基于大麦吸水率的赤霉素含量的评价方法与流程

本发明属于分析检测，尤其涉及到一种基于大麦吸水率的赤霉素含量的评价方法。

背景技术：

1、大麦是啤酒酿造的主要原料，通过制麦激活各种水解酶活力，在糖化过程中将麦芽中非水溶性物质逐步水解为小分子水溶性的营养物质，供酵母发酵产生酒精以及各种风味物质。

2、植物激素(phytohormone)是指植物体内产生的一些微量而能调节(促进、抑制)自身生理过程的有机化合物。植物激素对植物的生长发育有重要的调控作用，参与调控细胞的分裂、伸长、分化、植物发芽、生根、开花、结实、性别决定、休眠和脱落等。植物激素赤霉酸(ga)和脱落酸(aba)是拮抗调节大麦发芽的主要激素。制麦过程中淀粉向糖的转化主要由α-淀粉酶、β-淀粉酶和极限糊精酶催化。研究表明赤霉素诱导糊粉层α-淀粉酶的增多，脱落酸阻断这一反应。因此制麦过程中的赤霉素含量高低对于种子的萌发、溶解具有很重要的意义。

3、目前制麦过程赤霉素含量常用的测定方法有高效液相色谱法、酶联免疫吸附试验(elisa)。利用高效液相色谱法测定赤霉素准确性高，但仪器价格昂贵且测试费用较高。利用elisa方法测定赤霉素灵敏度低且样本间误差比较大。

技术实现思路

1、本发明提供了一种基于大麦吸水率的赤霉素含量的评价方法，该方法可通过测定大麦吸水率提前预测萌发过程的赤霉素含量。操作简单，无需复杂仪器，检测时间缩短，可满足根据检测结果及时评价萌发过程中赤霉素含量的需要。

2、为了达到上述目的，本发明提供了一种基于大麦吸水率的赤霉素含量的评价方法，包括以下步骤：

3、测定大麦在萌发过程中的不同时间点的吸水率；

4、测定大麦在萌发过程中的赤霉素含量；

5、将测得的大麦吸水率与赤霉素含量进行回归分析，得到关系曲线，以预测制麦过程中的赤霉素含量。

6、作为优选，不同时间点为0、2、4、8小时。

7、作为优选，测定大麦在萌发过程中的不同时间点的吸水率具体为：

8、取5g大麦，加入20ml无菌水，20-25℃孵育，于不同时间点(0、2、4、8h)取出，用滤纸擦去表面水分，称重w，计算吸水率：

9、吸水率(％)＝(w-5)/5*100。

10、作为优选，测定大麦在萌发过程中的赤霉素含量具体为：

11、在酶标板上设置赤霉素的标准品孔、样本孔和空白孔，标准品孔各加不同浓度的赤霉素标准品50ul，样本孔加待测样品50ul，空白孔加样本稀释液50ul；

12、标准品孔、样本孔和空白孔中每孔加入辣根过氧化物酶标记的赤霉素抗体100ul，盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时；

13、甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干，重复若干次操作；

14、每孔加入底物过氧化氢、四甲基联苯胺各50ul，轻轻振荡混匀，37℃避光温育15分钟；

15、取出酶标板，迅速加入50ul 2m h2so4终止液，加入终止液后，立即于450nm波长处测定各孔的od值；

16、以标准品浓度作横坐标，对应od值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。

17、作为优选，所述赤霉素的线性回归曲线方程为y＝0.0064x-0.0679，r2＝0.9944。

18、作为优选，对测得的大麦吸水速率与赤霉素含量进行回归分析包括对大麦萌发0-2小时阶段和/或萌发2-8小时阶段的回归分析。

19、作为优选，大麦萌发0-2小时时，赤霉素含量＝5.36*吸水率-39.961；

20、萌发2-8小时时，赤霉素含量＝11.64*吸水率-244.41。

21、与现有技术相比，本发明的优点和积极效果在于：

22、本发明提供的基于大麦吸水率的赤霉素含量的评价方法，相对于目前已有的检测技术，可通过测定大麦吸水率提前预测萌发过程的赤霉素含量。该方法操作简单，无需复杂仪器，检测时间缩短，可满足根据检测结果及时评价萌发过程中赤霉素含量的需要。

技术特征：

1.基于大麦吸水率的赤霉素含量的评价方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的评价方法，其特征在于，不同时间点为0、2、4、8小时。

3.根据权利要求1所述的评价方法，其特征在于，测定大麦在萌发过程中的不同时间点的吸水速率具体为：

4.根据权利要求1所述的评价方法，其特征在于，测定大麦在萌发过程中的赤霉素含量具体为：

5.根据权利要求1-4任一项所述的评价方法，其特征在于，对测得的大麦吸水率与赤霉素含量进行回归分析包括对大麦萌发0-2小时阶段和/或萌发2-8小时阶段的回归分析。

6.根据权利要求5所述的评价方法，其特征在于，大麦萌发0-2小时时，赤霉素含量＝5.36*吸水率-39.961，r2＝0.8284；

技术总结
本发明提供了一种基于大麦吸水率的赤霉素含量的评价方法，属于分析检测技术领域。本发明提供的基于大麦吸水率的赤霉素含量的评价方法包括以下步骤：测定大麦在萌发过程中的不同时间点的吸水率；测定大麦在萌发过程中的赤霉素含量；将测得的大麦吸水率与赤霉素含量进行回归分析，得到关系曲线，以预测萌发过程中的赤霉素含量。该方法可通过测定大麦吸水率提前预测萌发过程的赤霉素含量。操作简单，无需复杂仪器，检测时间缩短，可满足根据检测结果及时评价萌发过程中赤霉素含量的需要。

技术研发人员：胡淑敏,秦青青,余俊红,张磊,刘佳,黄淑霞,任泽明
受保护的技术使用者：青岛啤酒股份有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/3/12