本发明属于医药分析，具体涉及一种聚乙二醇类物质含量的检测方法。
背景技术：
1、聚乙二醇(peg)是由乙二醇为单元聚合而成的化合物，每个单元的分子量为44da，作为常用的药用辅料，peg具有水溶性好、吸水性强、性质稳定、在正常剂量下安全性好等特点。低分子量的聚乙二醇主要作为溶剂或表面活性剂，调节药物溶解度或体系粘度；高分子量的聚乙二醇则通常应用于固体制剂或新型药物制剂当中，也可与其他高分子聚合物制成缓控释骨架。
2、目前，关于聚乙二醇类物质的含量检测方法较少且各国药典中也未收载，可查询到的高效液相色谱－蒸发光散射检测法，无法对分子量相近、结构相似的聚乙二醇类物质进行含量检测。本发明在现有技术基础上开发了一种新的聚乙二醇类物质含量的检测方法，使用少量样品量即可实现对分子量相近、结构相似的聚乙二醇类物质进行含量检测，为药物研究特别是药品中聚乙二醇类物质含量研究奠定了基础。
技术实现思路
1、本发明的目的是在现有技术的基础上，提供一种聚乙二醇类物质含量的检测方法，使用较少样品量即可实现对分子量相近、结构相似的聚乙二醇类物质含量的研究，在电喷雾离子源(esi)下找到聚乙二醇类物质的特定碎片离子，且其响应值能满足灵敏度要求，从而开发lc-ms方法对聚乙二醇类物质进行含量测定。
2、为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
3、一种聚乙二醇类物质含量检测方法，该检测方法采用lc-ms，色谱柱为c18柱，以甲酸铵溶液-乙腈作为流动相进行梯度洗脱，所述甲酸铵溶液的ph值为6.0～6.6，通过质谱离子源进行检测，使用内标物，所述聚乙二醇类物质为聚乙二醇单甲醚350和/或peg-400。
4、进一步地，本发明中所述色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，优选为ace excel 3c18-pfp色谱柱，更优选色谱柱规格为100×2.1mm，3μm。
5、进一步地，检测波长为210～220nm，优选215nm。
6、进一步地，色谱柱流速为0.1～0.5ml/min，优选流速为0.27～0.33ml/min，更优选流速为0.3ml/min。
7、进一步地，柱温为20～40℃，优选柱温为25～35℃，更优选柱温为30℃。
8、进一步地，进样量为0.2～1.5μl，优选进样量为0.5～1.7μl，更优进样量为1.0μl。
9、进一步地，样品盘温度为2～15℃，优选样品盘温度为5℃。
10、进一步地，所述甲酸铵溶液中甲酸铵含量为0.01％～0.1％(w/w)。
11、进一步地，所述甲酸铵溶液中甲酸铵含量为0.03％～0.08％(w/w)。
12、进一步地，所述甲酸铵溶液中甲酸铵含量为0.06％(w/w)。
13、进一步地，所述甲酸铵溶液ph值为6.3。
14、进一步地，所述质谱离子源为电喷雾离子源，优选所述离子类型为正离子，更优选所述扫描模式为sim模式。
15、进一步地，所述质谱干燥气温度为300～400℃，优选干燥气温度为320～370℃，更优选干燥气温度为350℃。
16、进一步地，所述质谱干燥气流速为5.0～20l/min，优选干燥气流速为10.0～15.0l/min，更优选干燥气流速为12.0l/min。
17、进一步地，所述质谱雾化器压力为20～50psi，优选雾化器压力为30～40psi，更优选雾化器压力为35psi。
18、进一步地，所述质谱毛细管电压为2000～4000v，优选毛细管电压为2500～3500v，更优选毛细管电压为3000v。
19、进一步地，所述质谱溶剂延迟时间为0～10min，优选溶剂延迟时间为0～5min，更优选溶剂延迟时间为1.5min。
20、进一步地，所述质谱ms停止时间为1～30min，优选ms停止时间为1～20min，更优选ms停止时间为14min。
21、进一步地，内标物为2-[2-(2-乙氧基乙氧基)乙氧基]乙醇(ethoxytriglycol)。
22、进一步地，聚乙二醇单甲醚350选择m/z为270、314、358、402、446、490的离子作为定量离子。
23、进一步地，peg-400选择m/z为300、344、388、432、476、520、564的离子作为定量离子。
24、进一步地，内标物2-[2-(2-乙氧基乙氧基)乙氧基]乙醇(ethoxytriglycol)选择m/z 196的离子作为定量离子。
25、进一步地，检测步骤包括：
26、(1)溶液配制：分别配制内标储备液、空白溶液、对照品储备液、对照品溶液储备液、对照品溶液、供试品溶液；
27、(2)测定方法：待系统稳定后，分别进样空白溶液、供试品溶液和对照品溶液，记录色谱图。
28、进一步地，溶液配制方法如下：
29、(1)内标储备液：取2-[2-(2-乙氧基乙氧基)乙氧基]乙醇用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀即得；
30、(2)空白溶液：移取甲醇和超纯水至烧杯中，再加入内标储备液，摇匀即得，按需配制；
31、(3)对照品储备液1：取聚乙二醇单甲醚350和/或peg-400，精密称定，至容量瓶中，用空白溶液溶解并稀释至刻度，摇匀即得；
32、(4)对照品溶液储备液：移取对照品储备液1至容量瓶中，用空白溶液稀释至刻度，摇匀即得
33、(5)对照品溶液：移取对照品溶液储备液至容量瓶中，用空白溶液稀释至刻度，摇匀即得；
34、(6)供试品溶液：取供试品，精密称定，至容量瓶中，用空白溶液溶解并稀释至刻度，摇匀。
35、待基线平衡后，取各溶液依据方法描述的所述色谱条件检测，记录色谱图。
36、进一步地，溶液配制方法如下：
37、(1)内标储备液：取2-[2-(2-乙氧基乙氧基)乙氧基]乙醇约50mg，精密称定，至10ml容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀即得；
38、(2)空白溶液：移取1500ml甲醇和1500ml超纯水至5l烧杯中，再加入3.0ml内标储备液，摇匀即得，按需配制；
39、(3)对照品储备液1：取聚乙二醇单甲醚350约647mg和peg-400约225mg，精密称定，至50ml容量瓶中，用空白溶液溶解并稀释至刻度，摇匀即得；
40、(4)对照品溶液储备液：移取4.0ml对照品储备液1至10ml容量瓶中，用空白溶液稀释至刻度，摇匀即得
41、(5)对照品溶液：移取1.0ml对照品溶液储备液至100ml容量瓶中，用空白溶液稀释至刻度，摇匀即得；
42、(6)供试品溶液：取供试品约100mg，精密称定，至10ml容量瓶中，用空白溶液溶解并稀释至刻度，摇匀；移取上述溶液1.0ml至100ml容量瓶中，用空白溶液稀释至刻度，摇匀即得，平行配制2份。
43、待基线平衡后，取各溶液依据上述方法描述的色谱条件，记录色谱图。
44、进一步地，所述流动相梯度洗脱程序如下：
45、
46、
47、优选地，所述流动相梯度洗脱程序如下：
48、 时间(分钟) 流动相a(％体积) 流动相b(％体积) 0 90 10 10 85 15 13 85 15 14 20 80 19 20 80
49、。
50、进一步地，所述的检测方法用于检测原料药或药物制剂中聚乙二醇类物质含量的用途。
51、进一步地，所述原料药或药物制剂为咪达唑仑原料药或制剂。
52、进一步地，所述聚乙二醇类物质为聚乙二醇单甲醚350和/或peg400。
53、有益效果
54、采用本发明的技术方案，优势如下：
55、本发明采用的lc-ms方法样品量使用较少，且选择的各离子响应较高，峰型较好，能够筛选出合适的离子，有效地解决了分子量相近、结构相似的聚乙二醇类物质含量检测问题，对药物研究具有重要意义。