2-甲基-3(2H)-异嚷挫嘟酬(MI)浓度为0.5、2.5、5.0、25.0、50.化g/mL，5-氯-2-甲基-2H-异嚷挫-3-酬（CMI)浓度为1.0、5.0、10.0、50.0、100.0i^g/mL，l，2-苯并异嚷挫 基-3 (2H)-酬(B口)浓度为0.5、2.5、5.0、25.0、50.0 iig/mL，2，6-二叔下基-4-甲基苯酪(册T) 浓度为0.5、1.0、5.0、10.0、20.0 iig/mL的系列混合标准工作溶液。
[0030] (2)样品处理：准确称取0.3g样品（精确至O.lmg)后，置于50mL具塞S角瓶中，用 SmL超纯水分散后再加入20mL甲醇，盖紧瓶塞，在室溫条件下，满旋振荡萃取IOmin;之后W 500化/min离屯、5min，取上层清液，过膜(孔径0.22皿），备用。
[0031 ] (3)色谱分析：所述的色谱分析条件为色谱柱采用Agilent ZORBAX SB-C18 (4.6mm*250mm，扣m)，色谱柱溫度为30°C，进样量为20化，二极管阵列检测器检测波长 220nm;流动相:A为乙腊，B为超纯水，采用梯度洗脱程序见表1，总洗脱时间为20分钟。标准 工作溶液的色谱分析结果如图1所示;典型样品溶液的色谱分析结果如图2所示。
[0032] (4)样品中MI、CMI、B 口和BHT残留量的计算:首先将标准物质配制成一定浓度的标 准溶液，进行高效液相色谱分析测定。WMI、CMI、BIT和BHT标准溶液的峰面积(Y)与各自标 准溶液的质量浓度(X)绘制其标准溶液工作曲线如图3、图4、图5和图6所示，并进行线性回 归分析，得到MI、CMI、B口和册T的线性回归方程分别为y= 18.78X-4.74、y = 40.42X-23.21、 y = 99. llx-40.87和y = 26.16X-2.96,相关系数r2均大于0.999。然后将样品溶液检出的目 标
[0033] 物峰面积代入线性回归方程，即得到样品溶液中MI、CMI、BIT和BHT的质量
[0034] 浓度为C。
水基胶样品中MI、CMI、B 口和BHT的残留量计算如下：
[0036] 式中；
[0037] C为样品溶液中MI、CMI、B口和BHT的质量浓度，单位为微克每毫升(iig/mL);
[0038] V为样品处理后的体积，单位为毫升(mU ;
[0039] m为称取样品的质量，单位为克(g);
[0040] W为目标物的残留量，单位为微克每克(iig/g)。
[0041] 由附图2可知，所采用的色谱条件使MI、CMI、BIT和BHT的色谱峰与杂质色谱峰分离 较好，并且具有较好的相关性，其检测限分别为0.065、0.121、0.046、0.05化肖/1111^。本实施例 样品中MI、CMI、B口和BHT残留量测试结果见表2。
[0042] 表2样品测定结果(单位:yg/g)
[0043]
[0044] 注:ND表示未检出。
[004引实施例2
[0046] 本实施例对本发明方法的重复性和加标回收率的检测方法如下：
[0047] 选取样品6和样品10作为本底，采用样品加标回收率试验，将MI、CMI、BIT和BHT标 准溶液添加到本底中，进行添加回收试验，添加低、中、高=个不同浓度，每个浓度重复测定 5次，色谱分析条件同实施例1，根据分析结果计算本方法水基胶中MI、CMI、BIT和BHT的加标 回收率及加标后测定值的相对标准偏差，结果如表3所示。
[0048] 表3本方法的加标回收率试验结果(n = 5)
[0050]由表3可见，回收率在88.7%~93.8%之间，相对标准偏差(RSD)小于5.0%，说明 本法的回收率较高，重复性较好。能满足试验对准确度和精密度的要求。
【主权项】
1. 一种水基胶中甲基异噻唑啉酮（MI)、甲基氯异噻唑啉酮（CMI)、苯并异噻唑啉酮 (BIT)和2，6_二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT)残留量的共检出测定方法，其特征在于该方法包 括以下步骤： (1) 标准溶液的配制:配制具有浓度梯度的MI、CMI、BIT和ΜΓ标准工作溶液； (2) 样品溶液的制备:使用水作为分散剂，采用甲醇作为萃取剂，在室温下经漩涡振荡 萃取后，再离心分离，取上层清液经膜过滤，取滤液作为样品溶液； (3) 液相色谱分析:利用高效液相色谱仪分别对标准溶液和样品溶液进行检测分析； (4) 水基胶中MI、CMI、BIT和BHT残留量的计算。2. 根据权利要求1所述的水基胶中MI、CMI、BIT和BHT残留量的共检出测定方法，其特征 在于:所述标准工作溶液的配制方法如下：准确称取2-甲基-3 (2H)-异噻唑啉酮(MI)50mg、 5-氯-2-甲基-2H-异噻唑-3-酮(CMI) lOOmg、1，2-苯并异噻唑基-3(2H)_ 酮(BIT)50mg和 2，6-二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT)lOmg分别置于100mL棕色容量瓶中，加入甲醇在超声条件下溶 解并定容至刻度，摇匀，配制成标准储备液。储备液放入冰箱冷藏保存。移取准储备液，按照 逐级稀释的方法，配制了 2-甲基-3(2H)_异噻唑啉酮(MI)浓度为0.5、2.5、5.0、25.0、50.0μ g/mL，5-氯-2-甲基-2Η-异噻唑-3-酮(CMI)浓度为 1 · 0、5 · 0、10 · 0、50 · 0、100 · Oyg/mL，1，2-苯 并异噻唑基-3(2H)_ 酮(BIT)浓度为0.5、2.5、5.0、25.0、50.(^8/1^，2,6-二叔丁基-4-甲基 苯酚(BHT)浓度为0.5、1.0、5.0、10.0、20.0 yg/mL的系列混合标准工作溶液。3. 根据权利要求1所述的水基胶中MI、CMI、BIT和BHT残留量的共检出测定方法，其特征 在于:所述样品溶液的制备方法是:准确称取〇. 3g样品（精确至0. lmg)后，置于50mL具塞三 角瓶中，用5mL超纯水分散后再加入20mL甲醇，盖紧瓶塞，在室温条件下，涡旋振荡萃取 lOmin;之后以5000r/min离心5min，取上层清液，采用孔径为0.22μηι膜过滤，滤液即为所述 样品溶液。4. 根据权利要求1所述的水基胶中MI、CMI、BIT和ΒΗΤ残留量的共检出测定方法，其特征 在于:所述的色谱分析条件为色谱柱采用C18液相色谱柱，色谱柱温度为30°C，进样量为20μ L，二极管阵列检测器检测波长220nm;流动相:Α为HPLC级别乙腈，Β为超纯水，采用梯度洗脱 程序，即0.0~5. Omin，流动相六从5 %递增至20 %，流速从0.5mL/min递增至1. OmL/min; 5.0 ~16 · Omin，流动相A从20 %递增至95 %，流速从1 · OmL/min递增至1 · 5mL/min ; 16 · 0~19.〇111；[11，95%的流动相4和1.51]1]^/1]1；[11的流速保持不变；19.0~20.〇1]1；[11，还原为初始状态 5 %的流动相A，流速还原为0.5mL/min，总洗脱时间为20分钟。5. 根据权利要求1所述的水基胶中MI、CMI、BIT和BHT残留量的共检出测定方法，其特征 在于:所述的水基胶中MI、CMI、BIT和BHT残留量的计算方法如下：首先将标准物质配制成一 定浓度的标准溶液，进行高效液相色谱分析测定。以MI、CMI、BIT和BHT标准溶液的峰面积与 其各自标准溶液的质量浓度进行线性回归分析，得到其标准溶液工作曲线;然后将样品溶 液检出的目标物峰面积代入标准溶液工作曲线，即得到样品溶液中MI、CMI、BIT和BHT的质 量浓度，再根据公式换算得到样品中MI、CMI、BIT和BHT的残留量。
【专利摘要】本发明公开了一种水基胶中防腐剂和抗氧化剂残留量的共检出测定方法，包括样品溶液的制备、高效液相色谱分析及测定结果的计算等步骤。该共检出测定方法具有检测时间短、操作简便、灵敏度高、回收率高及重复性好等优点。本发明方法的色谱条件使MI、CMI、BIT和BHT的色谱峰与杂质色谱峰分离较好，并且具有很好的相关性，检测限分别为0.065、0.121、0.046和0.052μg/mL，低中高三个添加水平下的加标平均回收率在88.7％～93.8％之间，样品测试结果的平均相对标准偏差小于5％，说明本法的回收率较高，重复性较好。本发明为水基胶的质量监督提供了科学依据。
【IPC分类】G01N30/06
【公开号】CN105527355
【申请号】CN201510894407
【发明人】陈建华, 缪恩铭, 李雪梅, 徐济仓, 魏玉玲, 耿永勤, 李晶, 杨叶昆, 黄海涛
【申请人】云南中烟工业有限责任公司
【公开日】2016年4月27日
【申请日】2015年12月8日