抑制TNF受体相关蛋白1的医药用途

本发明属于生物医药，具体涉及抑制tnf受体相关蛋白1(tumornecrosis factor receptor-associatedprotein 1,trap1)活性的物质在衰老所致动脉粥样硬化相关血管疾病防治药物中的应用。

背景技术：

1、随着人口老龄化愈发严重，心血管疾病(cardiovascular disease，cvd)已成为全球死亡率的主要原因。动脉粥样硬化是心血管疾病的主要原因之一，它是动脉壁的一种慢性疾病，其主要特征是脂质积聚并形成动脉粥样硬化斑块。动脉粥样硬化导致的死亡与斑块破裂引起的心血管并发症有关，斑块破裂会形成血栓，导致急性冠状动脉综合征或中风。因此，及时预防和治疗包括动脉粥样硬化在内的心血管疾病仍然是一个极为重要的问题。平滑肌细胞在动脉粥样硬化形成中起着关键作用。越来越多研究表明，晚期动脉粥样硬化中的血管平滑肌细胞(vsmc)具有早衰特征，如增殖不良、端粒酶明显缩短和衰老标记物的表达。vsmc的衰老会导致vsmc含量下降，影响斑块破裂后的修复，从而诱发斑块的脆弱性。因此，vsmc的衰老是动脉粥样硬化发生发展的关键因素。

2、细胞衰老是一种不可逆细胞周期停滞的生理过程，代谢紊乱和染色质结构变化是其主要特征，从而导致细胞功能障碍和平衡失调。在衰老平滑肌细胞中，由于代谢紊乱，从而依赖有氧糖酵解产生atp提供能量。我们发现一种新型能量调节因子tnf受体相关蛋白1(trap1)参与平滑肌衰老的调节。trap1是热休克蛋白hsp90家族中线粒体的主要成员，是多种病理状态和健康细胞中新陈代谢和细胞器稳态的关键调节因子，最近研究发现，trap1缺失的小鼠表现出衰老相关的疾病发病率降低，同时trap1表达过高会导致线粒体功能障碍。但是，平滑肌细胞中trap1是否参与动脉粥样硬化发生目前尚未报道。

技术实现思路

1、针对上述问题，本申请提供抑制tnf受体相关蛋白1的医药用途。

2、本发明的目的可通过以下技术方案实现：

3、首先，本发明提供了trap1的基因序列和氨基酸序列。

4、trap1基因序列：

5、https://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/nc_000016.10？report＝fasta&from＝3658037&to＝3717524&strand＝true

6、>nc_000016.10:c3717524-3658037homo sapiens chromosome 16,grch38.p14primaryassembly。

7、trap1氨基酸序列，如seq id no.1所示：

8、https://www.uniprot.org/blast

9、>sp|q12931|trap1_human heat shock protein 75kda,mitochondrial os＝homo sapiens ox＝9606gn＝trap1 pe＝1sv＝3。

10、第一方面，本发明保护trap1在制备心血管疾病辅助诊断试剂中的应用。

11、第二方面，本发明保护检测trap1的试剂在制备心血管疾病辅助诊断试剂中的应用。

12、第三方面，本发明保护trap1作为检测靶点在筛选或辅助筛选动脉粥样硬化治疗药物中的应用。

13、第四方面，本发明保护trap1作为靶点在制备防治心血管疾病药物中的应用。

14、第五方面，本发明保护敲低或抑制trap1的物质在制备防治心血管疾病药物中的应用。

15、第六方面，本发明保护敲低或抑制trap1表达的物质在制备筛选或辅助筛选心血管疾病药物中的应用。

16、作为本发明的一种优选，所述的抑制或敲除trap1表达的物质选自trap1的sirna、特异性敲除trap1的基因编辑系统或其他能够特异性抑制trap1的小分子化合物。

17、作为本发明的一种优选，所述sirna如seq id no.2-3所示。

18、作为本发明的一种优选，所述心血管疾病为衰老所致的心血管疾病药物。

19、作为本发明的一种优选，所述衰老所致的心血管疾病为动脉粥样硬化。

20、第七方面，本发明保护一种筛选动脉粥样硬化治疗药物的方法，检测给药前、后trap1含量，通过trap1含量的降低程度评估治疗动脉粥样硬化候选药物的疗效。

21、平滑肌细胞特异性敲除trap1的apoeko小鼠(apoekotrap1smcko)的构建，其在制备治疗动脉粥样硬化中的应用。

22、本发明的有益效果：

23、本发明通过western blot、rt-qpcr和免疫荧光染色等实验发现在ras诱导的衰老平滑肌细胞中，trap1表达增加。trap1缺乏可明显改善平滑肌细胞衰老和代谢紊乱。同时构建了平滑肌细胞特异性敲除trap1的apoeko小鼠：选取8周龄的apoe-/-小鼠，并随机分为对照组和trap1敲除组，并同时高脂喂养16周。与对照组相比，发现小鼠的斑块面积、衰老标记物、和sasp均减少，本发明首次明确trap1对平滑肌细胞衰老的调节，为动脉粥样硬化的诊断及治疗提供新的防治药物研发途径和药物作用靶点，具有十分重要的药用价值。

技术特征：

1.trap1在制备心血管疾病辅助诊断试剂中的应用。

2.trap1作为靶点在筛选或辅助筛选防治心血管疾病药物中的应用。

3.trap1作为靶点在制备防治心血管疾病药物中的应用。

4.敲低或抑制trap1的物质在制备防治心血管疾病药物中的应用。

5.敲低或抑制trap1的物质在筛选或辅助筛选防治心血管疾病药物中的应用。

6.根据权利要求4或5所述的应用，其特征在于，所述trap1抑制剂包括敲低trap1表达的小干扰rna、特异性敲除trap1的基因编辑系统或其他能够特异性抑制trap1的小分子化合物。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述的敲低trap1表达的小干扰rna序列如seq id no.2-3所示。

8.根据权利要求1-7任一项所述的应用，其特征在于，所述心血管疾病为衰老所致的心血管疾病药物。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述衰老所致的心血管疾病为动脉粥样硬化。

技术总结
本发明属于生物医药技术领域，具体涉及抑制TNF受体相关蛋白1的医药用途。在动脉粥样硬化相关的细胞和动物模型中，发现干扰TNF受体相关蛋白1可以抑制平滑肌细胞的衰老和动脉粥样硬化的发生；本申请为动脉粥样硬化相关心血管疾病的诊断及治疗提供了新的靶点，开拓了防治动脉粥样硬化药物制备的新方向。

技术研发人员：陈宏山,何贤,闵娇,李雪松,陈明红,陈祥,张韵佳,郑龙彬,姜虹
受保护的技术使用者：南京医科大学
技术研发日：
技术公布日：2024/4/24