一种当归饮片中阿魏酸含量的测定方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于中药材质量检测技术领域，尤其涉及一种当归饮片中阿魏酸含量的测 定方法。
【背景技术】
[0002] 中药材品质除了受到品种、产地、采收季节等因素的影响外，还与产地加工方法是 否适当有很大的关系。目前，我国中药材产地加工多是"分散加工"模式，由于生产加工技术 的差异和缺乏规范化生产，部分地区甚至采用硫磺熏蒸方法，导致加工出来的饮片品质参 差不齐，市场掺假也屡见不鲜，影响着中药临床疗效的发挥。同时，随着产区的药材基地化、 标准化种植规模不断扩大，产地原有生产加工方式、生产能力不足的缺陷日益明显，严重制 约着中药材产业化发展。近年来，随着现代制药技术水平的不断发展，以及产区开展中药材 生产加工技术创新研究，国内对中药材进行分门别类的产地加工可行性进行了大量的研究 报道，认为在种植基地进行集中产地加工，与中药规范化种植基地相结合，能更好的保证中 药材质量，有助于推动中药材生产的产业化健康稳定发展，进一步提升商品附加值，具有重 要的战略意义。
[0003] 当归为伞形科植物当归的干燥根，是重要的常用中药材，在我国有着悠久的药用 历史。其性温，味甘、辛；归心、肝、脾经。具有补血活血、调经止痛、促进血液循环、抗炎镇痛、 保肝利胆、润肠通便等功效。近年来，在继承传统的产地加工技术基础上，成功研制出"当归 片"生产技术，对当归产业的发展起到了积极的推动作用。然而，目前的中国药典治疗标准 中还没有科学系统的"当归片"质量的均一性、稳定性等指标达到标准制订的技术要求。
[0004] 阿魏酸的化学名称为4-羟基-3-甲氧基肉桂酸，是植物界普遍存在的一种酚酸，是 中药材当归的有效成分之一。它具有许多独特功能，如抗氧化、抗血栓、降血脂、防治冠心 病、抗菌消炎等，且毒性低，在医药、食品、化妆品等领域的用途越来越广泛。因而，"当归片" 中阿魏酸含量测定十分必要。目前，有关阿魏酸含量测定方法的报道较多，如专利CN 102106986 A、CN 104267110 A、CN 102998375 A、CN 101493445 A、CN 104655742 A等，尤 其是上述专利CN 104267110 A公开的一种当归药材的检测方法，披露了"包括以下步骤：1) 精密称取阿魏酸对照品l〇mg，置棕色量瓶中，加70 %甲醇溶解并稀释至50ml;精密量取3mL 溶液，加70 %甲醇定容至50mL，摇匀得每lmL含12yg阿魏酸的对照品溶液;2)精密称取待测 当归药材粉末〇. 2g，加入70 %甲醇20mL，称定重量，加热回流30分钟，放冷后再称定重量，并 用70%甲醇补足减失的重量，静置取上清液以微孔滤膜滤过，取续滤液，得供试品溶液;3) 照高效液相色谱法试验，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积比17: 83的乙腈-0.085 %磷酸溶液为流动相洗脱;检测波长为316nm;柱温35°C;分别精密吸取对照品溶液与 供试品溶液各l〇yL，注入液相色谱仪，测定"的方法。该方法通过高效液相色谱法检测阿魏 酸的含量，准确且简单易行，但由于"当归片"是趁鲜切厚片干燥所得产品，其与现有常规当 归生产加工方法不同，其用当归片制备的样品溶液中因含有的水分及成分较为复杂，采用 常规方法测定难免存在误差，而现有中国药典又没有"当归片"的测定标准，因此，提供一种 "当归片"的测定标准很有必要。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于:提供一种当归饮片中阿魏酸含量的测定方法，为我国中药材 加工"新产品" "当归片"提供测定标准及指数标准。
[0006] 为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
[0007] -种当归饮片中阿魏酸含量的测定方法，采用以下步骤予以实施：
[0008] 1)样品干燥:将秋末采挖的鲜当归除去须根和泥沙，蒸馏水冲洗干净;将其摊开铺 于木质板上，并用白纱布覆盖;将摊放有鲜当归的的木质板转移到干燥室内，调节室内温度 为35~50°C，空气相对湿度10~18%，间隔2~3小时向白纱布喷洒适量甲醇，持续干燥24~ 36小时取出；
[0009] 2)制备当归饮片:将干燥的当归切成圆形或不规则厚片，切片直径为0.3~4cm，厚 度为0.2~0.4cm，得到鲜当归饮片，再用白纱布覆盖，持续干燥24~48小时，检测水分含量 低于15%时，备用；
[0010] 3)制备样品粉末:将步骤2)制备的当归饮片研磨成粉，过50目筛，得样品粉末；
[0011] 4)供试样品溶液的制备:精密称取样品粉末0.2g，置于1 OOmL圆底烧瓶中，精密加 入碱水25mL，氮气保护下，控制温度为35~40°C，持续搅拌lh，过滤，收集滤液，滤液经冰盐 浴冷却，标记为Ml;滤饼再加上述碱水25mL，氮气保护下，控制温度为35~40°C，持续搅拌 lh，过滤，滤液经冰盐浴冷却，标记为M2;合并Ml和M2滤液，氮气保护下，常温搅拌混合均匀， 得滤液M3，将滤液M3水浴超声2~3分钟;精密量取滤液M325mL，滤液减压浓缩至原体积6 %， 加酸调节pH = 4,再加2倍量乙醚萃取两次，合并醚层，再用2倍量的3%碳酸钠萃取，碳酸钠 萃取物再用上述酸调节pH=4，收集不溶物，蒸干，残渣加70 %甲醇溶解，并转移至25mL容量 瓶中，加70%甲醇稀释至刻度，摇匀，静置，取上清液用0.45μπι微孔滤膜滤过，取续滤液，得 供试样品溶液；
[0012] 5)对照样品溶液的制备:精密称取阿魏酸对照品适量，置棕色量瓶中，加70%甲醇 制成每lml含阿魏酸12yg的溶液，摇匀，得对照样品溶液；
[0013] 6)测定:照高效液相色谱法试验，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积比为 17:83的乙腈-0.085 %磷酸溶液为流动相洗脱;检测波长为316nm;柱温35°C;分别精密吸取 对照品溶液与供试品溶液各l〇yL，注入液相色谱仪，测定。
[0014] 进一步，测定步骤6)中，理论板数按阿魏酸峰计算不低于5000。
[0015] 进一步，当归饮片中测定阿魏酸含量2 0.060 %。
[0016] 与现有技术相比，本发明的有益效果在于：
[0017] 1)本发明采用低温干燥鲜当归，并用该鲜当归制备饮片，最大限度保留了当归的 成分，提高当归片品质;采用白纱布覆盖当归，降低了当归表皮的失水速度，而当归内部成 分随水分而流动，进而保持当归各部位成分相对均衡，使制得的样品粉末检测结果相对稳 定。
[0018] 2)本发明将当归趁鲜切成饮片，再进行后续干燥，降低了当归中有效成分大面积 流动，避免了当归局部成分过高和过低的现象，提高测定准确度，为中国药典测定提供更准 确的数据。
[0019] 3)本发明制备样品试液时，在氮气保护下，先用碱水处理，将束缚在当归内部的阿 魏酸完全释放出来，提高测定准确度；同时冰盐浴进行冷却，这样就使得当归内部温度骤 变，使释放出的阿魏酸不能重新被束缚，进一步提高测定准确度。
[0020] 4)采用本发明测定方法测得当归饮片中阿魏酸平均含量达到0.120%，这与中国 药典中规定的0.050%相比，有明显提高。
【附图说明】
[0021] 图1是三批当归片样品的分散外观图。
[0022]图2是三批当归片样品的袋装外观图。
[0023]图3是当归片粉末主要显微特征图。
[0024]图4是当归片薄层色谱鉴别图。
[0025]图5是当归片薄层色谱鉴别图。
【具体实施方式】
[0026]下面结合具体实施例对本发明的技术方案作进一步说明，以便于同领域技术人员 的理解。
[0027] 1.当归片的性状检测
[0028] 1.1当归片基本信息
[0029] 1.1.1当归来源和生产信息
[0030]当归主产于甘肃，四川、云南、陕西和青海等省区亦有少量，本实施例收集甘肃产 地的药材样品进行生产或试验，记录相关信息，见表1。
[0031 ]表1-当归药材、当归片产地来源和生产信息 [0032]
[0033] 党参片质