模拟移动床方式色谱分离方法以及模拟移动床方式色谱分离系统与流程

本发明涉及模拟移动床方式色谱分离方法以及模拟移动床方式色谱分离系统。

背景技术：

1、在基于模拟移动床方式的色谱分离中，构筑如下循环系统：将填充了相对于原液中所包含的两种成分以上的成分中的特定成分具有选择性吸附能力的吸附剂的多个单位填充塔(以下，也简称为“填充塔”，有时也称为“柱”)经由配管串联连结，并且将最下游部的填充塔与最上游部的填充塔连结而形成环状。对该循环系统供给原液和洗脱液，并且将循环系统内的移动速度快的组分(弱吸附性组分)、慢的组分(强吸附性组分)、以及根据需要而移动速度为中间的组分(中吸附性组分)分别从不同的位置提取，接着，将原液供给位置、洗脱液供给位置、弱吸附性组分的提取位置、中吸附性组分的提取位置、以及强吸附性组分的提取位置保持为一定的位置关系的同时，使其朝向循环系统的流体循环方向移动。通过重复该操作，模拟地实现能够连续地进行原液供给的移动床的处理操作。

2、例如在专利文献1中，记载了一种多成分系统的分离方法，其特征在于，对于使用多个填充有吸附剂的单位填充层来形成环形串联的循环流路，并且该循环流路被设置为能够循环、阻断的系统，通过使包含相对于吸附剂的亲和性不同的三种以上的成分的原料流体在所述多个单位填充层中流通，由此形成从相对于吸附剂的亲和力弱的成分到相对于吸附剂的亲和力强的成分依次分开的吸附带区域，针对该系统，将如下的各工序作为一个循环并反复进行：第一工序，在比从亲和力弱的成分中预先选择的成分所形成的吸附带区域靠上游的位置阻断上述系统的循环的同时，在该阻断的下游位置向该系统供给原料流体，并且从该系统中提取在阻断位置的上游形成吸附带区域的成分中预先确定的成分富集的组分；以及第二工序，在不供给原料流体而使上述系统循环的同时，从吸附带区域的上游供给解吸剂流体而分别提取在上述第一工序中未提取的被分为吸附带区域的各成分富集的组分，并且根据吸附带区域的移动，使解吸剂流体的供给位置和上述各组分的抽提取位置依次向循环流的下游侧移动。

3、模拟移动床方式的色谱分离能够连续地以高纯度得到目标的精制对象物，因此也研究了向医疗领域等的应用。例如在抗体医药的制造中，在产生抗体的培养细胞的提取液、培养液中，除了目标的抗体以外，还产生作为抗体被切断等而产生的抗体而未充分发挥功能的片段、抗体聚集而巨大化的聚集体。通常，上述片段与吸附剂的相互作用部位少，对该吸附剂的吸附性弱。相反，聚集体对吸附剂的吸附性强。因此，在将模拟移动床方式的色谱分离应用于抗体医药的精制的情况下，需要将目标的抗体作为相对于吸附剂显示中间的吸附性的中吸附性组分而分离提取。另一方面，对于弱吸附性组分和强吸附性组分，都需要以高的去除率充分地去除。

4、例如在专利文献2中记载了一种模拟移动床方式色谱分离方法，其包括如下步骤：使用填充有吸附剂的多个单位填充塔经由配管串联并且以环状连结的循环系统，并使用两种以上的洗脱液来分离原液中所包含的相对于所述吸附剂的弱吸附性成分、强吸附性成分、以及中吸附性成分，所述中吸附性成分的吸附性处于所述弱吸附性成分的吸附性与所述强吸附性成分的吸附性之间，其中，在所述循环系统的所述配管设置有原液供给口f、与所述两种以上的各洗脱液对应的两个以上的洗脱液供给口d、包含所述弱吸附性成分的弱吸附性组分的提取口a、包含所述中吸附性成分的中吸附性组分的提取口b、以及包含所述强吸附性成分的强吸附性组分的提取口c，将该原液供给口f、该提取口a、该提取口b以及该提取口c的位置设为特定的位置关系，记载了能够以更少的吸附剂的使用量来高纯度地分离提取原液中的精制对象成分。

5、现有技术文献

6、专利文献

7、专利文献1：日本特公平7－24724号公报

8、专利文献2：日本特开2020－085881号公报

技术实现思路

1、发明所要解决的课题

2、迄今为止，提出了几种在模拟移动床方式的色谱分离中，研究原液或者洗脱液的供给位置或供给的定时、各组分的提取位置或提取的定时来提高目标成分的精制效率的技术。另一方面，作为分离对象的成分多种多样，包含该成分的试样中的夹杂物也多种多样。因此，当在某个原液试样中对某个成分的分离精制有效的模拟移动床方式色谱分离技术应用于另一原液试样中的特定成分的分离精制时，也有可能无法充分高纯度且高效率地分离提取该特定成分。因此，为了扩大模拟移动床方式色谱分离的应用范围，期望增加能够高纯度地精制特定的成分的技术的变化。

3、另外，在专利文献2所记载的那样的以往的模拟移动床方式色谱分离方法中，在一个循环的运转结束后，使原液供给口、洗脱液供给口、各组分提取口一起向下游侧移动。然而，在该方法中，已知存在根据作为目标的精制对象物而精制对象物的分离变得不充分的情况。

4、因此，本发明的课题在于提供一种色谱分离方法，其能够将原液或者洗脱液的供给位置、供给的时机、各组分的提取位置或提取的定时设为与以往不同的方式，并且高纯度地分离提取原液中的精制对象成分。

5、另外，本发明的课题在于提供适合于实施上述色谱分离方法的色谱分离系统。

6、用于解决课题的技术方案

7、本发明的上述课题通过下述技术方案得到了解决。

8、〔1〕

9、一种模拟移动床方式色谱分离方法，其包括如下步骤：使用填充有吸附剂的三个以上的单位填充塔经由配管串联并且以环状连结的循环系统，并将该循环系统以使各区段具有至少一个单位填充塔的方式划分为从上游侧朝向下游侧以圆环状连续的至少三个区段，使用洗脱液来分离原液中所包含的相对于所述吸附剂的弱吸附性成分、强吸附性成分以及中吸附性成分，所述中吸附性成分的吸附性处于所述弱吸附性成分的吸附性与所述强吸附性成分的吸附性之间，其中，

10、所述模拟移动床方式色谱分离方法重复由下述第一工艺以及第二工艺构成的循环：

11、＜第一工艺＞

12、该工艺包括如下工序：将比所述弱吸附性成分富集的区段靠上游的位置作为阻断位置而阻断所述循环系统的循环，并向所述阻断位置的下游侧的区段供给所述原液，并且从所述阻断位置的上游侧的区段将所述中吸附性成分富集的中吸附性组分从所述循环系统提取，

13、＜第二工艺＞

14、该工艺包括如下工序：不供给所述原液而通过所述洗脱液的供给和所述循环系统的阻断的控制，由此提取所述强吸附性成分富集的强吸附性组分，并且根据所述强吸附性组分的移动而使所述洗脱液相对于所述循环系统的供给位置和所述强吸附性组分的提取位置向下游侧移动，

15、将所述循环内的所述强吸附性组分的提取位置向下游侧的移动设为两个区段的量以上，并且不将该向下游侧的移动设为与[区段数]相同的量的向下游侧的移动。

16、〔2〕

17、一种模拟移动床方式色谱分离方法，其包括如下步骤：使用填充有吸附剂的三个以上的单位填充塔经由配管串联并且以环状连结的循环系统，将该循环系统以使各区段具有至少一个单位填充塔的方式划分为从上游侧朝向下游侧以圆环状连续的至少三个区段，使用洗脱液来分离原液中所包含的相对于所述吸附剂的弱吸附性成分、强吸附性成分以及中吸附性成分，所述中吸附性成分的吸附性处于所述弱吸附性成分的吸附性与所述强吸附性成分的吸附性之间，其中，

18、所述模拟移动床方式色谱分离方法重复由下述步骤(a)以及步骤(b)构成的循环：

19、＜步骤(a)＞

20、该步骤依次进行如下的子步骤：

21、子步骤(a1)，将比所述弱吸附性成分富集的区段靠上游的位置作为阻断位置而阻断所述循环系统的循环，并向所述阻断位置的下游侧的区段供给所述原液，进而在下游位置将所述弱吸附性成分富集的弱吸附性组分从该循环系统提取，并且向所述阻断位置的上游侧的区段供给用于解吸所述中吸附性成分的洗脱液，并在其下游位置将所述中吸附性成分富集的中吸附性组分从所述循环系统提取；

22、子步骤(a2)，代替所述原液的供给而供给用于解吸所述弱吸附性成分的洗脱液，并继续所述弱吸附性组分的提取和所述中吸附性组分的提取；

23、子步骤(a3)，使所述阻断位置向上游侧移动，在继续所述弱吸附性组分的提取的同时，在移动后的阻断位置的上游供给用于解吸所述强吸附性成分的洗脱液，并在其下游位置提取强吸附性成分富集的强吸附性组分；以及

24、子步骤(a4)，使所述弱吸附性组分的提取位置向下游侧移动而提取弱吸附性组分的同时，不提取中吸附性组分，并且也不提取强吸附性组分，

25、＜步骤(b)＞

26、该步骤进行至少一次如下的工序α：弱吸附性组分的提取位置维持不变，不供给原液而通过洗脱液的供给和阻断位置的控制，由此分别提取在所述步骤(a)中未提取的弱吸附性组分和强吸附性组分，接着，使所述弱吸附性组分的提取位置向下游侧移动而仅提取弱吸附性组分。

27、〔3〕

28、根据所述〔2〕所述的模拟移动床方式色谱分离方法，其中，在所述循环系统的所述配管设置有原液供给口f、洗脱液供给口d、弱吸附性组分的提取口a、中吸附性组分的提取口b以及强吸附性组分的提取口c，

29、在所述步骤(a)中，将所述原液供给口f、所述提取口a、所述提取口b、以及所述提取口c的位置设为下述(a)～(c)：

30、(a)将所述提取口a设置于所述原液供给口f的隔着至少一个区段的下游侧；

31、(b)将所述提取口b设置于具有所述原液供给口f的配管；

32、(c)将所述提取口c设置于所述提取口b的隔着至少一个区段的上游侧，

33、在所述步骤(b)中，将所述提取口a以及所述提取口c的位置设为下述(d)：

34、(d)将所述提取口a设置于所述提取口c的隔着至少两个区段的下游侧。

35、〔4〕

36、根据所述〔2〕或〔3〕所述的模拟移动床方式色谱分离方法，其中，将所述步骤(b)中进行的所述工序α的次数设为[区段数－2]次或[区段数]次以上。

37、〔5〕

38、根据所述〔2〕至〔4〕中任一项所述的模拟移动床方式色谱分离方法，其使用填充有吸附剂的四个以上的单位填充塔经由配管串联并且以环状连结的循环系统，并将该循环系统以使各区段具有至少一个单位填充塔的方式划分为从上游侧朝向下游侧以圆环状连续的四个区段，其中，

39、所述步骤(a)中的子步骤(a1)～(a4)为下述子步骤(a1－1)～(a4－1)，在所述步骤(b)中依次进行下述子步骤(b1－1)～(b3－1)以及下述子步骤(b1’－1)～(b3’－1)：

40、＜子步骤(a1－1)＞

41、将区段1的上游侧末端作为洗脱液供给口d－ii，从该洗脱液供给口d－ii供给洗脱液d－ii，将区段2的下游侧末端作为中吸附性组分提取口b，从该提取口b提取中吸附性组分，将区段3的上游侧末端作为原液供给口f，从该原液供给口f供给原液，将区段4的下游侧末端作为弱吸附性组分提取口a，从该提取口a提取弱吸附性组分，由此，

42、使在区段1以及区段2中流通的洗脱液的解吸力最强，

43、使在区段3以及区段4中流通的洗脱液的解吸力比在区段1以及区段2中流通的洗脱液的解吸力弱；

44、＜子步骤(a2－1)＞

45、将区段1的上游侧末端作为洗脱液供给口d－ii，从该洗脱液供给口d－ii供给洗脱液d－ii，将区段2的下游侧末端作为中吸附性组分提取口b，从该提取口b提取中吸附性组分，将区段3的上游侧末端作为洗脱液供给口d－iv，从该洗脱液供给口d－iv供给洗脱液d－iv，将区段4的下游侧末端作为弱吸附性组分提取口a，从该提取口a提取弱吸附性组分，由此，

46、使在区段1以及区段2中流通的洗脱液的解吸力最强，

47、使在区段3以及区段4中流通的洗脱液的解吸力比在区段1以及区段2中流通的洗脱液的解吸力弱；

48、＜子步骤(a3－1)＞

49、将区段1的上游侧末端作为洗脱液供给口d－i，从该洗脱液供给口d－i供给洗脱液d－i，将区段1的下游侧末端作为强吸附性组分提取口c，从该提取口c提取强吸附性组分，将区段2的上游侧末端作为洗脱液供给口d－ii，从该洗脱液供给口d－ii供给洗脱液d－ii，将区段3的上游侧末端作为洗脱液供给口d－iii，从该洗脱液供给口d－iii供给洗脱液d－iii，将区段4的上游侧末端作为洗脱液供给口d－iv，从该洗脱液供给口d－iv供给洗脱液d－iv，将区段4的下游侧末端作为弱吸附性组分提取口a，从该提取口a提取弱吸附性组分，由此，

50、使在区段1中流通的洗脱液的解吸力最强，

51、使在区段2中流通的洗脱液的解吸力比在区段1中流通的洗脱液的解吸力弱，

52、使在区段3中流通的洗脱液的解吸力比在区段2中流通的洗脱液的解吸力弱，

53、使在区段4中流通的洗脱液的解吸力比在区段3中流通的洗脱液的解吸力弱；

54、＜子步骤(a4－1)＞

55、将区段2的上游侧末端作为洗脱液供给口d－ii，从该洗脱液供给口d－ii供给洗脱液d－ii，将区段3的上游侧末端作为洗脱液供给口d－iii，从该洗脱液供给口d－iii供给洗脱液d－iii，将区段4的上游侧末端作为洗脱液供给口d－iv，从该洗脱液供给口d－iv供给洗脱液d－iv，将区段1的下游侧末端作为弱吸附性组分提取口a，从该提取口a提取弱吸附性组分，由此，

56、使在区段2中流通的洗脱液的解吸力最强，

57、使在区段3中流通的洗脱液的解吸力比在区段2中流通的洗脱液的解吸力弱，

58、使在区段4中流通的洗脱液的解吸力比在区段3中流通的洗脱液的解吸力弱，

59、使在区段1中流通的洗脱液的解吸力与在区段4中流通的洗脱液的解吸力相同；

60、＜子步骤(b1－1)＞

61、将区段2的上游侧末端作为洗脱液供给口d－ii，从该洗脱液供给口d－ii供给洗脱液d－ii，将区段4的上游侧末端作为洗脱液供给口d－iii，从该洗脱液供给口d－iii供给洗脱液d－iii，将区段1的上游侧末端作为洗脱液供给口d－iv，从该洗脱液供给口d－iv供给洗脱液d－iv，将区段1的下游侧末端作为弱吸附性组分提取口a，从该提取口a提取弱吸附性组分，由此，

62、使在区段2以及区段3中流通的洗脱液的解吸力最强，

63、使在区段4中流通的洗脱液的解吸力比在区段2以及区段3中流通的洗脱液的解吸力弱，

64、使在区段1中流通的洗脱液的解吸力比在区段4中流通的洗脱液的解吸力弱；

65、＜子步骤(b2－1)＞

66、将区段2的上游侧末端作为洗脱液供给口d－i，从该洗脱液供给口d－i供给洗脱液d－i，将区段2的下游侧末端作为强吸附性组分提取口c，从该提取口c提取强吸附性组分，将区段3的上游侧末端作为洗脱液供给口d－ii，从该洗脱液供给口d－ii供给洗脱液d－ii，将区段4的上游侧末端作为洗脱液供给口d－iii，从该洗脱液供给口d－iii供给洗脱液d－iii，将区段1的上游侧末端作为洗脱液供给口d－iv，从该洗脱液供给口d－iv供给洗脱液d－iv，将区段1的下游侧末端作为弱吸附性组分提取口a，从该提取口a提取弱吸附性组分，由此，

67、使在区段2中流通的洗脱液的解吸力最强，

68、使在区段3中流通的洗脱液的解吸力比在区段2中流通的洗脱液的解吸力弱，

69、使在区段4中流通的洗脱液的解吸力比在区段3中流通的洗脱液的解吸力弱，

70、使在区段1中流通的洗脱液的解吸力比在区段4中流通的洗脱液的解吸力弱；

71、＜子步骤(b3－1)＞

72、将区段3的上游侧末端作为洗脱液供给口d－ii，从该洗脱液供给口d－ii供给洗脱液d－ii，将区段4的上游侧末端作为洗脱液供给口d－iii，从该洗脱液供给口d－iii供给洗脱液d－iii，将区段1的上游侧末端作为洗脱液供给口d－iv，从该洗脱液供给口d－iv供给洗脱液d－iv，将区段2的下游侧末端作为弱吸附性组分提取口a，从该提取口a提取弱吸附性组分，由此，

73、使在区段3中流通的洗脱液的解吸力最强，

74、使在区段4中流通的洗脱液的解吸力比在区段3中流通的洗脱液的解吸力弱，

75、使在区段1中流通的洗脱液的解吸力比在区段4中流通的洗脱液的解吸力弱，

76、使在区段2中流通的洗脱液的解吸力与在区段1中流通的洗脱液的解吸力相同；

77、＜子步骤(b1’－1)＞

78、将区段3的上游侧末端作为洗脱液供给口d－ii，从该洗脱液供给口d－ii供给洗脱液d－ii，将区段1的上游侧末端作为洗脱液供给口d－iii，从该洗脱液供给口d－iii供给洗脱液d－iii，将区段2的上游侧末端作为洗脱液供给口d－iv，从该洗脱液供给口d－iv供给洗脱液d－iv，将区段2的下游侧末端作为弱吸附性组分提取口a，从该提取口a提取弱吸附性组分，由此，

79、使在区段3以及区段4中流通的洗脱液的解吸力最强，

80、使在区段1中流通的洗脱液的解吸力比在区段3以及区段4中流通的洗脱液的解吸力弱，

81、使在区段2中流通的洗脱液的解吸力比在区段1中流通的洗脱液的解吸力弱；

82、＜子步骤(b2’－1)＞

83、将区段3的上游侧末端作为洗脱液供给口d－i，从该洗脱液供给口d－i供给洗脱液d－i，将区段3的下游侧末端作为强吸附性组分提取口c，从该提取口c提取强吸附性组分，将区段4的上游侧末端作为洗脱液供给口d－ii，从该洗脱液供给口d－ii供给洗脱液d－ii，将区段1的上游侧末端作为洗脱液供给口d－iii，从该洗脱液供给口d－iii供给洗脱液d－iii，将区段2的上游侧末端作为洗脱液供给口d－iv，从该洗脱液供给口d－iv供给洗脱液d－iv，将区段2的下游侧末端作为弱吸附性组分提取口a，从该提取口a提取弱吸附性组分，由此，

84、使在区段3中流通的洗脱液的解吸力最强，

85、使在区段4中流通的洗脱液的解吸力比在区段3中流通的洗脱液的解吸力弱，

86、使在区段1中流通的洗脱液的解吸力比在区段4中流通的洗脱液的解吸力弱，

87、使在区段2中流通的洗脱液的解吸力比在区段1中流通的洗脱液的解吸力弱；

88、＜子步骤(b3’－1)＞

89、将区段4的上游侧末端作为洗脱液供给口d－ii，从该洗脱液供给口d－ii供给洗脱液d－ii，将区段1的上游侧末端作为洗脱液供给口d－iii，从该洗脱液供给口d－iii供给洗脱液d－iii，将区段2的上游侧末端作为洗脱液供给口d－iv，从该洗脱液供给口d－iv供给洗脱液d－iv，将区段3的下游侧末端作为弱吸附性组分提取口a，从该提取口a提取弱吸附性组分，由此，

90、使在区段4中流通的洗脱液的解吸力最强，

91、使在区段1中流通的洗脱液的解吸力比在区段4中流通的洗脱液的解吸力弱，

92、使在区段2中流通的洗脱液的解吸力比在区段1中流通的洗脱液的解吸力弱，

93、使在区段3中流通的洗脱液的解吸力与在区段2中流通的洗脱液的解吸力相同。

94、〔6〕

95、根据所述〔2〕至〔4〕中任一项所述的模拟移动床方式色谱分离方法，其使用填充有吸附剂的三个以上的单位填充塔经由配管串联并且以环状连结的循环系统，并将该循环系统以使各区段具有至少一个单位填充塔的方式划分为从上游侧朝向下游侧以圆环状连续的三个区段，其中，

96、所述步骤(a)中的子步骤(a1)～(a4)为下述子步骤(a1－2)～(a4－2)，在所述步骤(b)中依次进行下述子步骤(b1－2)以及(b2－2)：

97、＜子步骤(a1－2)＞

98、将区段1的上游侧末端作为洗脱液供给口d－ii，从该洗脱液供给口d－ii供给洗脱液d－ii，将区段2的下游侧末端作为中吸附性组分提取口b，从该提取口b提取中吸附性组分，将区段3的上游侧末端作为原液供给口f，从该原液供给口f供给原液，将区段3的下游侧末端作为弱吸附性组分提取口a，从该提取口a提取弱吸附性组分，由此，

99、使在区段1以及区段2中流通的洗脱液的解吸力最强，

100、使在区段3中流通的洗脱液的解吸力比在区段1以及区段2中流通的洗脱液的解吸力弱；

101、＜子步骤(a2－2)＞

102、将区段1的上游侧末端作为洗脱液供给口d－ii，从该洗脱液供给口d－ii供给洗脱液d－ii，将区段2的下游侧末端作为中吸附性组分提取口b，从该提取口b提取中吸附性组分，将区段3的上游侧末端作为洗脱液供给口d－iv，从该洗脱液供给口d－iv供给洗脱液d－iv，将区段3的下游侧末端作为弱吸附性组分提取口a，从该提取口a提取弱吸附性组分，由此，

103、使在区段1以及区段2中流通的洗脱液的解吸力最强，

104、使在区段3中流通的洗脱液的解吸力比在区段1以及区段2中流通的洗脱液的解吸力弱；

105、＜子步骤(a3－2)＞

106、将区段1的上游侧末端作为洗脱液供给口d－i，从该洗脱液供给口d－i供给洗脱液d－i，将区段1的下游侧末端作为强吸附性组分提取口c，从该提取口c提取强吸附性组分，将区段2的上游侧末端作为洗脱液供给口d－ii，从该洗脱液供给口d－ii供给洗脱液d－ii，将区段3的上游侧末端作为洗脱液供给口d－iii，从该洗脱液供给口d－iii供给洗脱液d－iii，将区段3的下游侧末端作为弱吸附性组分提取口a，从该提取口a提取弱吸附性组分，由此，

107、使在区段1中流通的洗脱液的解吸力最强，

108、使在区段2中流通的洗脱液的解吸力比在区段1中流通的洗脱液的解吸力弱，

109、使在区段3中流通的洗脱液的解吸力比在区段2中流通的洗脱液的解吸力弱；

110、＜子步骤(a4－2)＞

111、将区段2的上游侧末端作为洗脱液供给口d－ii，从该洗脱液供给口d－ii供给洗脱液d－ii，将区段3的上游侧末端作为洗脱液供给口d－iii，从该洗脱液供给口d－iii供给洗脱液d－iii，将区段1的上游侧末端作为洗脱液供给口d－iv，从该洗脱液供给口d－iv供给洗脱液d－iv，将区段1的下游侧末端作为弱吸附性组分提取口a，从该提取口a提取弱吸附性组分，由此，

112、使在区段2中流通的洗脱液的解吸力最强，

113、使在区段3中流通的洗脱液的解吸力比在区段2中流通的洗脱液的解吸力弱，

114、使在区段1中流通的洗脱液的解吸力比在区段3中流通的洗脱液的解吸力弱；

115、＜子步骤(b1－2)＞

116、将区段2的上游侧末端作为洗脱液供给口d－i，从该洗脱液供给口d－i供给洗脱液d－i，将区段2的下游侧末端作为强吸附性组分提取口c，从该提取口c提取强吸附性组分，将区段3的上游侧末端作为洗脱液供给口d－ii，从该洗脱液供给口d－ii供给洗脱液d－ii，将区段1的上游侧末端作为洗脱液供给口d－iii，从该洗脱液供给口d－iii供给洗脱液d－iii，将区段1的下游侧末端作为弱吸附性组分提取口a，从该提取口a提取弱吸附性组分，由此，

117、使在区段2中流通的洗脱液的解吸力最强，

118、使在区段3中流通的洗脱液的解吸力比在区段2中流通的洗脱液的解吸力弱，

119、使在区段1中流通的洗脱液的解吸力比在区段3中流通的洗脱液的解吸力弱；

120、＜子步骤(b2－2)＞

121、将区段3的上游侧末端作为洗脱液供给口d－ii，从该洗脱液供给口d－ii供给洗脱液d－ii，将区段1的上游侧末端作为洗脱液供给口d－iii，从该洗脱液供给口d－iii供给洗脱液d－iii，将区段2的上游侧末端作为洗脱液供给口d－iv，从该洗脱液供给口d－iv供给洗脱液d－iv，将区段2的下游侧末端作为弱吸附性组分提取口a，从该提取口a提取弱吸附性组分，由此，

122、使在区段3中流通的洗脱液的解吸力最强，

123、使在区段1中流通的洗脱液的解吸力比在区段3中流通的洗脱液的解吸力弱，

124、使在区段2中流通的洗脱液的解吸力比在区段1中流通的洗脱液的解吸力弱。

125、〔7〕

126、根据所述〔1〕至〔6〕中任一项所述的模拟移动床方式色谱分离方法，其中，所述中吸附性成分为生物体高分子。

127、〔8〕

128、一种模拟移动床方式色谱分离系统，其使用填充有吸附剂的三个以上的单位填充塔经由配管串联并且以环状连结的循环系统，并将该循环系统以使各区段具有至少一个单位填充塔的方式划分为从上游侧朝向下游侧以圆环状连续的至少三个区段，使用洗脱液来分离原液中所包含的相对于所述吸附剂的弱吸附性成分、强吸附性成分以及中吸附性成分，所述中吸附性成分的吸附性处于所述弱吸附性成分的吸附性与所述强吸附性成分的吸附性之间，其中，

129、所述模拟移动床方式色谱分离系统具有重复由下述第一工艺以及第二工艺构成的循环的单元：

130、＜第一工艺＞

131、该工艺包括如下工序：将比所述弱吸附性成分富集的区段靠上游的位置作为阻断位置而阻断所述循环系统的循环，并向所述阻断位置的下游侧的区段供给所述原液，并且从所述阻断位置的上游侧的区段将所述中吸附性成分富集的中吸附性组分从所述循环系统提取，

132、＜第二工艺＞

133、该工艺包括如下工序：不供给所述原液而通过所述洗脱液的供给和所述循环系统的阻断的控制，由此提取所述强吸附性成分富集的强吸附性组分，并且根据所述强吸附性组分的移动而使所述洗脱液相对于所述循环系统的供给位置和所述强吸附性组分的提取位置向下游侧移动，

134、所述循环内的所述强吸附性组分的提取位置向下游侧的移动是两个区段的量以上，并且该向下游侧的移动不是与[区段数]相同的量的向下游侧的移动。

135、〔9〕

136、一种模拟移动床方式色谱分离系统，其使用填充有吸附剂的三个以上的单位填充塔经由配管串联并且以环状连结的循环系统，将该循环系统以使各区段具有至少一个单位填充塔的方式划分为从上游侧朝向下游侧以圆环状连续的至少三个区段，使用洗脱液来分离原液中所包含的相对于所述吸附剂的弱吸附性成分、强吸附性成分以及中吸附性成分，所述中吸附性成分的吸附性处于所述弱吸附性成分的吸附性与所述强吸附性成分的吸附性之间，其中，

137、所述模拟移动床方式色谱分离系统具有重复由下述步骤(a)以及步骤(b)构成的循环的单元：

138、＜步骤(a)＞

139、该步骤依次进行如下的子步骤：

140、子步骤(a1)，将比所述弱吸附性成分富集的区段靠上游的位置作为阻断位置而阻断所述循环系统的循环，并向所述阻断位置的下游侧的区段供给所述原液，进而在下游位置将所述弱吸附性成分富集的弱吸附性组分从该循环系统提取，并且向所述阻断位置的上游侧的区段供给用于解吸所述中吸附性成分的洗脱液，并在其下游位置将所述中吸附性成分富集的中吸附性组分从所述循环系统提取；

141、子步骤(a2)，代替所述原液的供给而供给用于解吸所述弱吸附性成分的洗脱液，并继续所述弱吸附性组分的提取和所述中吸附性组分的提取；

142、子步骤(a3)，将所述阻断位置向上游侧移动，在继续所述弱吸附性组分的提取的同时，在移动后的阻断位置的上游供给用于解吸所述强吸附性成分的洗脱液，并在其下游位置提取强吸附性成分富集的强吸附性组分；以及

143、子步骤(a4)，使所述弱吸附性组分的提取位置向下游侧移动而提取弱吸附性组分的同时，不提取中吸附性组分，并且也不提取强吸附性组分，

144、＜步骤(b)＞

145、该步骤进行至少一次如下的工序α：弱吸附性组分的提取位置维持不变，不供给原液而通过洗脱液的供给和阻断位置的控制，分别提取在步骤(a)中未提取的弱吸附性组分和强吸附性组分，接着，使所述弱吸附性组分的提取位置向下游侧移动而仅提取弱吸附性组分。

146、在本说明书中，“上游”、“下游”这样的用语相对于循环系统内的流体的流通方向而被使用。即，相对于循环系统的某个部位，所谓“上游侧”，是指流体朝向该部位流通过来的一侧，所谓“下游侧”，是指流体从该部位流出去的一侧。

147、本说明书中，所谓“强吸附性成分”，是指原液中所包含的多种成分中相对于吸附剂的吸附力强的成分，所谓“弱吸附性成分”，是指原液中所包含的多种成分中相对于吸附剂的吸附力弱的成分，所谓“中吸附性成分”，是指相对于吸附剂的吸附性比上述强吸附性成分弱、但相对于吸附剂的吸附性比上述弱吸附性成分强的成分。即，“强吸附性”、“中吸附性”以及“弱吸附性”这样的用语表示对原液中所包含的各成分的相对于吸附剂的吸附力进行比较时的相对的吸附力的强度。

148、上述的“强吸附性成分”、“中吸附性成分”以及“弱吸附性成分”分别可以由单一成分构成，也可以由多个成分构成。另外，该多个成分的吸附力可以相同，也可以不同。

149、对原液中的各成分的“强吸附性成分”、“中吸附性成分”以及“弱吸附性成分”的分组能够根据目的而适当地设定。以原液包含四种成分的情况为例，能够按照相对于吸附剂的吸附力从强到弱的顺序的前两种成分合起来定位为强吸附性成分，将相对于吸附剂的吸附力第三强的成分定位为中吸附性成分，将相对于吸附剂的吸附力最弱的成分定位为弱吸附性成分。另外，也能够将相对于吸附剂的吸附力最强的成分定位为强吸附性成分，将相对于吸附剂的吸附力第二位的成分和第三位的成分合起来定位为中吸附性成分，将相对于吸附剂的吸附力最弱的成分定位为弱吸附性成分。另外，也能够将相对于吸附剂的吸附力最强的成分定位为强吸附性成分，将相对于吸附剂的吸附力第二位的成分定位为中吸附性成分，将相对于吸附剂的吸附力第三位的成分和最弱的成分合起来定位为弱吸附性成分。在原液包含五种以上的成分的情况下，也同样能够进行基于各种分组的分离、精制。

150、本发明中，所谓洗脱液的“解吸力”，是指使吸附于吸附剂的成分从该吸附剂脱离的作用的强度。

151、发明效果

152、根据本发明的模拟移动床方式色谱分离方法，能够高纯度地分离提取原液中的精制对象成分。