一种利于提高乳酸菌产量的新型培养基的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉生物培养基技术领域，具体是指一种利于提高乳酸菌产量的新型培养 基。
【背景技术】
[0002] 乳酸菌是人和动物肠道的重要生理性有益菌，已见报道的乳酸菌的生理功能包 括：调整肠道菌群，防止便秘，降低结肠癌的发病率，产生抗菌素，增强免疫系统，提高蛋白 质和维生素代谢，缓解乳糖不耐症，治疗肝损伤，抗肿瘤，降低胆固醇等。随着乳酸菌有益研 究有益健康研究结果的不断积累以及现代人对健康饮食要求的不断提高，国内外正在掀起 研制开发含乳酸菌食品、保健品、药品的热潮。
[0003] 乳酸菌属专性厌氧菌，对氧非常敏感，对低PH的抵抗力差，对营养要求苛刻，活性 保持比较困难，另外乳酸菌制品到消费者饮用时活菌数必须大于l〇6CFU/ml才能发挥保健 功能，因此在研制开发中，如何在短的培养时间内提高活菌数目，是培养基的关键技术。而 现有的乳酸菌培养基的培养方法在原有工艺基础上有一定发展，但是很难形成大规模生 产。
[0004] 基于此，研究并开发设计了一种利于提高乳酸菌产量的新型培养基。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于：提供一种利于提高乳酸菌产量的新型培养基。该新型培养基 为一种乳酸菌，能有效解决该乳酸菌培养基制备繁琐，活菌数低的问题，该新型培养基在提 尚活菌数的同时，可实现稳定生广，提尚广量。
[0006] 本发明的技术方案，一种利于提高乳酸菌产量的新型培养基，由下述成分组成： ZnSO4 · 7H20, MgSO4 · 7H20,蛋白胨，牛肉膏，胰蛋白胨，酵母浸出粉，葡萄糖，吐温-80, K2HPO4, 乙酸钠，柠檬酸氢二铵，低聚果糖，CaC03。
[0007] 进一步地，为了更好的实现本发明，新型培养基优选由以下组分和含量组成， ZnSO4 · 7H20 0· 30 - 0· 40g/l，MgSO4 · 7H20 0· 10 - 0· 18g/l，蛋白胨 5. 0 - 5. 5g/l，牛肉膏 5. 0- 6. Og/Ι，胰蛋白胨 10. 0- IL Og/Ι，酵母浸出粉 5. 0- 6. Og/Ι，葡萄糖 10. 0- 12. Og/ 1，吐温-801. 0 - I. 5ml/l，K2HPO4L 5 - 2. 5g/l，乙酸钠 4. 5 - 5. 5g/l，柠檬酸氢二铵 L 5- 2. 5g/l，0. 5%低聚果糖，1% CaC03。
[0008] 进一步地，为了更好的实现本发明，新型培养基由以下成分和含量组成： ZnSO4 · 7H20 0· 30 - 0· 45g/l，MgSO4 · 7H20 0· 15 - 0· 18g/l，蛋白胨 5. 0 - 5. 3g/l，牛肉膏 5. 0- 5. 5g/l，胰蛋白胨 10. 0-10. 5g/l，酵母浸出粉 5. 0- 5. 5g/l，葡萄糖 10. 0- 11. Og/ 1，吐温-801. 0 - I. 3ml/l，K2HPO4L 5 - 2. Og/Ι，乙酸钠 4. 5 - 5. Og/Ι，柠檬酸氢二铵 L 5- 2.(^/1，0.5%低聚果糖，1%0&0)3。
[0009] 进一步地，为了更好的实现本发明，所述培养基由以下成分和含量组成： ZnSO4 · 7H20 0· 30g/l，MgSO4 · 7H20 0· 10g/l，蛋白胨 5. Og/Ι，牛肉膏 5. Og/Ι，胰蛋白胨 10.0g/l，酵母浸出粉 5.0g/l，葡萄糖 10.0g/l，吐温-801.0ml/l，K2HP041.5g/l，乙酸钠 4. 5g/l，柠檬酸氢二铵 I. 5g/l，0. 5%低聚果糖，1% CaC03。
[0010] 进一步地，为了更好的实现本发明，所述培养基由以下成分和含量组成： ZnSO4 ·7Η20 0· 40g/l，MgS04 ·7Η200· 18g/l，蛋白胨 5. 5g/l，牛肉膏 6. Og/Ι，胰蛋白胨 11. Og/ 1，酵母浸出粉 6. Og/1，葡萄糖 12. Og/1，吐温-801. 5ml/l，Κ2ΗΡ042· 5g/l，乙酸钠 5. 5g/l，柠 檬酸氢二铵2.58/1，0.5%低聚果糖，1%0&0)3。
[0011] 进一步地，为了更好的实现本发明，所述培养基由以下成分和含量组成： ZnSO4 · 7H20 0· 35g/l，MgSO4 · 7H20 0· 15g/l，蛋白胨 5. 3g/l，牛肉膏 5. 5g/l，胰蛋白胨 10. 5g/l，酵母浸出粉 5. 5g/l，葡萄糖 10. 5g/l，吐温-801.3ml/l，K2HP042. 05g/l，乙酸钠 5. 〇g/l，柠檬酸氢二铵 2. 0g/l，0. 5%低聚果糖，1% CaC03。
[0012] 进一步地，为了更好的实现本发明，所述培养基中ZnS04 · 7H20、MgS04 · 7H20含量 比例为7 :3。
[0013] 本发明与现有技术相比，具有以下优点及有益效果：
[0014] 1)本发明所采用的新型培养基的成分及成分含量，在新型培养基培养过程中，可 有效减少投入和生产成本，因此，新型培养基对于开发利用新型的乳酸菌有重要的实践价 值。
[0015] 2)本发明通过组分和组分含量筛选优化培养基可实现培养基中乳酸菌高密度培 养，在提高新型培养基乳酸菌密度的同时，可减少培养基的消耗和提高下游工程中分离提 取效率，并且缩短生产周期。
[0016] 3)本发明通所述的新型培养基为一种提高乳酸菌产量的培养基，能有效解决该乳 酸菌培养基制备繁琐，活菌数低等问题，该新型培养基在提高活菌数的同时，可实现稳定生 广，提尚广量。
【具体实施方式】
[0017] 下面结合实施例对本发明作进一步地详细说明，但本发明的实施方式不限于此。
[0018] 实施例1 :
[0019] 1材料和方法
[0020] I. 1 材料
[0021] 菌种KLDS2. 000乳酸菌由某大学乳品科学教育部重点实验室引进。
[0022] 培养基培养基 IZnSO4 · 7H20 0· 30 - 0· 40g，MgSO4 · 7H20 0· 10 - 0· 18g，蛋白胨 5. 0-5. 5g，牛肉膏5. 0-6. 0g，胰蛋白胨10. 0-11. 0g，酵母浸出粉5. 0-6. 0g，葡萄糖 10. 0 -12. 0g，吐温-801. 0 - I. 5ml，K2HPO4L 5 - 2. 5g，乙酸钠 4. 5 - 5. 5g，柠檬酸氢二铵 L 5 - 2. 5g，0· 5%低聚果糖，1% CaCO3加蒸馏水至1000ml。
[0023] 培养基2大豆胰蛋白胨16. 7g，酪蛋白胨8. 3g，乳糖10g，酵母浸出粉5g，加蒸馏水 至 1000 ml0
[0024] 培养基3酪蛋白胨10g，酵母浸出粉2. 5g，葡萄糖5g，大豆蛋白胨5g，吐 温-801.0ml，L-半胱氨酸盐酸盐0. 5g，混合盐溶液5ml，蒸馏水995ml，混合盐溶液： K2HPO20.0 g，MgCL2 · 6H20 5. 0g，ZnSO4 · 7Η202· 5g，CaCl2 I. 5g，Fe Cl2O. 5g，加蒸馏水至 100mLo
[0025] 脱脂牛乳培养基以脱脂牛乳粉制复原乳，全乳固体含量为12. 5%，PH自然。
[0026] L 2仪器与设备
[0027] 高压蒸汽消毒器，DELTA320计，梅特勒-托利多仪器有限公司；UV-120-02型分光 光度计，YQX-ii型厌氧培养箱。
[0028] 1. 3 方法
[0029] 菌种活化：选用培养基3活化保藏菌种，37摄氏度厌氧培养，按5%接种量接种，所 有实验菌种使用前均进行2次活化，第一次活化培养48h，第二次活化培养24h。
[0030] 活菌数的测定：采用稀释涂布法，菌液以10倍梯度稀释，选取10 6, 10 7稀释梯度， 用涂布棒涂布域培养基3上，厌氧培养48h后计算菌落数目。平板培养计数法按国际GB/ T4789. 2-2003 进行。
[0031] 菌落PH测定：用梅特勒-托利多DELTA320ph计，在室温下测定培养一定时间菌液 的PH。
[0032] 培养基比较实验：将第二次活化菌种按5%接种量，分别接入培养基1、培养基2、 培养