一种检测农药植保产品中游离氨基葡萄糖的方法与流程

本发明属于检测，具体涉及一种检测农药植保产品中游离氨基葡萄糖的方法。

背景技术：

1、氨基葡萄糖是一种广泛存在于自然界的小分子单糖，在医药和保健品等领域有广泛的应用。目前的氨基葡萄糖的检测方法主要分为分光光度计法、离子色谱法和衍生化法。然而，分光光度计法中，衍生后的产物不稳定，随着时间的变化，显色逐渐加深，影响含量的准确性；另外当样品本身存在颜色时，会严重出现干扰，导致氨基葡萄糖的含量严重超高；离子色谱法在样品组分复杂时，河南分离氨基葡萄糖和其他组分；衍生化法需要在暗处避光条件下进行，巯基丙酸在氨基葡萄糖和邻苯二甲醛的反应中会引入多种副反应，导致衍生化产物复杂，对结果的测定产生严重的干扰。

2、因此，目前亟需一种衍生反应稳定、衍生物稳定性好的氨基葡萄糖的检测方法。

技术实现思路

1、针对现有技术中的问题，本发明提供一种检测农药植保产品中游离氨基葡萄糖的方法，解决了现有衍生物反应长、温度高和稳定性差的问题，利用巯基乙醇上的羟基与巯基，形成有效的连接，提高了巯基的反应活性，降低了衍生反应的温度，实现常温反应，同时也能够大大提高了衍生物的稳定性。

2、为实现以上技术目的，本发明的技术方案是：

3、一种检测农药植保产品中游离氨基葡萄糖的方法，以甲醇+乙腈+0.04％磷酸水为流动相，使用c18为填料的不锈钢柱和紫外检测器，将试样溶液与衍生溶液进行空气混合后，进行高效液相色谱分离和测定，外标法定量使用色谱柱。

4、所述衍生溶液中含有巯基乙醇。

5、所述液相色谱的流速为1ml/min，柱温为30℃，且温度变化不超过2℃。

6、所述检测波长为330nm。

7、所述进样体积为10μl。

8、所述方法的具体步骤包括：

9、步骤1，标样溶液的制备：转却称取盐酸氨基葡萄糖标样0.01g，并至于50ml容量瓶中，用去离子水稀释至刻度，超声振荡5min，完全溶解后冷却至室温，摇匀，得到溶液a；

10、步骤2，采用移液管移取溶液a5ml至于50ml的容量瓶中，用去离子水稀释至刻度，超声振荡5min，经完全溶解并冷却至室温，摇匀得到标样溶液；

11、步骤3，试样溶液的制备：称取1g试样置于50ml容量瓶中，用水稀释至刻度，超声振荡5min使之完全溶解，冷却至室温，摇匀，此为试样溶液；

12、步骤4，衍生溶液的制备：称取0.1gopa用10ml甲醇溶解，加入0.1g巯基乙醇，0.4mol/l硼酸钠缓冲溶液定容至100ml，得到衍生溶液，所述硼酸钠缓冲溶液是称取2.48g硼酸、1.41g氢氧化钠，用水溶解定容至100ml。

13、步骤5，待仪器稳定后，连续注入数针标样溶液，计算各针相对响应值，待相邻两针的氨基葡萄糖相对响应值变化小于1.5％后，按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进行测定。

14、所述测定前，衍生溶液通过空气浴与测试溶液进行混合，几秒后进样至液相色谱仪内。

15、从以上描述可以看出，本发明具备以下优点：

16、1.本发明解决了现有衍生物反应长、温度高和稳定性差的问题，利用巯基乙醇上的羟基与巯基，形成有效的连接，提高了巯基的反应活性，降低了衍生反应的温度，实现常温反应，同时也能够大大提高了衍生物的稳定性。

17、2.本发明通过巯基乙醇的活性反应，促进氨基葡萄糖和邻苯二甲醛的常温快速反应，减少了衍生反应的时间，实现了柱前衍生混合的可行性，规避了衍生产物在放置待检时间内的分解问题。

技术特征：

1.一种检测农药植保产品中游离氨基葡萄糖的方法，其特征在于：所述方法以甲醇+乙腈+0.04％磷酸水为流动相，使用c18为填料的不锈钢柱和紫外检测器，将试样溶液与衍生溶液进行空气混合后，进行高效液相色谱分离和测定，外标法定量使用色谱柱；所述衍生溶液中含有巯基乙醇。

2.根据权利要求1所述的检测农药植保产品中游离氨基葡萄糖的方法，其特征在于：所述液相色谱的流速为1ml/min，柱温为30℃，且温度变化不超过2℃。

3.根据权利要求1所述的检测农药植保产品中游离氨基葡萄糖的方法，其特征在于：所述检测波长为330nm。

4.根据权利要求1所述的检测农药植保产品中游离氨基葡萄糖的方法，其特征在于：所述进样体积为10μl。

5.根据权利要求1所述的检测农药植保产品中游离氨基葡萄糖的方法，其特征在于：所述方法的具体步骤包括：

6.根据权利要求5所述的检测农药植保产品中游离氨基葡萄糖的方法，其特征在于：所述步骤5中的测定是衍生溶液通过空气浴与测试溶液进行混合，几秒后进样至液相色谱仪内。

7.根据权利要求5所述的检测农药植保产品中游离氨基葡萄糖的方法，其特征在于：所述硼酸钠缓冲溶液是称取2.48g硼酸、1.41g氢氧化钠，用水溶解定容至100ml。

技术总结
本发明属于检测技术领域，具体涉及一种检测农药植保产品中游离氨基葡萄糖的方法，以甲醇+乙腈+0.04％磷酸水为流动相，使用C18为填料的不锈钢柱和紫外检测器，将试样溶液与衍生溶液进行空气混合后，进行高效液相色谱分离和测定，外标法定量使用色谱柱，且所述衍生溶液中含有巯基乙醇。本发明解决了现有衍生物反应长、温度高和稳定性差的问题，利用巯基乙醇上的羟基与巯基，形成有效的连接，提高了巯基的反应活性，降低了衍生反应的温度，实现常温反应，同时也能够大大提高了衍生物的稳定性。

技术研发人员：胡剑锋,尚伟,徐丽娟,徐琦,郑锋
受保护的技术使用者：浙江世佳科技股份有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/3/31