一种基于GC-MS测定化妆品中除草醚和吡氟禾草灵的方法与流程

本发明属于化妆品检测，具体涉及一种基于gc-ms测定化妆品中除草醚和吡氟禾草灵的方法。

背景技术：

1、除草醚(nitrofen)为醚类选择性触杀型除草剂。由于对水生动物低毒，自20世纪60年代迅速取代五氯酚钠用于稻田除草，在我国稻田化除草中曾起过重要作用。但是，随着动物试验的深入，现已明确除草醚对哺乳动物具有致癌、致畸、致突变作用，且经皮吸收后的致畸和致癌作用远比经口后更为强烈，鉴于此，国家农业农村部已明令禁止再使用除草醚。吡氟禾草灵(fluazifop-butyl)，又名稳杀得，是内吸传导型茎叶处理除草剂，大鼠急性经口ld50为3328毫克/公斤，小鼠雄性为1490毫克/公斤，雌性为1770毫克/公斤，对眼睛刺激轻微，对皮肤无刺激作用。我国《化妆品安全技术规范》(2015版)明确规定化妆品中除草醚和吡氟禾草灵不得检出。近年来，消费者越来越追求天然化妆品，植物提取物等功效化妆品受到追捧。但是，其植物在栽培过程中，难以避免使用除草剂等农药，农药则可能随着生产过程被带入植物提取物，长期使用此类化妆品，可能诱发人体出现过敏皮炎、致癌、致畸等潜在风险。

2、目前，针对化妆品中除草醚和吡氟禾草灵检测方法尚未见报道，多集中在食品检测领域，故而，获得一种能够快速检测化妆品中除草醚和吡氟禾草灵的方法是化妆品检测领域的研究方向之一。

技术实现思路

1、为了解决上述技术问题，本发明提供一种气相色谱质谱仪(gc-ms)测定化妆品中除草醚和吡氟禾草灵的方法，该方法实现了不同基质化妆品中除草醚和吡氟禾草灵的检测，方法简单易操作，减少有机溶剂的用量，达到高回收、高灵敏度的检测要求。

2、为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

3、一种gc-ms测定化妆品除草醚和吡氟禾草灵的方法，包括以下步骤：

4、s1、提取：将样品与提取溶剂混合并进行超声提取，离心，取上清液进行氮吹，得到含有提取物的待净化液；

5、s2、净化：取步骤s1的待净化液于固相萃取柱中进行过柱，收集滤液，于45℃水浴下氮气吹干，然后用有机溶剂溶解并定容，混合均匀后，经有机膜过滤得到净化液；

6、s3、检测：采用气相色谱-质谱仪对步骤s2所得的净化液进行检测分析。

7、进一步地，所述的提取溶剂为乙腈、乙腈-水溶液(v/v＝9:1)、乙腈-水溶液(v/v＝8:2)中的任一种。

8、作为优选，所述提取溶剂为乙腈-水溶液(v/v＝9:1)。

9、在本发明中，优先采用乙腈-水溶液(v:v＝9:1)提取，不同基质化妆品的除草醚和吡氟禾草灵的回收率为82.97～102.18％、86.33～113.47％，回收效果好。

10、进一步地，所述固相萃取柱为中性氧化铝固相萃取柱(al-n，500mg/6ml)、十八烷基硅胶固相萃取柱(c18，200mg/3ml)、弗罗里硅土+中性氧化铝复合柱(florisil+al-n，1g/6ml+1g)，n-丙基乙二胺固相萃取柱(psa，200mg/3ml)，聚苯乙烯/二乙烯基苯共聚物固相萃取柱(hlb，500mg/6ml)、增强型脂质去除固相萃取柱(emr-lipid，600mg/6ml)的任一种。

11、作为优选，所述固相萃取柱为增强型脂质去除固相萃取柱(emr-lipid，600mg/6ml)。

12、在本发明中，优选采用增强型脂质去除固相萃取柱(emr-lipid，600mg/6ml)进行净化时，不同基质化妆品的除草醚和吡氟禾草灵的回收率为85.74％和82.39％，回收效果好。

13、进一步地，所述步骤s1的具体提取步骤为：在样品中加入提取溶剂，振荡2-2.5min，使样品与提取溶剂充分混匀，在超声下提取10-20min，于9000-11000r/min下离心5-10min，取全部上清液进行氮吹至5ml，得到待净化液。

14、更进一步地，所述步骤s1中的样品具体为精油类或霜膏类化妆品的一种，所述步骤s1的具体提取步骤为：称取化妆品样品0.50g(精确至0.001g)于50ml离心管中，加入10ml乙腈-水溶液(v:v＝9:1)，涡旋振荡2min，使样品与提取溶剂充分混匀，超声提取15min，10000r/min离心5min，上清液全部转移至15ml试管中，45℃水浴中氮吹至5ml，待净化。

15、进一步地，所述步骤s2的具体净化步骤为：将待净化液全部上样至emr-lipid固相萃取柱，收集滤液，45℃水浴中氮吹至近干。然后加入2ml乙酸乙酯复溶残留物，45℃水浴中氮吹至近干，并重复一次。最后用乙酸乙酯定容至1ml，经0.22μm微孔滤膜过滤，上机待测。

16、进一步地，所述气相色谱法质谱联用仪的检测条件为：色谱柱：hp-5ms毛细管柱，柱长30.0m，内径0.25mm，膜厚0.25μm；程序升温：初始温度100℃，保持2min，以50℃/min的速率，升温至230℃，继续以2℃/min的速率，升温至250℃，再以30℃/min的速率，升温至310℃，保持5min；进样口温度：270℃；质谱接口温度：280℃；离子源温度：230℃；载气：he，纯度≥99.999％，1.0ml/min恒流；进样量：1μl；进样方式：脉冲不分流；电离方式：ei；溶剂延迟：5min；质谱扫描方式：选择离子模式。

17、相对于现有技术，本发明取得了有益的技术效果：

18、本发明首次建立了测定不同基质的化妆品中除草醚和吡氟禾草灵的gc-ms的方法，样品经提取溶剂提取，经过固相萃取柱净化后上机检测，统计结果表明，该方法的平均回收率介于81.47％～109.87％，相对标准偏差(rsd)为0.50％～10.97％，均满足sn/t0001-2016的要求，除草醚检出限为0.020mg/kg，定量限为0.050mg/kg；吡氟禾草灵检出限为0.004mg/kg，定量限为0.010mg/kg。

19、本发明提供的方法对除草醚和吡氟禾草灵的分离度好，灵敏度、准确度和精密度高，且前处理方法简单、快速，该方法可用于化妆品中的除草醚和吡氟禾草灵的风险评估和筛查监测，具有较广的应用前景。

技术特征：

1.一种基于gc-ms测定化妆品中除草醚和吡氟禾草灵的方法，其特征在于：包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤s1中的样品为精油类或霜膏类化妆品；具体提取步骤为：在样品中加入提取溶剂，振荡2-2.5min，使样品与提取溶剂充分混匀，在超声下提取10-20min，于9000-11000r/min下离心5-10min，取全部上清液进行氮吹至5ml，得到待净化液。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述的提取溶剂为乙腈、体积比为9:1的乙腈-水溶液、体积比为8:2的乙腈-水溶液中的任一种。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：所述的提取溶剂为体积比为9:1的乙腈-水溶液。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤s2的具体净化步骤为：将待净化液全部上样至固相萃取柱，收集滤液，45 ℃水浴中氮吹至近干，加入2 ml乙酸乙酯复溶残留物，45 ℃水浴中氮吹至近干，并重复一次；最后用乙酸乙酯定容至1 ml，经0.22 μm微孔滤膜过滤。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：所述的固相萃取柱为中性氧化铝固相萃取柱、十八烷基硅胶固相萃取柱、弗罗里硅土+中性氧化铝复合柱、n-丙基乙二胺固相萃取柱、聚苯乙烯/二乙烯基苯共聚物固相萃取柱、增强型脂质去除固相萃取柱中的任一种。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：所述的固相萃取柱为增强型脂质去除固相萃取柱。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述气相色谱-质谱仪的检测条件为：色谱柱：hp-5ms毛细管柱，柱长30.0 m，内径0.25 mm，膜厚0.25 μm；程序升温：初始温度100 ℃，保持2 min，以50 ℃/min的速率，升温至230 ℃，继续以2 ℃/min的速率，升温至250 ℃，再以30 ℃/min的速率，升温至310 ℃，保持5 min；进样口温度：270 ℃；质谱接口温度：280℃；离子源温度：230 ℃；载气：he，纯度＞99.999％，1.0 ml/min恒流；进样量：1µl；进样方式：脉冲不分流；电离方式：ei；溶剂延迟：5 min；质谱扫描方式：选择离子模式。

技术总结
本发明公开了一种基于GC‑MS测定化妆品中除草醚和吡氟禾草灵的方法，属于化妆品检测技术领域。所述方法包括以下步骤：S1、提取：将样品与提取溶剂混合并进行超声提取，离心，取上清液进行氮吹，得到含有提取物的待净化液；S2、净化：取步骤S1的待净化液于固相萃取柱中进行过柱，收集滤液，于45℃水浴下氮气吹干，然后用有机溶剂溶解并定容，混合均匀后，过滤得到净化液；S3、检测：采用气相色谱‑质谱仪对步骤S2所得的净化液进行检测分析。该方法首次实现了不同基质化妆品中除草醚和吡氟禾草灵的检测，且具有分离度好、灵敏度、准确度和精密度高的优点。

技术研发人员：王璐,黎天勇,洪灯,周思旭,谢建军,侯颖烨,曾广丰,陈桂琴,蔡翠玲,李菊,席静
受保护的技术使用者：广州海关技术中心
技术研发日：
技术公布日：2024/4/7