快速检测中毒病人血液中的毒鼠强的方法
【专利摘要】本发明公开了一种快速检测中毒病人血液中的毒鼠强的方法，旨在提供一种灵敏度好，检测效率高的毒鼠强的检测方法；其技术方案为：1)标准溶液的制备；2)供试样品的制备取血液5ml置15ml离心管中，加入5ml乙腈，漩涡震荡2min；3200r/min离心5min，取上清液上气质联用仪测定；属于化学检测技术领域。
【专利说明】
快速检测中毒病人血液中的毒鼠强的方法
技术领域
[0001] 本发明公开了一种毒鼠强的检测方法，具体地说，是一种快速检测中毒病人血液 中的毒鼠强的方法，属于化学检测技术领域。
【背景技术】
[0002] 毒鼠强(tetramine)，化学名为四亚甲基二砜四胺，为剧毒速效的灭鼠药，无色、无 味。它对所有温血动物都有剧毒，中国农业部、卫生部曾于1982年联合发文严禁使用这些化 合物作为灭鼠药，但仍有人使用而造成中毒事件。为给中毒病人的诊断治疗提供及时可靠 的依据，有必要建立一种操作简易快速、定性准确、灵敏度高的检测方法。毒鼠强气质联用 法作为唯一确证方法，没有统一国家标准，传统前处理过程复杂繁琐，耗时过长，通常需要 几个小时，难以适应突发公共卫生事件的快速毒检要求。而且往往会在分析复杂基质如:人 的血液等时，由于净化不够，杂质带入系统，使仪器耗损严重，甚至引起结论判断错误。
【发明内容】
[0003] 针对上述问题，本发明的目的在于提供一种中毒病人血液中的毒鼠强的方法，该 方法灵敏度好，检测效率高。
[0004] 为解决上述问题，本发明提供的技术方案是这样的：
[0005] -种快速检测中毒病人血液中的毒鼠强的方法，依次包括下述步骤：
[0006] 1)标准溶液的制备
[0007] 准确称取毒鼠强标准品5 . Omg，置于100ml容量瓶中，用乙腈溶解并定容，配成50y g/ml对照溶液；
[0008] 2)供试样品的制备
[0009] 取血液5ml置15ml离心管中，加入5ml乙腈，漩祸震荡2min;3200r/min离心5min，取 上清液上气质联用仪测定；
[0010]所述的色谱条件如下：
[0011 ] 色谱柱:HP-5MS，20m X 0.18mm，膜厚0.18WI1;载气为高纯氦气；进样量:30yl;在PTV 进样期间，分流排空阀控制在80ml/min的流量，进样完成后，分流排空阀关闭1. Omin;
[0012]所述的质谱条件如下：
[0013] 电子轰击离子源，电子能量70eV;扫描特征离子:m/z92、m/z 132、m/z 212、m/z 240; GC/MS接口温度:280 °C ;离子源温度:230 °C ;四级杆温度：150 °C。
[0014] 所述的PTV温度程序如下：40°C维持l.Omin，以230°C/min速率升至230°C维持 2min，以230°C/min速率升至300 °C维持7min;柱流速：以恒流模式0.5ml/min;柱温箱:90°C 21^11，以100°(：/111111速率升至150°(：，以50°(：/111111速率升至280°(：维持4111111。
[0015] 进一步，上述的快速检测中毒病人血液中的毒鼠强的方法，所述的气质联用仪采 用安捷伦7890A-5975C气质联用仪。
[0016] 与现有技术相比，本申请提供的技术方案结合大体积进样、PTV进样，通过sim模式 进行毒鼠强检测确证。从样品前处理到确证完成全过程耗时约20min。该方法具操作简易快 速、定性准确、灵敏度高等特点，能应用于应急检验，为病人抢救工作节省了宝贵的时间，降 低了成本。
【附图说明】
[0017]图1是S頂模式采集毒鼠强的质谱图；
[0018]图2是液液萃取法结合大口径色谱柱的毒鼠强标准溶液图谱；
[0019] 图3是液液萃取法结合大口径色谱柱的血液提取液图谱；
【具体实施方式】
[0020] 下面结合【具体实施方式】，对本发明的权利要求做进一步的详细说明，但不构成对 本发明的任何限制，任何人在本发明权利要求保护范围内所做的有限次的修改，仍在本发 明的权利要求保护范围之内。
[0021] 本发明所涉及到的百分浓度，没有特别说明的，液体均为体积浓度，溶质为固体的 指质量浓度。
[0022] 实施例1
[0023] 1.材料与方法
[0024] 1.1仪器与试剂
[0025] 安捷伦7890A-5975C气质联用仪，配有CTC多功能进样器、PTV进样口；超纯水器 (ELGAPURELAB ClassicUVF);超声波清洗器;高速离心机;C18固相萃取小柱(天津博纳艾杰 尔科技有限公司）
[0026]乙腈(HPLC级，美国Fisher公司），其它试剂均为分析纯（国药集团化学试剂有限公 司）。实验用水为经ELGAPURELAB ClassicUVF净化系统过滤的去离子水;毒鼠强标准品购自 国家标准物质中心。
[0027] 1.2色谱条件
[0028] 色谱柱:HP-5MS(20m X 0.18_膜厚0.18WH);载气为高纯氦气;进样量:30yl;在PTV 进样期间（〇 . 8min)，分流排空阀控制在80ml/min的流量，进样完成后，分流排空阀关闭 (1.0min);PTV温度程序如下：40°C维持l.Omin，以230°C/min速率升至230°C维持2min，以 230°C/min速率升至300°C维持7min。柱流速：以恒流模式0.5ml/min。柱温箱:90°C(2min)， 以100 °C/min速率升至150 °C，以50 °C/min速率升至280 °C维持4min。
[0029] 采用PTV进样口的溶剂吹扫功能与HP-5MS(20m X 0.18mm膜厚0.18wn)，可在保证灵 敏度的基础上，加快出峰时间，从而减少分析时间。
[0030] 相对于普通进样器与普通的气相分流不分流进样口，一般有效进样量为liil;但本 申请采用了大体积进样(50u 1)与PTV进样模式，为达到提取后不需对提取液进行浓缩，即可 上样，并在进样口端实现溶剂吹扫，使目标物聚焦后进入色谱柱，大大节省了前处理的时 间。
[0031] 2.3质谱条件
[0032] 电子轰击(EI)离子源，电子能量70eV;扫描特征离子:m/z92、m/z 132、m/z 212、m/ z 240(质谱图见图1);GC/MS接口温度:280°C ;离子源温度:230°C ;四级杆温度：150°C。
[0033] 2.4标准溶液的制备
[0034]准确称取毒鼠强标准品5.Omg，置于100ml容量瓶中，用乙腈溶解并定容，配成50y g/ml对照溶液。
[0035] 2.5供试样品的制备
[0036] 取血液5ml置15ml离心管中，加入5ml乙腈，漩祸震荡2min;3200r/min离心5min，取 上清液上气质联用仪测定。
[0037] 3 结果
[0038]将毒鼠强加入空白血液样品中，采用"2.5"节方法进行处理，测定毒鼠强在血液中 的回收率，每种添加量水平测定3次，取平均值作为实际检出，结果见表1。
[0039] 结果表明血液回收率为80%~93%，方法准确率高。
【主权项】
1. 一种快速检测中毒病人血液中的毒鼠强的方法，其特征在于，依次包括下述步骤： 1) 标准溶液的制备 准确称取毒鼠强标准品5.Omg，置于100mL容量瓶中，用乙腈溶解并定容，配成50μg/ml 对照溶液； 2) 供试样品的制备 取血液5ml置15ml离心管中，加入5ml乙腈，漩祸震荡2min;3200r/min离心5min，取上清 液上气质联用仪测定； 所述的色谱条件如下： 色谱柱:HP-5MS，20m X 0.18mm，膜厚0.18μπι;载气为高纯氦气;进样量:30μ1;在PTV进样 期间，分流排空阀控制在80ml/min的流量，进样完成后，分流排空阀关闭1.0 min; 所述的质谱条件如下： 电子轰击离子源，电子能量70eV;扫描特征离子:m/z92、m/z 132、m/z 212、m/z 240; GC/MS接口温度:280°C ;离子源温度:230°C ;四级杆温度：150°C。 所述的PTV温度程序如下：40°C维持l.Omin，以230°C/min速率升至230°C维持2min，以 230°C/min速率升至300 °C维持7min;柱流速：以恒流模式0.5ml/min;柱温箱:90°C 2min，以 100°C/min速率升至150°C，以50°C/min速率升至280°C维持4min。2. 根据权利要求1所述的快速检测中毒病人血液中的毒鼠强的方法，其特征在于，所述 的气质联用仪采用安捷伦7890A-5975C气质联用仪。
【文档编号】G01N30/06GK105929042SQ201610235342
【公开日】2016年9月7日
【申请日】2016年4月15日
【发明人】陈学松, 罗达龙, 刘慧妍
【申请人】广西壮族自治区梧州食品药品检验所