一种方酸二价阴离子的高效液相色谱检测方法

本发明属于生物化工检测，具体涉及一种方酸二价阴离子的高效液相色谱检测方法。

背景技术：

1、方酸(3,4-dihydroxy-3-cyclobutene-1,2-dione)，结构式如下：

2、

3、方酸具有光、热稳定性强，同时还具有易合成、能带隙可调节的特点，可以用作酰化试剂，与富电活化芳环进行酰化反应合成光导方酸菁和方酸类染料；与含活泼双键、活泼甲基反应，生成具特殊性能的新化合物；用作合成有机光导体、液晶显示材料、激光书写记录材料及静电照相光受体材料的中间体。

4、目前报道的关于方酸二价阴离子的检测方法主要是分光光度法与滴定法，以滴定法检测方酸二价阴离子，滴定终点的判断以颜色变化为依据，存在很大的观察误差。分光光度法通过采用氯化铁作为显色剂，通过校准曲线等获得方酸浓度的测量，但方酸浓度的测量精度受到显色剂浓度、校准曲线等影响，特别是在较低浓度下的方酸测定存在较大的误差，难以适应痕量或超痕量检测。

5、基于此，特提出一种用于测量方酸二价阴离子的方法。

技术实现思路

1、本发明提供一种方酸二价阴离子的检测方法，所述检测方法为液相色谱测定，具体步骤为：

2、步骤(1)标准储备液的制备

3、精密称取0.0100g方酸钠标样于50.00ml容量瓶中，加入70％乙腈水溶液定容至刻度，摇匀，配制得到浓度为200mg/l的方酸钠标准储备液；

4、步骤(2)标准工作溶液的制备

5、取适量步骤1)所得标准储备液，用70％乙腈水溶液稀释配置成浓度为10mg/l～90mg/l的标准工作溶液，供超高效液相色谱测定；

6、步骤(3)测定

7、设定仪器参数，待仪器稳定后，将步骤(2)中系列标准工作溶液进行高效液相色谱测定，记录色谱图。

8、进一步地，所述步骤(2)中，所述标准工作溶液的浓度为10mg/l、20mg/l、30mg/l、40mg/l、50mg/l、60mg/l、70mg/l、80mg/l、90mg/l。

9、进一步地，所述高效液相色谱测定中，色谱条件为：

10、高效液相色谱仪(具有vwd检测器)：agilent1260infinutyⅱ；

11、色谱柱：zorbax eclipse plus-c18，4.6*250mm，5μm；

12、进一步地，hplc操作条件为：

13、进样体积：10μl；流速：1ml/min；流动相：a为乙腈，b为超纯水；柱温：25℃；

14、保留时间：约2.0min；运行时间：10.0min。

15、优选地，所述流动相a:b＝70:30(v/v)。

16、技术效果

17、本发明的检测方法专属性强，重复性好，回收率符合要求，操作简单，可以快速，准确地实现对方酸钠的定性定量检测，该方法节约了检测时间和成本，提高了检测效率。其中，

18、本方法在方酸钠的进样浓度在10mg/l～90mg/l范围内呈良好的线性关系，线性方程为y＝57.0846x-220.5832，线性相关系数r＝0.9972；浓度为50mg/l与25mg/l的方酸钠平均添加回收率分别为93.9％和96.9％；10mg/l浓度下目标峰的rsdr.t.为0.17％，rsdarea为0.86％，回收率符合要求，重复性高；方酸钠在70％乙腈水溶液中的lod为0.123mg/l；loq为10mg/l。该方法操作简单，信号灵敏度高，色谱峰形好，数据准确可靠，在方酸钠浓度较低时，也能满足检测要求，特别是对于痕量或超痕量检测方酸，能够准确快速的检测方酸二价阴离子的含量。针对目前方酸钠检测手段较少的现状，提供了一种新的方酸钠检测分析手段，对后续方酸钠应用过程中的质量控制具有指导意义。

技术特征：

1.一种方酸二价阴离子的高效液相色谱检测方法，其特征在于，所述检测方法的具体步骤为：

2.根据权利要求1所述的一种方酸二价阴离子的高效液相色谱检测方法，其特征在于，

3.根据权利要求1所述的一种方酸二价阴离子的高效液相色谱检测方法，其特征在于，

4.根据权利要求3所述的一种方酸二价阴离子的高效液相色谱检测方法，其特征在于，

5.根据权利要求1所述的一种方酸二价阴离子的高效液相色谱检测方法，其特征在于，

6.根据权利要求1所述的一种方酸二价阴离子的高效液相色谱检测方法，其特征在于，

7.根据权利要求1-4任一项所述的一种方酸二价阴离子的高效液相色谱检测方法，其特征在于，所述检测方法的平均添加回收率为93.9％～96.9％。

技术总结
本发明公开了一种方酸二价阴离子的高效液相色谱检测方法，采用C18色谱柱，检测波长为254nm，柱温为25℃，流动相为乙腈:水＝70:30(v/v)，在方酸钠的进样浓度在10mg/L～90mg/L范围内呈良好的线性关系，方酸钠在70％乙腈水溶液中的LOD为0.123mg/L；LOQ为10mg/L。方酸钠在70％乙腈水溶液中的LOD为0.123mg/L；LOQ为10mg/L。专属性强，重复性好，回收率符合要求，操作简单，可以快速准确地实现对方酸钠的定性定量检测，该方法节约了检测时间和成本，提高了检测效率。

技术研发人员：李立博,桂家宝,陈鸿蔚,李晋平
受保护的技术使用者：太原理工大学
技术研发日：
技术公布日：2024/4/17