一种快速鉴定茶褐素的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及化学鉴定领域，特别是一种快速鉴定茶褐素的方法。
【背景技术】
[0002]现有的茶褐素(茶色素)鉴定方法分为定性和定量两种，传统的紫外吸收定性方法采用普通分光光度计，茶褐素吸收峰为273nm±20nm，传统的基于标准曲线的比色法定量需要标准品，鉴于茶褐素(茶色素)是一个混合多聚物，所以没有真正意义的标准品，并且操作时间比较长(I小时以上)，每次的标准曲线都需要重新做，用此方法测定的值误差比较大，甚至会出现含量超过100%的情况。
[0003]现在新出现了一种采用高效液相色谱或质谱或液-质联用的方法进行茶褐素的检测方法，所得数据精确，但也具有一些缺陷，如机器贵，速度慢，对操作人员技能要求高，高效液相色谱太精密，所测结果差异很大。
【发明内容】
[0004]为了解决如上技术问题，本发明提供了一种快速鉴定茶褐素的方法，该方法具有检测快速准确，受人为因素影响小，工作量小的特点。
[0005]本发明的一种快速鉴定茶褐素的方法，包括如下步骤:
[0006]I)定性检测:配制茶褐素溶液后，使用超微量紫外分光光度计检测茶褐素溶液的吸光度，得到茶褐素的特征峰及特征峰型；
[0007]2)定量检测:配制已知浓度茶褐素溶液，使用毛细管电泳仪检测茶褐素溶液的吸收峰，并通过吸收峰峰面积或峰高绘制标准曲线及公式；然后检测待测茶褐素溶液，对照标准曲线计算得到待测茶褐素含量。
[0008]进一步的，所述步骤I)具体为配制茶褐素浓度为0.5-8g/L的茶褐素溶液后，取2-5 μ L茶褐素溶液在超微量紫外分光光度计的200-850nm波长下检测茶褐素的吸光度，茶褐素在此波长范围中出现特征吸收峰及确定的峰型。
[0009]进一步的，所述步骤2)具体为配制5-20个不同浓度且浓度为0.5-8g/L的含量为90%的茶褐素溶液后，每个浓度的溶液中取2-10ml茶褐素溶液在毛细管电泳仪上检测茶褐素的吸收峰，通过吸收峰的峰面积或峰高，计算茶褐素含量，并拟合浓度-峰面积标准曲线:
[0010]y = 0.000003679 ?0.000011037x±0.093063315 ；
[0011 ] 或浓度-峰高标准曲线:
[0012]y = 0.000126115 ?0.000378345x±0.039633517 ；
[0013]其中毛细管电泳仪的检测条件为:缓冲溶液为硼砂，毛细管长度为30_60cm，电泳时间为700-1200S，进样压力为0.5-2kpa，冲洗压力为20_50kpa，紫外检测器检测波长273nm ；
[0014]以同样电泳条件将浓度为0.5-8g/L的待测茶褐素样品进行毛细管电泳获得峰面积或峰高，根据浓度-峰面积或浓度-峰高标准曲线计算出相对浓度，最终得到待测茶褐素样品的含量。
[0015]上述快速鉴定茶褐素的方法由定性检测先检测溶液中是否含有茶褐素，再对含有茶褐素的溶液进行定量检测，通过计算得到茶褐素的相对浓度，进而得到该茶褐素样品的含量；该定性检测和定量检测相结合对茶褐素溶液进行检测的方法可在30min内精确测量茶褐素含量，误差仅为5% _10%，大大低于以往对茶褐素的检测方法的误差率。
[0016]进一步的，一种快速鉴定茶褐素的方法，该方法为:配制茶褐素溶液后，使用超微量紫外分光光度计检测茶褐素溶液的吸光度，得到茶褐素的特征峰及特征峰型。
[0017]进一步的，所述方法具体为配制茶褐素浓度为0.5-8g/L的茶褐素溶液后，取2-5 μ L茶褐素溶液在超微量紫外分光光度计的200-850nm波长下检测茶褐素的吸光度，茶褐素在此波长范围中出现特征吸收峰及确定的峰型。
[0018]当仅需对溶液进行茶褐素的定性检测，不需定量检测时，可采用本发明的上述方法，该方法为定性检测，该定性检测由超微量紫外分光光度计进行检测，测得的茶褐素特征峰在273nm±2nm处并且全波长峰型独特。通过该方法对不确定是否含茶褐素的溶液进行检测，若在273nm±2nm处出现特征峰，则说明该溶液中含有茶褐素，若无该特征峰，则说明该溶液中不含茶褐素。如果峰型图形状不一致，说明样品中可能含有其他物质。
[0019]上述快速鉴定茶褐素的方法仅为定性检测，可在5min内判断溶液内是否含有茶褐素，检测时间短，检测结果准确。
[0020]综上，本发明的一种快速鉴定茶褐素的方法具有的有益效果有:检测结果准确，检测时间短；受人为因素影响小，测定的批间差小；检测工作量小；检测步骤标准化。
【附图说明】
[0021]图1为实施例1中超微量紫外分光光度计吸光度峰型图；
[0022]图2为实施例1中毛细管电泳仪检测的电泳图；
[0023]图3为实施例2中超微量紫外分光光度计吸光度峰型图；
[0024]图4为实施例3中超微量紫外分光光度计吸光度峰型图；
[0025]图5为实施例3中毛细管电泳仪检测的电泳图；
【具体实施方式】
[0026]为了使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体图示，进一步阐述本发明。
[0027]实施例1
[0028]本发明的一种快速鉴定茶褐素的方法，包括如下步骤:
[0029]I)定性检测:配制茶褐素浓度为lg/L的茶褐素溶液后，取3 UL茶褐素溶液在k5600型超微量紫外分光光度计的200-850nm波长下检测茶褐素的吸光度，茶褐素在273nm±2nm处出现特征吸收峰，UV-VIS全波长扫描峰型见图1 ;
[0030]2)定量检测:配制浓度为4g/L的待测茶褐素溶液后，取2ml茶褐素溶液在毛细管电泳仪上检测茶褐素的吸收峰为496062uV.S，其中电泳条件为:缓冲溶液为硼砂，毛细管长度50cm，电泳时间900s，进样压力lkpa，冲洗压力40kpa，紫外检测器检测波长为273nm，电泳图见图2。
[0031]通过浓度-峰面积标准曲线公式y = 0.000007358*x+0.06204221计算待测茶褐素的相对浓度为3.712g/L，最终得到待测茶褐素含量为90% *(3.712/4) = 83.5% ；
[0032]本实施例的一种快速鉴定茶褐素的方法具有的有益效果有:检测结果准确，检测时间短；受人为因素影响小，测定的批间差小；检测工作量小；检测步骤标准化。
[0033]实施例2
[0034]本发明的一种快速鉴定茶褐素的方法，该方法为:
[0035]配制茶褐素浓度为2g/L的茶褐素溶液后，取4 μ L茶褐素溶液在k5600型超微量紫外分光光度计的200-850nm波长下检测茶褐素的吸光度，茶褐素在273nm±2nm处出现特征吸收峰，UV-VIS全波长扫描峰型见图3 ；
[0036]本实施例的一种快速鉴定茶褐素的方法具有的有益效果有:检测结果准确，检测时间短；受人为因素影响小，测定的批间差小；检测工作量小；检测步骤标准化。
[0037]实施例3
[0038]本发明的一种快速鉴定茶褐素的方法，包括如下步骤:
[0039]I)定性检测:配制茶褐素浓度为2g/L的茶褐素溶液后，取2 μ L茶褐素溶液在k5600型超微量紫外分光光度计的200-850nm波长下检测茶褐素的吸光度，茶褐素在273nm±2nm处出现特征吸收峰，UV-VIS全波长扫描峰型见图4 ；
[0040]2)定量检测:配制浓度为6g/L的待测茶褐素溶液后，取3ml茶褐素溶液在毛细管电泳仪上检测茶褐素的峰高为20679mV，其中电泳条件为:缓冲溶液为硼砂，毛细管长度50cm，电泳时间900s，进样压力Ikp，冲洗压力40kpa，紫外检测器检测波长为273nm，电泳图见图5。
[0041]通过浓度-峰高标准曲线公式y = 0.00025223*x+0.026422345计算待测茶褐素的相对浓度为5.242g/L，最终得到待测茶褐素含量为90% *(3.712/4) = 78.6% ；
[0042]本实施例的一种快速鉴定茶褐素的方法具有的有益效果有:检测结果准确，检测时间短；受人为因素影响小，测定的批间差小；检测工作量小；检测步骤标准化。
【主权项】
1.一种快速鉴定茶褐素的方法，其特征在于，包括如下步骤: 1)定性检测:配制茶褐素溶液后，使用超微量紫外分光光度计检测茶褐素溶液的吸光度，得到茶褐素的特征峰型； 2)定量检测:配制已知浓度茶褐素溶液，使用毛细管电泳仪检测茶褐素溶液在特定波长273nm下的吸收峰，并通过吸收峰峰面积或峰高绘制标准曲线及公式；然后检测待测茶褐素溶液，对照标准曲线计算得到待测茶褐素含量。
2.根据权利要求1所述的一种快速鉴定茶褐素的方法，其特征在于:所述步骤I)具体为配制茶褐素浓度为0.5-8g/L的茶褐素溶液后，取2-5 μ L茶褐素溶液在超微量紫外分光光度计的200-850nm波长下检测茶褐素的吸光度，茶褐素在此波长范围中出现特征吸收峰及确定的峰图型。
3.根据权利要求1所述的一种快速鉴定茶褐素的方法，其特征在于:所述步骤2)具体为配制5-20个不同浓度且浓度为0.5-8g/L的含量为90%的茶褐素溶液后，每个浓度的溶液中取2-10ml茶褐素溶液在毛细管电泳仪上检测茶褐素在273nm处的吸收峰，通过吸收峰的峰面积或峰高，计算茶褐素含量；其中毛细管电泳仪的检测条件为:缓冲溶液为硼砂，毛细管长度为30-60cm，电泳时间为700-1200s，进样压力为0.5_2kpa，冲洗压力为20_50kp ； 采用以上述电泳条件将浓度为0.5-8g/L的待测茶褐素样品进行毛细管电泳获得峰面积或峰高，根据浓度-峰面积或浓度-峰高标准曲线计算出相对浓度，最终得到待测茶褐素样品的含量。
4.一种根据权利要求1所述的快速鉴定茶褐素的方法，其特征在于，该方法为:配制茶褐素溶液后，使用超微量紫外分光光度计检测茶褐素溶液的吸光度，得到茶褐素的特征峰及峰图形。
5.根据权利要求4所述的一种快速鉴定茶褐素的方法，其特征在于:所述方法具体为配制茶褐素浓度为0.5-8g/L的茶褐素溶液后，取2-5 μ L茶褐素溶液在超微量紫外分光光度计的200-850nm波长下检测茶褐素的吸光度，茶褐素在此波长范围中出现特征吸收峰及确定的峰型。
【专利摘要】本发明公开了一种快速鉴定茶褐素的方法，包括如下步骤：1)定性检测：配制茶褐素溶液后，使用超微量紫外分光光度计检测茶褐素溶液的吸光度，得到茶褐素的特征峰型；2)定量检测：配制茶褐素溶液后，使用毛细管电泳仪检测茶褐素溶液在特定波长273nm下的吸收峰，并通过吸收峰峰面积或峰高计算茶褐素含量。本发明的一种快速鉴定茶褐素的方法具有的有益效果有：检测结果准确，检测时间短；受人为因素影响小，测定的批间差小；检测工作量小；检测步骤标准化。
【IPC分类】G01N21-33, G01N27-447
【公开号】CN104614335
【申请号】CN201510074729
【发明人】张进
【申请人】张进
【公开日】2015年5月13日
【申请日】2015年2月12日