本公开涉及在多个发光点处分别识别并检测从多种荧光体发出的荧光的分析方法以及分析装置。
背景技术：
1、近年来，在多个毛细管中，填充电解质溶液、或者包括高分子凝胶、聚合物的电解质溶液等电泳分离介质，并联地进行电泳分析的多毛细管电泳装置被广泛使用。分析对象从低分子到蛋白质、核酸等高分子，范围广泛。此外，在测量模式中，大量有如下模式等：将灯光照射到各毛细管的吸光点，检测分析对象通过吸光点时产生的灯光的吸收的模式；或者，将激光照射到各毛细管的发光点，检测分析对象通过发光点时产生的荧光或者散射光的模式等。
2、例如，在专利文献1中，将a根(a为2以上的整数)毛细管上的a个发光点的周边的全部毛细管排列在相同平面上，从排列平面的侧方导入激光束而一并照射全部毛细管的发光点，使在各发光点产生的荧光在与排列平面垂直的方向上进行波长分散而一并检测。在检测装置中，将从a个发光点发出的荧光在1个聚光透镜中一并准直，使其透过1个透射型的衍射光栅，利用1个成像透镜将各荧光的1次衍射光一并成像在1个二维传感器上。在此，通过使a个发光点的排列方向与基于衍射光栅的波长分散方向相互垂直，使来自各毛细管的发光荧光的波长分散图像在二维传感器上不相互重合。对于各毛细管的波长分散图像，通过设定b个(b为1以上的整数)任意波段的检测区域，能够进行b色检测。将b＝1的情况称为单色检测，将b≥2的情况称为多色检测。在专利文献1的多毛细管电泳装置中，例如，能够在各毛细管中进行不同的dna样本的基于sanger法的dna序列。在sanger法中，在dna样本中包括的dna片段中，根据末端碱基种类a、c、g以及t，标记4种荧光体，通过多色检测来识别各自的发光荧光。
3、在专利文献2中，将a根(a为2以上的整数)毛细管上的a个发光点的周边的全部毛细管排列在相同平面上，从排列平面的侧方导入激光束而一并照射全部毛细管的发光点，根据波长分量将在与排列平面垂直的方向上在各发光点产生的荧光分割而一并检测。在检测装置中，将来自a个发光点的发光荧光分别用a个聚光透镜单独准直后作为a根光束，对排列了b个(b为1以上的整数)的分色镜的1组分色镜阵列并联入射各光束分别分割成b根不同波段的光束，将生成的合计a×b根光束并列入射到1个二维传感器，在图像上生成a×b个分割像。在此，通过使a个发光点的排列方向与基于分色镜阵列的各光束的b个分割方向相互垂直，使得a×b个分割像在图像上不相互重合，能够设定a×b个检测区域。由此，能够进行各毛细管的b色检测。因此，在专利文献2的多毛细管电泳装置中，例如，与专利文献1的情况同样地，能够在各毛细管中进行不同的dna样本的基于sanger法的dna序列。
4、然而，通常，通过仅进行多色检测，无法识别多种荧光体的发光荧光。这是因为，各荧光体的荧光光谱相互重合，因此在任意一个波段中混入多种荧光体的荧光(在本公开中，称为光谱串扰)。此外，这是因为存在不同浓度的多种荧光体同时发出荧光的情况。因此，通过接下来的工序(在本公开中，称为颜色转换)，消除光谱串扰，从而能够进行上述识别。
5、对于a个(a为2以上的整数)的发光点的每一个，在各时刻对于c种(c为1以上的整数)荧光体的发光荧光，在b种(b为1以上的整数)波段的检测区域进行b色检测。其中，设b≥c。对于各发光点，并且对各时刻，对b色检测结果施行颜色转换，取得c种的荧光体的浓度。对于发光点p(a)(a＝1，2，…，a)的每一个，在不同波段的检测区域w(b)(b＝1，2，…，b)中，检测荧光体d(c)(c＝1，2，…，c)的发光荧光。在任意时刻，将发光点p(a)处的荧光体d(c)的浓度设为z(c)，将关于发光点p(a)的检测区域w(b)的信号强度设为x(b)。在此，设为x是以信号强度x(b)为要素的b行1列的矩阵，z是以浓度z(c)为要素的c行1列的矩阵，y是以y(b)(c)为要素的b行c列的矩阵，下式成立。(数学式1)～(数学式4)是b以及c的关系式，而不是a的关系式，在各发光点p(a)独立成立。在b＝1的单色检测的情况下，通过b≥c，c＝1，x、y、z都不是矩阵。
6、[数学式1]
7、x＝y×z (数1)
8、[数学式2]
9、
10、[数学式3]
11、
12、[数学式4]
13、
14、在此，b行c列的矩阵y的要素y(b)(c)表示荧光体d(c)的发光荧光在检测区域w(b)中检测出的信号强度比率。通过使任意1种荧光体d(c0)单独地荧光发光，能够决定矩阵y的1列y(b)(c0)(b＝1，2，…，b)。在此，控制荧光体d(c0)的浓度一般是困难的，因此若将1列y(b)(c0)标准化则较为便利。例如，优选地，在b个要素中，以最大的要素为1，以相对于最大值的比率表示其他要素。或者，优选地，决定各要素的比率，以使b个要素的合计为1。换句话说，
15、[数学式5]
16、
17、而且，通过对c种荧光体d(c)全部依次进行上述工序，能够决定矩阵y的全部列。矩阵y仅由荧光体d(c)以及不同波段的检测区域w(b)的特性决定，在电泳分析正在进行的过程中不变化。此外，只要固定光学系统、荧光体d(c)、检测区域w(b)等条件，对于不同的电泳分析，矩阵y也保持固定。因此，关于各发光点，各时刻的荧光体d(c)的浓度z(c)根据各时刻的检测区域w(b)的信号强度x(b)，通过下式求出。
18、[数学式6]
19、z＝y-×x (数6)
20、在此，y－为c行b列，为y的一般逆矩阵，通过y＝(yt×y)－1×yt)求出。当矩阵y为b＝c的正方矩阵时，y等于逆矩阵y－1。
21、(数学式1)是表示未知的c种荧光体的浓度与已知的b色荧光强度的关系的联立方程式，(数学式6)相当于求出其解。因此，通常，如上所述，需要b≥c的条件。假设b＜c，则无法唯一地求出解(换句话说，由于可能存在多个解)，无法如(数学式6)那样执行颜色转换。
22、作为例子，对sanger法的c＝4，4色检测的b＝4的情况进行详细说明。通过sanger反应，在制作针对模板dna的各种长度的dna片段的拷贝时，根据末端的碱基种类a，c，g，以及t，用4种荧光体d(1)，d(2)，d(3)，以及d(4)标记，将它们通过电泳进行长度分离的同时依次照射激光束进行荧光发光。在与荧光体d(1)、d(2)、d(3)、以及d(4)各自的极大发光波长对应的4种波段的检测区域w(1)、w(2)、w(3)、以及w(4)中检测4色的发光荧光，取得它们的信号强度x(1)、x(2)、x(3)、以及x(4)的时间序列数据(在本公开中，称为原始数据。但是，不限于b＝4、c＝4的情况)。如果将各时刻的荧光体d(1)、d(2)、d(3)以及d(4)的浓度设为z(1)、z(2)、z(3)、以及z(4)，则(数学式1)成为下式。
23、[数学式7]
24、
25、在此，4行4列矩阵y的要素y(b)(c)表示通过光谱串扰，荧光体d(c)(c为1，2，3，或者4)的发光荧光在波段w(b)(b为1，2，3，或者4)被检测出的强度比率。在各毛细管中，荧光体d(c)(c为1，2，3，或者4)分别对单独进行荧光发光的样本进行电泳分析，从而能够决定矩阵y的要素y(b)(c)。例如，荧光体d(1)单独进行荧光发光时的4色荧光强度x(1)、x(2)、x(3)、以及x(4)分别赋予要素y(1)(1)、y(2)(1)、y(3)(1)、以及y(4)(1)。此外，荧光体d(2)单独进行荧光发光时的4色荧光强度x(1)、x(2)、x(3)、以及x(4)分别赋予要素y(1)(2)、y(2)(2)、y(3)(2)、以及y(4)(2)。对于荧光体d(3)、d(4)也是同样的。y(b)(c)是仅由荧光体d(c)以及波段w(b)的特性决定的固定值，在电泳中不变化。因此，对于各毛细管，各时刻的荧光体d(1)、d(2)、d(3)、以及d(4)的浓度根据各时刻的4色荧光强度x(1)、x(2)、x(3)、以及x(4)，通过将(数学式6)具体化的下式求出。
26、[数学式8]
27、
28、这样，逆矩阵y－1，通过与4色荧光强度相乘来消除光谱串扰，取得4种荧光体的浓度，即末端为4种碱基的dna片段的浓度的时间序列数据(在本公开中，称为颜色转换数据。但是，不限于b＝4，c＝4的情况)。
29、以上的颜色转换的工序如上所述，针对a根毛细管分别独立地进行。这在毛细管之间的串扰(在本公开中，称为空间串扰)足够小的前提下成立。换句话说，意味着在检测从任意一个毛细管发出的荧光而得到的信号强度中，来自其他毛细管发出的来自荧光的信号强度混合存在的比率足够小。因此，通过对c种荧光体d(c)依次进行使上述的1种荧光体d(c0)单独进行荧光发光的工序来决定矩阵y的工序实质上同时针对a根毛细管进行，并行地求出a根毛细管各自的矩阵y。这是为了在短时间内不费事地执行矩阵y的导出而必须的工序。
30、空间串扰基于光学系统的设计而减少是基本的，但也有通过计算处理来减少的尝试。在专利文献3中，并非来自多个毛细管，而是将来自随机排列在平面上的多个发光点的发光荧光通过1个聚光透镜一并成像在1个二维传感器上。来自各发光点的发光荧光作为设置在二维传感器上的各个成像位置的检测区域的信号强度而得到。来自任意一个发光点的发光荧光的信号强度赋予来自其他发光点的发光荧光的信号强度的空间串扰的比率能够作为这两个发光点间的距离、或者对应的两个检测区域的距离的函数来表示，发现其与上述距离一起减少。预先求出上述函数，在随机排列在平面上的多个发光点的荧光图像中，根据任意两个检测区域的距离和上述函数求出相互的空间串扰，从原来的荧光图像中减去所求出的空间串扰，由此实现空间串扰的减少。
31、在先技术文献
32、专利文献
33、专利文献1：日本专利第3897277号公报
34、专利文献2：日本专利第6456983号公报
35、专利文献3：日本特表2018-529947号公报
技术实现思路
1、发明要解决的课题
2、在专利文献1、以及专利文献2的任一情况下，由于从a根毛细管上的a个发光点发出的荧光在二维传感器上相互分离而成像，因此空间串扰本质上被抑制得较低。对于空间串扰的重要因素，可以考虑(1)透镜的像差、(2)由多毛细管、透镜、滤波器、分色镜以及二维传感器等要素构成的在光学系统的内部产生的、荧光的要素间的多重反射、(3)二维传感器的像素间的高光溢出(blooming)等。为了减少空间串扰，需要以上述的重要因素(1)～(3)的影响最小的方式来构建光学系统。例如，为了抑制重要因素(2)的影响，作为对透镜实施的减反射涂层，考虑选择反射率更小的涂层等。然而，不能使空间串扰完全为零。对于空间串扰，在从任意一个毛细管发出的荧光的检测中，有效地使检测下限上升，因此在降低检测灵敏度的同时，有可能缩小检测动态范围。因此，即使稍微减少空间串扰，在缓解或解决上述课题的方面极其重要。
3、本发明人等针对专利文献1、或专利文献2的光学系统，通过专利文献3的方法，尝试减少空间串扰，但没有良好地发挥功能。首先，对b＝1的单色检测的情况进行说明。对于a个发光点的任意1个的发光点即发光点α的检测区域β的信号强度x(α)(β)，虽然确认到其对上述以外的任意1个发光点α'(α≠α')的检测区域β的信号强度x(α')(β)赋予的空间串扰与上述2个检测区域之间的距离一起减少的倾向，但显然不能用一个上述距离的函数表示。例如，即使上述2个检测区域之间的距离固定，在上述2个检测区域位于光学系统的中心轴的附近的情况下和位于远离光学系统的中心轴的位置的情况下，空间串扰的比率也不同。此外，从上述2个检测区域的一方到另一方的空间串扰的比率和另一方到一方的空间串扰的比率不同。在b≥2的多色检测的情况下，专利文献3的方法更为无法发挥功能。关于a个发光点的任意1个的发光点即发光点α的、b个检测区域的任意1个检测区域即检测区域β的信号强度x(α)(β)，对于关于上述以外的任意1个发光点α'(α≠α')的、b个检测区域的任意1个检测区域β'(是β＝β'或者β≠β'，β＝β'表示相同波段的检测区域，β≠β'表示不同波段的检测区域)的信号强度x(α')(β')赋予的空间串扰，无法用上述2个检测区域之间的距离的函数表示。特别是，在β≠β'的情况下，由于空间串扰和光谱串扰混合存在，因此上述2个检测区域之间的串扰本质上不能用两者的距离的函数来表示。关于本课题，在“具体实施方式”中详细地进行说明。
4、因此，在本公开中，提出了通过计算处理来减少在分别检测来自多个发光点的发光的任意的光学系统中产生的多个发光点间的空间串扰，从而识别来自多个发光点的发光，分别独立地检测发光点的方法。此外，提出了通过计算处理来减少在分别检测从多个发光点发出的多种荧光体的荧光的任意的光学系统中产生的多个发光点间的空间串扰、以及针对各发光点的多种荧光体之间的光谱串扰，从而识别来自多个发光点的多种荧光体的荧光发光，分别独立地进行检测的方法。或者，提出了如下方法：通过计算处理来减少在分别检测多个吸光点中的吸光的任意的光学系统中产生的多个吸光点之间的空间串扰，从而识别多个吸光点中的吸光，分别独立地进行检测。此外，提出了如下方法：通过计算处理来减少在分别检测多个吸光点中的多种吸光体的吸光的任意的光学系统中产生的多个吸光点间的空间串扰、针对以及各吸光点的多种吸光体间的光谱串扰，从而识别多个吸光点中的多种吸光体的吸光，分别独立地检测多个吸光点中的多个种类的吸光体的吸光。
5、用于解决课题的手段
6、在专利文献1或者专利文献2等的光学系统中，说明了针对a个(a为2以上的整数)的发光点的每一个，在b个(b为1以上的整数)的波段的检测区域中，检测c种(c为1以上的整数)荧光体的发光荧光的情况。在此，设为不同波段的检测区域分别检测荧光不同的波长分量。此外，不同种类的荧光体分别发出具有不同荧光光谱的荧光。对于发光点p(a)(a＝1，2，…，a)的每一个，在不同波段的检测区域w(a，b)(b＝1，2，…，b)中，检测存在于发光点p(a)的荧光体d(a，c)(c＝1，2，…，c)的发光荧光。在任意时刻，将发光点p(a)处的荧光体d(a，c)的浓度设为z(a，c)，将针对发光点p(a')的检测区域w(a'，b)的信号强度设为x(a'，b)。在此，本发明人首次发现，设x为以x(a'，b)为要素的a×b行1列的矩阵，z为以z(a，c)为要素的a×c行1列的矩阵，y为以y(a'，b)(a，c)为要素的(a×b)行(a×c)列的矩阵，下式成立。
7、[数学式9]
8、x＝y×z (数9)
9、[数学式10]
10、
11、[数学式11]
12、
13、[数学式12]
14、
15、(数学式9)是与(数学式1)相同的式子，但若比较(数学式1)～(数学式4)和(数学式9)～(数学式12)，可知，两者完全不同。(数学式9)～(数学式12)不仅是b以及c的关系式，也是a的关系式，不同的发光点p(a)相互关联。即，(数学式9)～(数学式12)除了对相同发光点p(a)的光谱串扰以外，还能够一并考虑不同的发光点p(a)间的空间串扰以及光谱串扰，与(数学式1)～(数学式4)本质上不同。
16、在此，关于(a×b)行(a×c)列的矩阵y的要素y(a'，b)(a，c)表示：(1)通过针对a'＝a即相同的发光点的光谱串扰，p(a')中的荧光体d(a'，c)的发光荧光在任意的检测区域w(a'，b)中被检测的信号强度比率，除此之外，表示：(2)通过针对a'≠a即不同的发光点的空间串扰以及光谱串扰，发光点p(a)处的荧光体d(a，c)的发光荧光在任意的检测区域w(a'，b)中被检测的信号强度比率。在任意1个发光点p(a 0)中，通过使任意1种荧光体d(a 0，c 0)单独地进行荧光发光，能够决定矩阵y的1列y(a，b)(a 0，c 0)(a＝1，2，…，a，以及，b＝1，2，…，b)。在此，控制荧光体d(a 0，c 0)的浓度一般是困难的，因此将1列y(a，b)(a 0，c 0)标准化是方便的。例如，在a×b个要素中，以最大的要素为1，以相对于最大值的比率表示其他要素即可。或者，优选以a×b个要素的合计为1的方式来决定各要素的比率。换句话说，设为
17、[数学式13]
18、
19、。然后，通过对a个发光点p(a)中的c种荧光体d(a，c)的全部组合依次进行上述工序，能够决定矩阵y的全部列。矩阵y仅由发光点p(a)、荧光体d(a，c)、以及检测区域w(a，b)的特性决定，在电泳分析正在进行的过程中不变化。此外，只要固定光学系统、发光点p(a)、荧光体d(a，c)、检测区域w(a，b)等的条件，对于不同的电泳分析，矩阵y也保持固定。因此，关于各发光点，各时刻的荧光体d(a，c)的浓度z(a，c)根据各时刻的检测区域w(a，b)的信号强度x(a，b)，通过下式求出。
20、[数学式14]
21、z＝y-×x (数14)
22、(数学式14)是与(数学式6)相同的式子，但若比较(数学式2)～(数学式4)以及(数学式6)、(数学式10)～(数学式12)以及(数学式14)，则可知两者完全不同。通过(数学式14)，对于各时刻，通过将预先求出的矩阵y的一般逆矩阵y-与a×b个信号强度x(a，b)相乘，能够消除光谱串扰和空间串扰这两者，求出a×c个荧光体的浓度z(a，c)。y-是(a×c)行(a×b)列的矩阵。在本公开中，将消除光谱串扰称为颜色转换，与此对应，将消除空间串扰称为空间校正。换句话说，在y-的(a×c)×(a×b)个要素中，包括执行颜色转换的部分和执行空间校正的部分这两者。而且，在本公开中，将对各时刻执行(数学式14)而得到的z(a，c)的时间序列数据称为颜色转换+空间校正数据。
23、矩阵x的各要素可以是预先减去了背景光的值，也可以是实施了适当的噪声减少处理的值。此外，对于矩阵y的各要素，也同样地，可以是预先减去了背景光的值，也可以加入适当的变化。
24、在b＝1、以及c＝1的单色检测的情况下，上述被如下那样简化。对于发光点p(a)(a＝1，2，…，a)，分别在1个检测区域中检测1种荧光体的发光荧光。在任意时刻，将发光点p(a)处的荧光体的浓度设为z(a)，将针对发光点p(a')的信号强度设为x(a')。在此，如果设x是以x(a′)为要素的a行1列的矩阵，z是以z(a)为要素的a行1列的矩阵，y是以y(a′)(a)为要素的a行a列的矩阵，则(数学式10)～(数学式12)如下式那样被简化。(数学式9)以及(数学式14)直接成立。
25、[数学式15]
26、
27、[数学式16]
28、
29、[数学式17]
30、
31、(数学式9)以及(数学式14)～(数学式17)与专利文献3中使用的通式、例如专利文献3的[数学式7]～[数学式9]形式上相同，但内容有很大不同(以下，将专利文献3中使用的数学式记载为[])。[数学式7]的矩阵a的要素αij是发光点和各个检测区域之间的距离dij的函数，具体如[数学式10]所示，由dij的指数函数之和表示，伴随着dij的增大而αij衰减。在专利文献3中，对不同的样本得到不同的荧光图像，在各荧光图像中，多个发光点的检测区域的位置随机变化。因此，在专利文献3中，预先求出上述函数，针对各荧光图像，针对全部的2个发光点的组合求出多个发光点中的任意2个发光点的检测区域之间的距离，代入上述函数来导出αij。换句话说，针对每个样本或者每个荧光图像，αij即矩阵a发生变化。对此，在本公开中，如上述那样，或者如在[具体实施方式]中叙述的那样，发现了(数学式16)的矩阵y的要素y(a')(a)不能以发光点p(a)与p(a')各自的检测区域之间的距离的函数来表示。此外，发现根据光学系统的结构等，也不可能通过计算求出要素y(a')(a)。因此，在本公开中，对于不同的样本，作为多个发光点的检测区域的位置不变化的条件，在该条件下通过实测求出要素y(a')(a)。具体而言，如上所述，仅在任意1个发光点p(a0)中单独进行荧光发光，由此决定矩阵y的1列y(a')(a0)(a'＝1，2，…，a)。然后，通过对a个发光点p(a)的全部依次进行上述工序来决定矩阵y的全部列。矩阵y仅由发光点p(a)的特性决定，在分析正在进行的过程中不变化。此外，只要光学系统、发光点p(a)以及其检测区域等条件固定，对于不同样本的分析，矩阵y也保持固定。通过专利文献3的光学系统或者装置结构来实施以上的工序是不可能的。这是因为，不能固定多个发光点的检测区域的位置，即使假设能固定，也不能使各发光点单独并依次发光。因此，从专利文献3中，无法想到本公开的方法。
32、以上能够以如下方式进行重新说明。即，对于a个(a为2以上的整数)的发光点的每一个，在b个(b为1以上的整数)的任意波段的检测区域中，检测c种(c为1以上的整数)发光体的发光。对于发光点p(a)(a＝1，2，…，a)的每一个，在不同波段的检测区域w(a，b)(b＝1，2，…，b)中，检测存在于发光点p(a)的发光体d(a，c)(c＝1，2，…，c)的发光。在任意时刻，将发光点p(a)处的发光体d(a，c)的浓度设为z(a，c)，将针对p(a')的w(a'，b)的发光强度设为x(a'，b)。在这种情况下，(数学式9)～(数学式17)成立，同样地，能够消除光谱串扰和空间串扰这两者，求出a×c个发光体的浓度z(a，c)。在此，发光是指荧光、磷光、散射光等。
33、此外，以上也可以如下进行重新说明。即，a个(a为2以上的整数)吸光点的每一个，在b个(b为1以上的整数)任意波段的检测区域中，检测c种(c为1以上的整数)的吸光体的吸光。对于吸光点p(a)(a＝1，2，…，a)的每一个，在不同波段的检测区域w(a，b)(b＝1，2，…，b)中，检测存在于吸光点p(a)的吸光体d(a，c)(c＝1，2，…，c)的吸光。在任意时刻，将吸光点p(a)处的吸光体d(a，c)的浓度设为z(a，c)，将针对吸光点p(a')的w(a'，b)的吸光度设为x(a'，b)。在这种情况下，(数学式9)～(数学式17)成立，同样地，能够消除光谱串扰和空间串扰这两者，求出a×c个吸光体的浓度z(a，c)。
34、或者，也能够将以上重新说明为光测量以外的多点检测。即，对于a个(a为2以上的整数)信号产生点的每一个，在b个(b为1以上的整数)任意频带的检测区域中，检测c种(c为1以上的整数)的信号产生体的信号。对于信号产生点p(a)(a＝1，2，…，a)的每一个，在不同频带的检测区域w(a，b)(b＝1，2，…，b)中，检测存在于信号产生点p(a)的信号产生物体d(a，c)(c＝1，2，…，c)的信号。在任意时刻，将信号产生点p(a)处的信号产生物体d(a，c)的浓度设为z(a，c)，将针对信号产生点p(a')的w(a'，b)的信号强度设为x(a'，b)。在这种情况下，(数学式9)～(数学式17)成立，同样地，能够消除光谱串扰和空间串扰这两者，求出a×c个信号产生体的浓度z(a，c)。
35、以上，主要使用数学式进行了说明，但这用于容易理解本公开的内容。在实施本公开的技术时，只要使用基于本公开的内容的方法即可，不一定像数学式那样进行，也可以使数学式变形，也可以不使用数学式。此外，在本公开中，“发光体的浓度”的记载能够替换为“发光体的发光强度”，“荧光体的浓度”的记载能够替换为“荧光体的荧光强度”，“吸光体的浓度”的记载能够替换为“吸光体的吸光度”。
36、根据本说明书的描述、附图，本公开所涉及的进一步的特征将变得清楚。此外，本公开的方式通过要素以及多样的要素的组合以及以后的详细的记述和附加的权利要求的方式来达成并实现。
37、本说明书的描述只不过是典型的例示，在任何意义上都不限定本公开的权利要求书或应用例。
38、根据本说明书的描述、附图，本公开所涉及的进一步的特征将变得清楚。此外，本公开的方式通过要素以及多样的要素的组合以及以后的详细的记述和附加的权利要求的方式来达成并实现。
39、本说明书的描述只不过是典型的例示，在任何意义上都不限定本公开的权利要求书或应用例。
40、发明效果
41、根据本公开，通过计算处理消除或减少在分别检测来自多个发光点的发光的任意的光学系统中产生的多个发光点间的空间串扰，能够识别来自多个发光点的发光，分别独立地进行检测。此外，通过计算处理消除或减少在分别检测从多个发光点发出的多种荧光体的荧光的任意的光学系统中产生的、多个发光点间的空间串扰、以及关于各发光点的多种荧光体间的光谱串扰，从而能够识别来自多个发光点的多种荧光体的荧光发光，分别独立地进行检测。
42、进而，通过消除或减少空间串扰以及光谱串扰，能够避免伴随着空间串扰以及光谱串扰而产生的检测灵敏度的降低、或者检测动态范围的降低。
43、上述以外的课题、结构以及效果通过以下的实施方式的说明而变得明确。