用于制备水凝胶的组合物和水凝胶及其制备方法与应用以及使用水凝胶检测孔雀石绿的方法

本发明涉及孔雀石绿检测领域，具体涉及一种用于制备用于检测孔雀石绿的水凝胶的组合物、用于检测孔雀石绿的水凝胶的制备方法、用于检测孔雀石绿的水凝胶，以及用于检测孔雀石绿水凝胶在孔雀石绿检测领域的应用和使用水凝胶检测孔雀石绿的方法。

背景技术：

1、孔雀石绿(malachite green，mg)是一种三苯甲烷类有机化合物，易溶于水，曾在水产养殖中被用作预防和治疗鱼类真菌、细菌和寄生虫感染的常用药物。

2、后续研究发现，孔雀石绿具有潜在的致癌、致畸、致突变的副作用。因此，快速检测水体中的孔雀石绿，是监控和保障水产品质量安全的重要技术手段。

3、当前孔雀石绿的国家标准检测方法有高效液相色谱荧光检测法和液相色谱-串联质谱法，地方和行业标准检测方法有激光拉曼光谱法和液相色谱法。这些方法检测结果准确、重复性好、灵敏度高，但依赖昂贵的大型检测仪器，需要专业操作技术人员，对样品处理要求高，检测时间长，仅在实验室内才能够完成检测，无法满足实际生产的需求。

4、为应对上述标准检测方法的不足，国内外研究人员开发了许多快速检测孔雀石绿的方法，如酶联免疫分析法、胶体金免疫层析法、基于适配体识别元件传感器检测法等。这些方法不依赖昂贵仪器、操作较简便，检测时间缩短，但仍然存在检测成本高、稳定性差等问题，无法满足孔雀石绿简便、快速检测的需求。

5、因此，需要发明一种制备方法简单、成本低廉且具有良好检测性能的功能材料，以便快速、简单、便捷地检测孔雀石绿。

技术实现思路

1、为了克服上述问题，本发明提供了一种用于检测孔雀石绿的水凝胶、用于检测孔雀石绿水凝胶的制备方法，以及用于检测孔雀石绿水凝胶在孔雀石绿检测领域的应用和使用水凝胶检测孔雀石绿浓度的方法。上述水凝胶使用了特定含量的tb3+、鸟苷-5'-单磷酸和硫黄素t，使其具有良好的荧光发光性能。在与不同浓度孔雀石绿混合后，上述水凝胶的荧光强度会发生不同程度的改变，使用上述检测方法，即可精确地检测出孔雀石绿的浓度。

2、本发明第一方面提供一种用于制备能够检测孔雀石绿的水凝胶的组合物，其中，所述组合物含有tb3+、鸟苷-5'-单磷酸和硫黄素t；其中，所述组合物呈酸性。

3、本发明第二方面提供一种用于检测孔雀石绿的水凝胶的制备方法，其中，所述方法包括：

4、在酸性条件下，将tb3+、鸟苷-5'-单磷酸和硫黄素t混合。

5、优选地，所述方法包括：

6、(1)将tb3+与水混合，并调整其ph值，使其为酸性，得到第一溶液；

7、(2)将硫黄素t与水混合，并调整其ph值，使其为酸性，得到第二溶液；

8、(3)将鸟苷-5'-单磷酸与水混合，并调整其ph值，使其为酸性，得到第三溶液；

9、(4)将第一溶液、第二溶液与水混合，得到第四溶液；

10、(5)将第三溶液与第四溶液混合，得到水凝胶。

11、本发明第三方面提供一种第二方面所述方法制备得到的水凝胶。

12、本发明第四方面提供一种第一方面所述组合物或者第三方面所述水凝胶在检测孔雀石绿中的应用。

13、本发明第五方面提供一种使用水凝胶检测孔雀石绿的方法，其中，检测方法包括：

14、(1)将水凝胶与含有孔雀石绿的样本溶液混合，并在避光条件下反应15-30min，得到待测溶液；

15、(2)设置激发波长为420-430nm，测量450-600nm之间的荧光发射光谱；

16、(3)根据预先绘制的线性回归曲线和反应混合物在485nm处的荧光发射峰峰值推算得到样本溶液中孔雀石绿的浓度；

17、其中，所述水凝胶为第三方面所述水凝胶。

18、与现有技术相比，本发明具有如下优点：

19、1、本发明所述水凝胶具有g-4链体平面结构，能够显著增强硫黄素t的荧光强度，具有良好的光学性能；

20、2、本发明所述水凝胶的制备方法简单，无需加热处理即可凝固成凝胶，且无需洗涤凝胶；

21、3、本发明所述水凝胶合成时间短，溶剂混合后即可形成凝胶；

22、4、本发明的检测方法简单，仅需混匀和孵育反应，无其他分离、富集、洗涤等步骤，可利用酶标仪进行高通量、快速、简单、便捷检测孔雀石绿；

23、5、从凝胶合成到检测孔雀石绿所需时间短，可控制在30min以内，荧光信号与孔雀石绿浓度在10-750μg/kg内呈良好的线性关系，检出限为3.23μg/kg。

技术特征：

1.一种用于制备能够检测孔雀石绿的水凝胶的组合物，其特征在于，所述组合物中含有tb3+、鸟苷-5'-单磷酸和硫黄素t；

2.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述tb3+的浓度为2-12mmol/l，优选为4-8mmol/l；

3.根据权利要求1或2所述的组合物，其中，所述组合物的ph值为2-6。

4.一种用于检测孔雀石绿的水凝胶的制备方法，其特征在于，所述方法包括：

5.根据权利要求4所述的方法，其中，该方法包括：第一溶液、第二溶液、第三溶液的ph值各自独立地为2-6；

6.权利要求4或5所述制备方法制得的水凝胶。

7.权利要求1-3中任意一项所述组合物或者权利要求6所述水凝胶在检测孔雀石绿中的应用。

8.一种使用水凝胶检测孔雀石绿的方法，其特征在于，检测方法包括：

9.根据权利要求8所述方法，其中，水凝胶与样本溶液的体积比为7-12：1；

10.根据权利要求8或9所述方法，其中，所述线性回归曲线的绘制方法包括：

技术总结
本发明涉及孔雀石绿检测领域，具体涉及一种用于制备水凝胶的组合物和水凝胶及其制备方法与应用以及使用水凝胶检测孔雀石绿的方法。其中，所述用于制备能够检测孔雀石绿的水凝胶的组合物中含有Tb<supgt;3+</supgt;、鸟苷‑5'‑单磷酸和硫黄素T，且所述组合物呈酸性。使用上述组合物制备得到的水凝胶具有良好的荧光发光性能，在与不同浓度孔雀石绿混合后，会发生不同程度的改变，并可以精确地检测出孔雀石绿的浓度。

技术研发人员：何开雨
受保护的技术使用者：浙江省农业科学院
技术研发日：
技术公布日：2024/4/7