一种同时鉴别麻杏石甘口服液中麻黄、甘草和苦杏仁的方法与流程

本发明涉及定性测定中药复方制剂中麻黄、甘草和苦杏仁的检验方法，尤其涉及一种同时鉴别麻杏石甘口服液中麻黄、甘草和苦杏仁的方法。

背景技术：

1、麻杏石甘口服液为中兽药成方制剂，收载于《中华人民共和国兽药典》2020年版(二部)，原标准有三个薄层鉴别，分别鉴别麻黄(麻黄对照药材作对照)、甘草(甘草对照药材作对照)、苦杏仁(苦杏仁苷作对照)，要进行三次前处理制备供试品溶液，其中甘草、苦杏仁的鉴别前处理繁琐，再经过三个不同展开系统才能完成整个试验。即现有的鉴别麻杏石甘口服液中麻黄、甘草和苦杏仁的方法存在过程繁琐，鉴别方法灵敏度低、准确性差、重复性差、专属性不高的问题，且现有的鉴别麻杏石甘口服液中麻黄、甘草和苦杏仁的方法需要采用大量试剂，不仅成本高，且鉴别时间还长，不利于鉴别效率的提高。

2、因此，本领域亟需发展一种方法快速、灵敏、准确、重复性好、专属性强的同时鉴别麻杏石甘口服液中麻黄、甘草和苦杏仁的方法。

技术实现思路

1、本发明的目的为提供一种同时鉴别麻杏石甘口服液中麻黄、甘草和苦杏仁的方法，以解决现有的鉴别麻杏石甘口服液中麻黄、甘草和苦杏仁的方法存在过程繁琐，鉴别方法灵敏度低、准确性差、重复性差、专属性不高的问题；还解决了现有的鉴别麻杏石甘口服液中麻黄、甘草和苦杏仁的方法需要采用大量试剂，不仅成本高，且鉴别时间还长，不利于鉴别效率的提高的问题。

2、为了达到上述目的，本发明采用如下技术方案：

3、本发明提供了一种同时鉴别麻杏石甘口服液中麻黄、甘草和苦杏仁的方法，包括如下步骤：

4、(1)供试品溶液的制备；

5、(2)对照品溶液的制备：取麻黄对照药材，加甲醇，超声提取，取上清液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为麻黄对照药材溶液；取甘草对照药材，加水加热回流，过滤，滤液浓缩，用水饱和的正丁醇提取，取正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤，取正丁醇液蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为甘草对照药材溶液；取苦杏仁苷对照品，加甲醇使溶解，作为苦杏仁苷对照品溶液；

6、(3)薄层色谱法试验：点样量：3-8μl，硅胶g薄层板，展开系统：乙酸乙酯、甲醇、水和甲酸的混合溶液在10℃下放置过夜的上层溶液；

7、结果判定：置紫外灯下检视，供试品色谱中，在与麻黄对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的一个荧光斑点，表明可检出麻黄；置紫外灯下检视，供试品色谱中，在与甘草对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的两个黑色斑点，表明可检出甘草；喷涂α-萘酚试液，加热至斑点显色清晰，日光下检视，供试品色谱中，在与苦杏仁苷对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的一个粉色斑点，表明可检出苦杏仁。

8、作为优选，所述供试品溶液的制备包括如下步骤：

9、s1：取供试品，加三氯甲烷提取，取三氯甲烷层，蒸干，残渣加甲醇使溶解，备用；

10、s2：取s1中溶解所得溶液置于索氏提取器中，加乙醇，加热回流，过滤，滤液蒸干，残渣加甲醇使溶解，浓缩，作为供试品溶液。

11、作为优选，所述供试品溶液的制备过程中：

12、s1：取供试品3～10ml，加三氯甲烷提取3次，每次加三氯甲烷20ml，取三氯甲烷层合并，蒸干，残渣加甲醇2～5ml使溶解，备用；

13、s2：取s1中溶解所得溶液置于索氏提取器中，加质量分数为50％的乙醇30～50ml，加热回流30min，常温下冷却，过滤，滤液蒸干，残渣加甲醇2～5ml使溶解，浓缩至1～2ml，作为供试品溶液。

14、作为优选，所述麻黄对照药材溶液的制备中取麻黄对照药材0.5～1g，加甲醇10～20ml，超声提取10min，取上清液，蒸干，残渣加甲醇2～4ml使溶解，作为麻黄对照药材溶液。

15、作为优选，所述甘草对照药材溶液的制备中取甘草对照药材0.5～2g，加水30～120ml，加热回流30min，室温下冷却，过滤，滤液浓缩至20～80ml，用水饱和的正丁醇提取2次，每次用水饱和的正丁醇20～80ml，取正丁醇液合并，用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次用正丁醇饱和的水10～40ml，取正丁醇液合并，蒸干，残渣加甲醇1～4ml使溶解，作为甘草对照药材溶液。

16、作为优选，所述苦杏仁苷对照品溶液的制备中取苦杏仁苷对照品，加甲醇使溶解，制成每1ml含苦杏仁苷对照品1～3mg的溶液，作为苦杏仁苷对照品溶液。

17、作为优选，所述紫外灯的波长为365nm。

18、作为优选，所述乙酸乙酯、甲醇、水和甲酸的混合溶液中，乙酸乙酯、甲醇、水和甲酸的体积比为18～22:4.5～5.8:5～6:0.2～0.4。

19、作为优选，所述加热至斑点显色清晰的加热温度为85～95℃。

20、经由上述的技术方案可知，与现有技术相比，本发明有益效果如下：

21、(1)本发明方法优于已公开的技术，通过一套薄层展开系统同时把麻黄、甘草和苦杏仁三味药材一次鉴别出来，方法简便快速、分离效果好，鉴别精度高，结果重现性好，易于观察，专属性强，斑点清晰，既达到中国兽药典的要求，还节省时间、试剂；

22、(2)本发明方法样品处理简便、省试剂、省时间；麻杏石甘口服液原标准对麻黄、甘草和苦杏仁分别鉴别，需采用3次样品处理；本发明方法只进行一次样品处理，可减少使用乙醚20ml、正丁醇45ml，而且无需通过“d101型大孔吸附树脂柱”洗脱处理，大大节省试剂和操作时间；

23、(3)本发明方法展开剂只采用3种化学试剂：乙酸乙酯、甲醇、甲酸，原方法展开剂需采用6种化学试剂：三氯甲烷、正丁醇、乙酸乙酯、甲醇、冰醋酸、浓氨试液，且三氯甲烷属于二类易制毒化学品，因此本发明所述方法更环保安全。

技术特征：

1.一种同时鉴别麻杏石甘口服液中麻黄、甘草和苦杏仁的方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述同时鉴别麻杏石甘口服液中麻黄、甘草和苦杏仁的方法，其特征在于，所述供试品溶液的制备包括如下步骤：

3.根据权利要求2所述同时鉴别麻杏石甘口服液中麻黄、甘草和苦杏仁的方法，其特征在于，所述供试品溶液的制备过程中：

4.根据权利要求1所述同时鉴别麻杏石甘口服液中麻黄、甘草和苦杏仁的方法，其特征在于，所述麻黄对照药材溶液的制备中取麻黄对照药材0.5～1g，加甲醇10～20ml，超声提取10min，取上清液，蒸干，残渣加甲醇2～4ml使溶解，作为麻黄对照药材溶液。

5.根据权利要求4所述同时鉴别麻杏石甘口服液中麻黄、甘草和苦杏仁的方法，其特征在于，所述甘草对照药材溶液的制备中取甘草对照药材0.5～2g，加水30～120ml，加热回流30min，室温下冷却，过滤，滤液浓缩至20～80ml，用水饱和的正丁醇提取2次，每次用水饱和的正丁醇20～80ml，取正丁醇液合并，用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次用正丁醇饱和的水10～40ml，取正丁醇液合并，蒸干，残渣加甲醇1～4ml使溶解，作为甘草对照药材溶液。

6.根据权利要求5所述同时鉴别麻杏石甘口服液中麻黄、甘草和苦杏仁的方法，其特征在于，所述苦杏仁苷对照品溶液的制备中取苦杏仁苷对照品，加甲醇使溶解，制成每1ml含苦杏仁苷对照品1～3mg的溶液，作为苦杏仁苷对照品溶液。

7.根据权利要求1所述同时鉴别麻杏石甘口服液中麻黄、甘草和苦杏仁的方法，其特征在于，所述紫外灯的波长为365nm。

8.根据权利要求7所述同时鉴别麻杏石甘口服液中麻黄、甘草和苦杏仁的方法，其特征在于，所述乙酸乙酯、甲醇、水和甲酸的混合溶液中，乙酸乙酯、甲醇、水和甲酸的体积比为18～22:4.5～5.8:5～6:0.2～0.4。

9.根据权利要求7或8所述同时鉴别麻杏石甘口服液中麻黄、甘草和苦杏仁的方法，其特征在于，所述加热至斑点显色清晰的加热温度为85～95℃。

技术总结
本发明属于定性测定中药复方制剂中麻黄、甘草和苦杏仁的检验方法技术领域，本发明公开了一种同时鉴别麻杏石甘口服液中麻黄、甘草和苦杏仁的方法。将供试品置索氏提取器中，通过不同性质的试剂处理，分级提取制备得供试品溶液，再取麻黄对照药材、甘草对照药材经处理得到对照药材溶液，另取苦杏仁苷对照品，加甲醇制成对照品溶液；将上述供试品溶液和对照药材溶液、对照品溶液采用一套薄层色谱展开系统同时鉴别麻黄、甘草和苦杏仁。结果显示色谱斑点分离好、清晰、阴性对照无干扰。该方法前处理简单、对环境友好，灵敏度高，重复性、耐用性均符合《中国兽药典》的要求，从而更好地对麻杏石甘口服液进行质量控制。

技术研发人员：张传津,郭莉,牛华星,张娜,刘德贤,于爽,杨彦超,陈静,孔红君,张秋娜
受保护的技术使用者：保定冀中药业有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/3/31