一种具有区分力的依折麦布瑞舒伐他汀钙片溶出曲线检测方法与流程

本发明涉及药物检测，尤其涉及一种具有区分力的依折麦布瑞舒伐他汀钙片溶出曲线检测方法。

背景技术：

1、本发明背景技术中公开的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

2、依折麦布瑞舒伐他汀钙片是依折麦布与瑞舒伐他汀钙的复方片剂，是一种具有双重作用的降血脂药物，可用于治疗由血脂过多，如脂肪、胆固醇和甘油三酯导致的慢性病。2013年11月26日，默沙东公司在澳大利亚申报的依折麦布片联合瑞舒伐他汀钙片同时用药的组合获批上市，商品名：ezalo，规格(以依折麦布/瑞舒伐他汀计，下同)：10mg/5mg、10mg/10mg、10mg/20mg、10mg/40mg。2019年3月26日，默沙东公司在日本申报的依折麦布瑞舒伐他汀钙片获批上市，商品名：rosuzet，规格：10mg/2.5mg；10mg/5mg。2014年7月在欧盟通过非集中审评上市，商品名zenon，规格：10mg/10mg、10mg/20mg、10mg/40mg，持证商为赛诺菲安万特(sanofi-aventis)。

3、依折麦布瑞舒伐他汀钙片质量标准未在中国、英国、美国、日本、韩国等药典收载，仅在印度药典收载，其溶出方法为桨法，以缓冲溶液900ml(取十二烷基硫酸钠10g，加水溶解使成1000ml)为溶出介质，转速为每分钟50转，经45分钟时取样。但是，在实际应用中发现，由于依折麦布瑞舒伐他汀钙片为双层片，且上下层硬度存在差异，在桨法转速较低(50转/min)时，依折麦布和瑞舒伐他汀的崩解速度不一致，导致不同片间的测定偏差较大，10min以内依折麦布累积溶出量相对标准偏差大于10％。

4、fda审评报告(213072orig1s000)中采用ph6.6的枸橼酸盐900ml为溶出介质，桨法50转/分钟测定瑞舒伐他汀钙，以含0.45％十二烷基硫酸钠的醋酸-醋酸钠缓冲液(ph4.5)900ml为溶出介质，篮法75转/分钟测定依折麦布。该检测手段需要分别采用两种方法对样品进行处理，操作过程繁琐，在实际使用时，容易出现偏差。

5、专利cn110418637a(公开日：2019.11.05)的溶出介质为：900ml，磷酸盐缓冲液，具有ph7.0±0.05，含0.5％月桂基硫酸钠(即十二烷基硫酸钠)，桨法75转/分钟，较高的转速能够在一定程度上提高测定结果的稳定性，但是，若采用同一系统同时测定依折麦布和瑞舒伐他汀钙溶出量，十二烷基硫酸钠的存在会和瑞舒伐他汀钙中的钙反应，导致瑞舒伐他汀钙的溶出量降低。

6、因此，如何提供一种具有良好测试稳定性、依折麦布和瑞舒伐他汀均具有较高溶出量且具有良好区分力的依折麦布瑞舒伐他汀钙片的溶出测定方法是亟待解决的问题。

技术实现思路

1、有鉴于此，本发明提供了一种具有区分力的依折麦布瑞舒伐他汀钙片溶出曲线检测方法，本发明提供的方法具有专属性强、灵敏度高、准确度高、耐用性好等特点，可有效地区别自制制剂与参比制剂的差异性，更具有普遍性与实用性，操作上更加简便、高效。

2、本发明提供了一种具有区分力的依折麦布瑞舒伐他汀钙片溶出曲线检测方法，包括如下步骤：

3、供试品溶液配制：取依折麦布瑞舒伐他汀钙片，以含有0.1～0.3wt％聚山梨酯80的水溶液800～1000ml作为溶出介质，按照溶出仪篮法进行溶出，所述转篮的转速为50～100转/分钟，转篮目数为10～40目；于不同取样时间点，取出溶出液适量，滤过，精密量取续滤液，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；

4、对照品溶液配制：取依折麦布对照品与瑞舒伐他汀钙对照品，精密称定，加流动相适量使溶解，用流动相稀释制成每1ml中分别含依折麦布与瑞舒伐他汀各2～3μg的混合溶液，摇匀，作为对照品溶液；

5、测定：将供试品溶液和对照品溶液分别注入高效液相色谱仪，记录色谱图，计算溶出量。

6、优选的，所述溶出介质的ph为2～7。

7、进一步的，采用盐酸、冰醋酸-醋酸钠或枸橼酸-枸橼酸钠调节溶出介质的ph。

8、优选的，采用盐酸调节溶出介质的ph为2.0；或，采用冰醋酸-醋酸钠调节溶出介质的ph为4.5；或，采用枸橼酸-枸橼酸钠调节溶出介质的ph为6.6。

9、优选的，所述聚山梨酯80的质量浓度为0.2wt％。

10、优选的，所述转篮的转速为75转/分钟，转篮目数为10目。

11、优选的，溶出介质的体积为900ml。

12、优选的，所述取样时间点包括5min、10min、15min、20min、30min、45min和60min。

13、进一步的，当取样时间为10min以上时，所述具有区分力的依折麦布瑞舒伐他汀钙片溶出曲线检测方法的相对标准偏差rsd小于10％；当取样时间为15min时，依折麦布溶出量小于85％；当取样时间为60min时，依折麦布和瑞舒伐他汀钙的累积溶出量均大于95％。

14、优选的，所述高效液相色谱的色谱条件为：

15、色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，xb-c18，4.6mm×150mm，5μm或效能相当的色谱柱；

16、检测器：vwd检测器，检测波长为232nm；

17、流动相：以0.05mol/l枸橼酸盐缓冲液-乙腈(50:50)为流动相；

18、柱温：30℃；

19、流速：1.5ml/min；

20、运行时间：6分钟，等度洗脱；

21、进样量：50μl。

22、进一步的，所述枸橼酸盐缓冲液的配制方法为：取枸橼酸钠14.7g与枸橼酸0.36g，加水适量超声使溶解，用水稀释至1000ml，用磷酸调节ph值至4.0。

23、与现有技术相比，本发明取得了以下有益效果：

24、(1)本发明所提供的依折麦布瑞舒伐他汀钙片溶出曲线检测方法以含有聚山梨酯80的水溶液作为溶出介质，并通过溶出仪篮法进行溶出，相比于现有采用含十二烷基硫酸钠(sds)的溶出介质并采用溶出仪浆法进行溶出，在ph为2～7内均具有良好的检测稳定性，在10min以上的取样时间rsd均小于10％，而且依折麦布的溶出速率适中，既不会造成样品堆积，也不会导致溶出速率过快而无区分力，同时不会发生十二烷基硫酸钠(sds)与瑞舒伐他汀钙反应降低瑞舒伐他汀钙的溶出量；因此本发明提供的溶出曲线检测方法具有良好的稳定性和区分力；此外，在同一系统同时测定时，依折麦布和瑞舒伐他汀均具有良好的溶出性，60min时累积溶出量均高于95％；

25、(2)经方法学验证，本发明提供的依折麦布瑞舒伐他汀钙片溶出曲线检测方法具有专属性强、灵敏度高、准确度高、耐用性好等特点，可有效对比自制制剂与参比制剂的差异性或相似度，且更具有普遍性与实用性；同时，由于本发明只需一次进样即可完成依折麦布和瑞舒伐他汀的同时测定，无需采用不同的溶出方法分开进样，因此操作上更加简便、高效。