，置于量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀；

15、e、制作有关物质检测供试品溶液，精密量取注射液1ml，置于量瓶中用流动相稀释至刻度，摇匀。

16、优选的，所述步骤a～步骤c中，所使用的量瓶体积大小包括但不限于10ml和20ml。

17、优选的，所述步骤d和步骤e中，所使用的量瓶体积大小包括但不限于50ml和100ml。

18、(三)有益效果

19、本发明所提供的一种测定烟酰胺注射液含量及检测有关物质的高效液相色谱方法，其有益效果是：

20、通过大量的实验证明，本发明中所建立的hplc法能有效地分离烟酰胺与各物质，所建立的方法准确，灵敏，专属性好，可有效地用于烟酰胺注射液质量的控制，亦可后续继续研究将其应用于烟酰胺原料、烟酰胺片等的质量控制。

技术特征：

1.一种测定烟酰胺注射液含量及检测有关物质的高效液相色谱方法，包括色谱条件下的检测和溶液的制备，其特征在于，所述色谱条件下的检测包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种测定烟酰胺注射液含量及检测有关物质的高效液相色谱方法，其特征在于，所述步骤s1中，冰醋酸的含量为99.0％～100.5％。

3.根据权利要求1所述的一种测定烟酰胺注射液含量及检测有关物质的高效液相色谱方法，其特征在于，所述步骤s2中，取0.7g浓氨水，用水稀释至100ml。

4.根据权利要求3所述的一种测定烟酰胺注射液含量及检测有关物质的高效液相色谱方法，其特征在于，所述浓氨水的含量为25.0％～30.0％。

5.根据权利要求1所述的一种测定烟酰胺注射液含量及检测有关物质的高效液相色谱方法，其特征在于，所述溶液的制备包括以下步骤：

6.根据权利要求5所述的一种测定烟酰胺注射液含量及检测有关物质的高效液相色谱方法，其特征在于，所述步骤a～步骤c中，所使用的量瓶体积大小包括但不限于10ml和20ml。

7.根据权利要求5所述的一种测定烟酰胺注射液含量及检测有关物质的高效液相色谱方法，其特征在于，所述步骤d和步骤e中，所使用的量瓶体积大小包括但不限于50ml和100ml。

技术总结
本发明涉及医疗药品技术领域，提出了一种测定烟酰胺注射液含量及检测有关物质的高效液相色谱方法，包括色谱条件下的检测和溶液的制备，所述色谱条件下的检测包括以下步骤：S1、稀醋酸：取12g的冰醋酸，用水稀释至100mL，得到混合溶液X；S2、取5mL的混合溶液X，加水900mL，再加稀氨溶液30mL与乙腈15mL，用水稀释至1000mL，再加入四氢呋喃5mL，摇匀，得到混合溶液Z；S3、观察流速梯度变化，设定柱温为30℃，含量测定检测波长为261nm、有关物质测定波长为264nm，进样量为10μL。本发明中所建立的HPLC法能有效地分离烟酰胺与各物质，所建立的方法准确，灵敏，专属性好，可有效地用于烟酰胺注射液质量的控制。

技术研发人员：赵庄,谭菊英,邓鸣,朱健萍,蒋洁,何虹,刘庄蔚,杨欣智
受保护的技术使用者：广西壮族自治区食品药品检验所
技术研发日：
技术公布日：2024/3/4