不同生长调节剂对北美冬青保花保果效应的研究方法
【专利说明】不同生长调节剂对北美冬青保花保果效应的研究方法 【技术领域】
[0001] 本发明涉及北美冬青保花保果的技术领域，特别涉及一种不同生长调节剂对北美 冬青保花保果效应的研究方法。 【【背景技术】】
[0002] 北美冬青（Ilex verticillata)属冬青科冬青属多年生落叶灌木，原产美国东北 部，多生长在沼泽、潮湿灌木区和池塘边。与冬青科大多常绿树种不同，其特点是冬季落叶。 在欧美北美冬青作为切枝观果、景观美化等广泛栽培应用。国内每年从荷兰等国家大量进 口北美冬青成品切枝，投放花卉市场，销售价格昂贵。自2006年我国引进北美冬青观赏品种 以来，我国开展了北美冬青繁育与开发利用研究。但我国对北美冬青的研究主要局限于北 美冬青的园艺性状观察、栽培技术、组织培养、扦插繁殖、容器育苗等方面研究。随着北美冬 青栽培面积的扩大，北美冬青大量落花落果现象时有发生，这也是北美冬青发展的主要制 约因素之一。
[0003] 由于树体营养不足，花器官发育不全，种间的亲和差异，恶劣天气条件，管理水平 低下等原因会造成果树的落花落果，轻则减产降质，重则绝产绝收。因此，深入研究果树的 落花落果机理，查明落花落果原因，并采取积极的保花保果措施是目前果树生产中亟待解 决的问题。
[0004] 作为植物体内重要的代谢生理，光合作用为植物生长发育提供重要的物质和能 量，是决定产量和品质的重要因素。研究表明，植物当遭受到环境胁迫时，植株细胞损伤，导 致细胞膜结构紊乱，组织死亡，叶绿体结构受到破坏，叶绿素含量降低，引起光合作用的改 变，导致光合速率明显下降，光合电子传递活力减弱，光合磷酸化作用受到抑制。关于生长 调节剂对北美冬青光合作用的影响，尤其是对北美冬青叶绿素荧光动力学特性的影响研究 尚未见报道，因此，有必要提出一种不同生长调节剂对北美冬青保花保果效应的研究方法， 从光合色素含量、光合作用参数以及叶绿素荧光动力学特征入手，从不同层次探讨不同生 长调节剂对北美冬青光合作用和叶绿素荧光特性的影响，旨在揭示不同生长调节剂与光合 作用及相关指标之间的关系，并探讨其落花落果的原因，以期为北美冬青高效培育提供理 论依据和参考指标。 【
【发明内容】
】
[0005] 本发明的目的在于克服上述现有技术的不足，提供一种不同生长调节剂对北美冬 青保花保果效应的研究方法，其旨在解决现有技术中北美冬青保花保果效果较低，生长调 节剂对北美冬青光合作用的影响研究较少的技术问题。
[0006] 为实现上述目的，本发明提出了一种不同生长调节剂对北美冬青保花保果效应的 研究方法，包括如下步骤：
[0007] 步骤一、设定处理：
[0008] 选取生长势一致、生长良好的北美冬青2年生盆栽苗30株，在实验基地中，分别于 花蕾期、盛花期和果熟期对北美冬青进行保花保果剂处理，共设三个处理期，包括对照在内 共设以下五种处理，具体处理方式见表1:
[0009] 表1五种处理的具体处理方式
[0010]
[0011] 处理方法：
[0012] 北美冬青2年生盆栽苗30株均分为5组，每组6株，每组对应一种处理方式，每种处 理方式针对每个处理期有不同的处理，具体处理见表1;
[0013] 步骤二、测定：
[0014] 对经过步骤一处理后的30株北美冬青盆栽苗进行各项指标的测定，包括光合作用 气体交换参数的测定、光响应曲线的测定和叶绿素荧光动力学参数的测定。
[0015]测定方法：
[0016]光合作用气体交换参数测定：使用开放气路，在晴天上午9:30-11:30，采用1^1-6400便携式光合仪测定净光合速率(Ρη，μπιο1⑶2 · m-2 · s-气孔导度(Gs，mmol · m-2 · s 4)，胞间⑶2浓度(Ci，ymol · ι?οΓ1)，气孔限制值(Ls)根据Berry公式进行计算。测定时选择 红蓝光源叶室，使用开放式气路，叶室温度设定为25°C，空气相对湿度为60~70%，0)2浓度 为400ymol/mol，光照强度为ΙΟΟΟμηιοΙ · nf2 · s^1，光量子通量密度800mol · nf2 · s^1。每株测 1片叶，每处理重复5次，取平均值，并标记叶片以便下一次测定；
[0017] 光响应曲线测定:使用Li-6400便携式光合(美国Li-cor公司），光源为18RGB人工 光源，设置光合有效辐射强度(PAR)梯度为2000、1500、1000、500、300、100、50、20、10、0μ mol · πΓ2 · 定所标记叶片的光响应曲线，叶片选择植株中上部成熟叶片。测定时，光强 采用外界的实际光强(根据外源光温传感器显示的光照强度），叶室温度控制在25°C，0)2浓 度400μπιο1 · mol-1，由C〇2小钢瓶控制C〇2浓度，相对湿度约50%，气体流速设置为400μπιο1 · ?Γ1，测定前用SOOymol · πΓ2 · ?Γ1光强对叶片进行光诱导，使叶片活化。每个光强下稳定 4mins记录数据，重复3~4次，取几次重复的平均值作为测定结果。根据光合助手计算出光 响应曲线饱和光强(LSP)、最大净光合速率(Pmax)、光补偿点(LCP)和暗呼吸速率(Rd);
[0018]叶绿素荧光动力学参数测定:各荧光参数采用PAM2500荧光仪测定。荧光测定采用 荧光叶室，黑暗适应一晚，光化学活性光ΡΠ)为1400μπιο1 · nf2 · s'光照时间30min，饱和闪 光ΡΠ)为7200μπιο1 · πΓ2 · S4。测定前，均进行25mins以上的暗适应。首先测定最小荧光产量 (F〇)和最大荧光产量(F m)，随后打开活化光，强度为800μπι〇1 ·πΓ2 · ?Γ1，待荧光信号到达稳 定后(5~6mins)打开饱和脉冲光，测定任意时间的实际焚光产量(F)和光适应下的最大焚 光产量(F/);然后测定快速光曲线，共11个光强梯度，每个光强照射20s后打开饱和脉冲光 进行荧光淬灭分析，记录快速光响应曲线。初始荧光产量(Fo )，最大荧光产量(Fm)，PS Π最 大光化学量子产量(Fv/Fm)，PSn有效光化学量子产量$\作'111)，光化学淬灭^?)，非光化 学淬灭(qN)，PSII实际光化学量子产量(Y(II))，PSII电子传递速率(ETR)均由仪器自动给 出；
[0019] 步骤三、数据分析：
[0020] 采用SPSS软件进行统计分析，用光合助手（Photosynthesis)拟合曲线，采用 Sigmap 1 〇110.0作图，对测定的数据进行整理并分析。
[0021] 作为优选，所述的步骤二的光合作用气体交换参数测定中Berry公式为Ls = l_Ci/ C0，式中C0为空气中C02浓度。
[0022]作为优选，所述的步骤二的叶绿素荧光动力学参数测定中11个光强梯度，分别为 788、622、477、366、274、201、144、104、67、9、5ymol · m-2s-、
[0023] 本发明的有益效果：与现有技术相比，本发明提供的一种不同生长调节剂对北美 冬青保花保果效应的研究方法，能够科学合理地量化不同生长调节剂对北美冬青保花保果 效应，通过本方法用不同生长调节剂处理对北美冬青进行保花保果试验，得到北美冬青的 净光合速率均随着不同的生长调节剂处理而不同的结论，并得出在北美冬青花蕾期喷施 0·5%ΚΗ2Ρ03和0.1%尿素，盛花期喷施25mg · 和0.3%硼砂或20~50mg · l-k-BA，果 熟期喷施25mg · rkA3和或2mg · PCPPU能显著提高北美冬青单株结果数，GA3和6-BA或 CPPU组合喷施处理北美冬青，可提高北美冬青的光合速率、气孔导度、水份利用率等气体交 换参数和psn有效光化学量子产量、光化学淬灭、PSII实际光化学量子产量、电子传递速率 等叶绿素荧光参数，从而有效提高北美冬青的保果率，对提高北美冬青座果率和幼果保果 率非植物生长调节剂的研制提供了理论依据。
[0024] 本发明的特征及优点将通过实施例结合附图进行详细说明。 【【附图说明】】
[0025]图1是本发明不同生长调节剂处理对北美冬青叶片Pn的影响图；
[0026] 图2是本发明不同生长调节剂处理对北美冬青叶片WUE的影响图；
[0027] 图3是本发明不同生长调节剂处理对北美冬青叶片Gs的影响图；
[0028] 图4是本发明不同生长调节剂处理对北美冬青叶片Ci的影响图；
[0029]图5是本发明不同生长调节剂处理对北美冬青叶片qP的影响图；
[0030]图6是本发明不同生长调节剂处理对北美冬青叶片NPQ的影响图；
[0031]图7是本发明不同生长调节剂处理对北美冬青叶片Y(II)的影响图；
[0032]图8是本发明不同生长调节剂处理对北美冬青叶片rETR的影响图。 【【具体实施方式】】
[0033]为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚明了，下面通过附图中及实施例，对 本发明进行进一