一种测定龟苓膏中绿原酸的方法
【专利摘要】本发明公开了一种测定龟苓膏中绿原酸的方法，旨在提供一种检测方法简单，检测准确率高，测试结果重复性好的检测方法，其技术要点依次包括下述步骤：1)对照品溶液的制备；2)校准曲线的绘制；3)取膏体搅拌成浆，准确称取50g，加二甲基亚砜定容于100mL容量瓶中，超声提取20min，放冷，补二甲基亚砜至刻度，摇匀，放置，经0.45um滤膜过滤，得试样溶液,注样入高效液相色谱仪，测定其峰面积，由校准曲线计算出被测溶液中绿原酸含量；属于化学检测技术领域。
【专利说明】
一种测定龟苓膏中绿原酸的方法
技术领域
[0001] 本发明涉及一种绿原酸的测定方法，具体地说，是一种测定龟苓膏中绿原酸的方 法，属于化学检测技术领域。
【背景技术】
[0002] 龟苓膏是岭南的传统保健食品，以清热解毒，养颜美容而著称，干百年来极受两 广、台港澳及东南亚人民的喜爱。近年来更是风靡全国。广西梧州是龟苓膏的正宗产地，已 向国家申请地理标志产品。绿原酸是龟苓膏中的主要药材之一金银花的特征成分。绿原酸 化学名称:3-咖啡酰奎尼酸。绿原酸具有抗菌、消炎、解毒、利胆、降压和升高白细胞及显著 增加胃肠蠕动和促进胃液分泌等药理作用，对大肠杆菌、金色葡萄球菌、肺炎球菌和病毒有 较强的抑制作用;对急性咽喉炎症和皮肤病有明显疗效。绿原酸的主要生物活性有（1)对透 明质酸酶及葡萄糖一6-磷酸酶的抑制作用；（2)对自由基的清除及抗脂质过氧化作用；（3) 抗诱变作用；（4)保肝利胆作用；（5)抗菌、抗病毒及解痉等作用。
[0003]因此，测定龟苓膏中绿原酸的含量，对监控龟苓膏的产品质量，具有现实意义。
【发明内容】
[0004] 针对上述问题，本发明提供的目的是提供一种检测方法简单，检测准确率高，测试 结果重复性好的测定龟苓膏中绿原酸的方法。
[0005] 为解决上述技术问题，本发明提供的技术方案是这样的：
[0006] -种测定龟苓膏中绿原酸的方法，依次包括下述步骤：
[0007] 1)对照品溶液的制备
[0008] 准确称取绿原酸对照品，置于棕色量瓶中，加乙醇制成溶液，即得；
[0009] 2)校准曲线的绘制
[0010] 取浓度为13 ? 04ug/mL的绿原酸乙醇溶液5 ? 0、10 ? 0、15 ? 0、20 ? 0、25 ? OuL，注入高效 液相色谱仪，测定其峰面积，以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标绘制校准曲线，求出回归方 程；
[0011] 3)试样溶液的制备
[0012] 取膏体搅拌成浆，准确称取50g，加二甲基亚砜定容于100mL容量瓶中，超声提取 20min，放冷，补二甲基亚砜至刻度，摇匀，放置，经0.45um滤膜过滤，得试样溶液，注样入高 效液相色谱仪，测定其峰面积，由校准曲线计算出被测溶液中绿原酸含量。
[0013] 进一步的，上述的测定龟苓膏中绿原酸的方法，所述的高效液相色谱法的参数如 下：色谱柱：11161^8；[1003-3?液相色谱柱，5讓4.6\250_、柱温：室温、流速:21111/111；[11、流动 相：乙腈-水，测波长:315nm。
[0014]进一步的，上述的测定龟苓膏中绿原酸的方法，所述的乙腈和水的体积比为44: 56 〇
[0015]与现有技术相比，本发明提供的检测方法简单，检测准确率高，测试结果重复性 好。
【附图说明】
[0016] 图1是本发明提供的原酸标准色谱图。
【具体实施方式】
[0017] 下面结合【具体实施方式】，对本发明的权利要求做进一步的详细说明，但不构成对 本发明的任何限制，任何在本发明权利要求保护范围内所做的有限次的修改，仍在本发明 的权利要求保护范围之内。
[0018] 实施例1
[0019] 1)对照品溶液的制备
[0020] 准确称取绿原酸对照品，置于棕色量瓶中，加乙醇制成溶液，即得；
[0021] 2)校准曲线的绘制
[0022] 取浓度为13.04ug/mL的绿原酸乙醇溶液5.0、10.0、15.0、20.0、25. OuL，注入高效 液相色谱仪，测定其峰面积，以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标绘制校准曲线，求出回归方 程，得回归方程y=0.0346x+0.000，线性相关系数0.9998。
[0023] 3)试样溶液的制备
[0024]取膏体搅拌成浆，准确称取50g，加二甲基亚砜定容于100mL容量瓶中，超声提取 20min，放冷，补二甲基亚砜至刻度，摇匀，放置，经0.45um滤膜过滤，得试样溶液，注样入高 效液相色谱仪，测定其峰面积，由校准曲线计算出被测溶液中绿原酸含量。
[0025] 所述的高效液相色谱法的参数如下：色谱柱：Inertsi 10DS-SP液相色谱柱，5wn4.6 X 250mm、柱温:室温、流速:2mL/min、流动相：乙腈-水，测波长:315nm;理论板数按绿原酸峰 计算应不低于2000。
[0026]随机抽取龟苓膏样品10份，制成式样溶液，取20ul注入高效液相色谱仪，测定其峰 面积，由校准曲线计算出被测溶液中绿原酸含量。
[0028]根据校准曲线测定，本实验方法的绿原酸含量在0.05-0.34ug之间有良好的线性 关系，检出线为0. lmg. kg_i，平均RSD%为0.28%。
【主权项】
1. 一种测定龟苓膏中绿原酸的方法，其特征在于，依次包括下述步骤： 1) 对照品洛液的制备 准确称取绿原酸对照品，置于棕色量瓶中，加乙醇制成溶液，即得； 2) 校准曲线的绘制 取浓度为13.04ug/mL的绿原酸乙醇溶液5.0、10.0、15.0、20.0、25. OuL，注入高效液相 色谱仪，测定其峰面积，以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标绘制校准曲线，求出回归方程； 3) 试样溶液的制备 取膏体搅拌成浆，准确称取50g，加二甲基亚砜定容于IOOmL容量瓶中，超声提取20min， 放冷，补二甲基亚砜至刻度，摇匀，放置，经〇.45um滤膜过滤，得试样溶液，注样入高效液相 色谱仪，测定其峰面积，由校准曲线计算出被测溶液中绿原酸含量。2. 根据权利要求1所述的测定龟苓膏中绿原酸的方法，其特征在于，所述的高效液相色 谱法的参数如下：色谱柱：Inertsi IODS-SP液相色谱柱，5μπι4 · 6 X 250mm、柱温：室温、流速： 2mL/min、流动相：乙腈-水，、检测波长:315nm。3. 根据权利要求2所述的测定龟苓膏中绿原酸的方法，其特征在于，所述的乙腈和水的 体积比为44:56。
【文档编号】G01N30/02GK105929035SQ201610231759
【公开日】2016年9月7日
【申请日】2016年4月14日
【发明人】吴婕, 朱海军, 杨柳, 李倩雯, 岑昕霖, 陈东红, 黄敏, 谭略
【申请人】梧州市产品质量检验所